STR基因座突變對(duì)親子鑒定準(zhǔn)確性的影響研究

楊 飛 董露斌

（浙江中和司法鑒定中心法醫(yī)毒物實(shí)驗(yàn)室，浙江 寧波 315012）

親子鑒定是指運(yùn)用生物學(xué)、遺傳學(xué)及有關(guān)學(xué)科的理論與技術(shù)，根據(jù)遺傳性狀在自帶和親代之間的遺傳規(guī)律，從而判斷被控的父母與子女之間是否存在親緣關(guān)系［1］。當(dāng)前，親子鑒定涉及案件包括：非婚生子女的撫養(yǎng)糾紛、財(cái)產(chǎn)繼承糾紛及醫(yī)院產(chǎn)房抱錯(cuò)新生兒引起的親生子認(rèn)定［2］。既往研究表明［3］：短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）是個(gè)體識(shí)別能力極強(qiáng)的人類基因組，具有相對(duì)穩(wěn)定的遺傳性，是當(dāng)前階段親子鑒定、個(gè)體識(shí)別最為常見的遺傳標(biāo)記。近年來，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，STR復(fù)合擴(kuò)增分型系統(tǒng)在親子鑒定中得到應(yīng)用，但是越來越多的研究證實(shí)，STR基因座組合的選擇會(huì)對(duì)親子鑒定結(jié)果產(chǎn)生影響，但是該結(jié)論尚未得到證實(shí)［4］。因此，本研究以親子鑒定標(biāo)本3384份作為對(duì)象，探討STR基因座突變對(duì)親子鑒定準(zhǔn)確性的影響，報(bào)道如下。

一、資料與方法

（一）臨床資料

選擇2018年3月—2020年2月親子鑒定標(biāo)本3384份作為對(duì)象，涉及案例2153個(gè)。標(biāo)本中，血液標(biāo)本3380份，口腔咽拭子標(biāo)本4份。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均能順利完成親子鑒定標(biāo)本采集；（2）具有完整的基線資料與隨訪資料。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并精神異常、血液系統(tǒng)疾病或器質(zhì)性疾病者；（2）嚴(yán)重肝腎功能異常、凝血功能異常者。

（二）方法

（1）儀器與設(shè)備。3130型自動(dòng)遺傳分析儀，購于美國AB公司；Identifiler plus試劑盒，購于基因點(diǎn)認(rèn)知技術(shù)北京有限公司；9700型PCR擴(kuò)增儀，購于美國AB公司；（2）方法。①DNA的提取與擴(kuò)增。采用Identifiler plus試劑盒完成15個(gè)STR基因座復(fù)合擴(kuò)增，包括：D8S1179、D2S1339、D19S433、D21S11、CSF1PO、TH01、D16S539、D3S1358、FGA、TPOX、D18S51、D2S1338，控制整個(gè)反應(yīng)體系為10uL，根據(jù)親子鑒定需要設(shè)置相關(guān)參數(shù)：30℃下操作10min；42℃處理30min；99℃下處理5min；5℃下處理5min，合計(jì)完成循環(huán)35個(gè)，最終10min延長，溫度72℃，將最終獲得的產(chǎn)物放置在4℃下，保存；②擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)。將上述獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物采用Chelex-100提取模板DNA，將最終獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)3500DX基因分子儀完成毛細(xì)血管電泳，并采用全自動(dòng)分析儀，參考SF/Z JD0105001-2016技術(shù)完成親權(quán)關(guān)系的確定。

（三）統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS18.0軟件處理，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，采用n（%）表示，計(jì)量資料行t檢驗(yàn)，采用（±s）表示，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

子鑒定標(biāo)本3384份中，支持親子關(guān)系2122例，三聯(lián)體875例，二聯(lián)體1247例，合計(jì)觀察到減數(shù)分裂1958次，16例基因座突變，突變率為0.82%。突變率排在前三位的分別為：D8S1179基因、D21S11基因、D2S1339基因和D19S433基因，分別占：0.204%、0.204%、0.102% 和 0.10%，見表1。

表1 STR基因座在親子鑒定中突變率分析

三、討論

STR是目前法醫(yī)鑒定過程中使用最多、最為廣泛的長度多態(tài)性遺傳標(biāo)記，具有高度的多態(tài)性，更加符合、遵循孟德爾遺傳規(guī)律，廣泛用于親子鑒定、個(gè)體的識(shí)別、遺傳病連鎖等領(lǐng)域中。本研究中，子鑒定標(biāo)本3384份中，支持親子關(guān)系2122例，三聯(lián)體875例，二聯(lián)體1247例，合計(jì)觀察到減數(shù)分裂1958次，16例基因座突變，突變率為0.82%。突變率排在前三位的分別為：D8S1179基 因、D21S11基 因、D2S1339基 因和D19S433基因，分別占：0.204%、0.204%、0.102%和0.10%，說明STR在DNA合成過程中突變率較高，導(dǎo)致基因突變，從而造成結(jié)果分析偏差甚至誤判。國外學(xué)者研究表明：STR基因座突變來源有明顯的性別差異，且父親突變率更高，可能與男性靜母細(xì)胞在形成精子過程中需要經(jīng)歷多次復(fù)制有關(guān)，復(fù)制次數(shù)越多，突變率越高，與本研究結(jié)果相符［5］。

綜上所述，STR基因座在親子鑒定中突變率相對(duì)較高，且父系突變比例相對(duì)較高，會(huì)對(duì)親子鑒定結(jié)果產(chǎn)生影響。因此，親子鑒定過程中應(yīng)結(jié)合基因突變情況計(jì)算侵權(quán)指數(shù)，提高親子鑒定準(zhǔn)確性。