中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用

劉貴洲

摘 ?要：目的 ?分析中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果。方法 ?選擇青島市黃島區(qū)中醫(yī)醫(yī)院于2020年1月～2020年5月所庫(kù)存的30味中藥材進(jìn)行調(diào)查研究，所有藥材均采用中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法進(jìn)行鑒別，鑒別后，對(duì)比中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率，以杜仲藥材為例，分析圖譜的建立以及重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果 ?鑒別后，中藥特征圖譜技術(shù)對(duì)中藥材鑒別正確率顯著高于傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。杜仲圖譜建立中，2號(hào)峰為綠原酸，4號(hào)峰為松脂醇二葡萄糖苷。其中2號(hào)峰峰形較好，前后無(wú)雜質(zhì)峰干擾，分離完全，出峰時(shí)間居中，選其作為參考峰，重復(fù)性良好。結(jié)論 ?中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果顯著，能顯著提高對(duì)中藥材鑒別正確率，在一定程度上保證了中藥材的可靠性，以達(dá)到更好的中藥材使用率，具有專(zhuān)屬性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，可以有效鑒別和評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量，更有利于對(duì)疾病的治療，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，值得進(jìn)一步臨床應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：中藥特征圖譜技術(shù);中藥;鑒定;應(yīng)用效果

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.1 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ?文章編號(hào)：1009-8011（2021）-4-0028-03

中醫(yī)是我國(guó)特有的治療方式，也是我國(guó)醫(yī)療行業(yè)中重要的一部分，具有悠久的歷史，長(zhǎng)達(dá)數(shù)千年，主要以研究人體生理、病理以及疾病診斷和防治為主[1]，而中藥在中醫(yī)中是不可缺少的一部分，根據(jù)傳統(tǒng)的醫(yī)藥理論，經(jīng)過(guò)采集、煉制、提取、制成藥物，中藥不僅僅作為藥物，更是標(biāo)志著我國(guó)的文化傳承，享譽(yù)國(guó)內(nèi)國(guó)外。中藥對(duì)于中醫(yī)的治療來(lái)說(shuō)至關(guān)重要，是治療疾病的關(guān)鍵手段。隨著現(xiàn)代醫(yī)療科技的發(fā)展，我國(guó)也在不斷加大對(duì)中醫(yī)方面的技術(shù)支持，對(duì)藥材質(zhì)量也越來(lái)越重視，良好的藥材質(zhì)量有利于提升藥物對(duì)治療疾病的有效程度。而在傳統(tǒng)的藥材鑒別中，往往通過(guò)聞、觸、嘗、視、水試以及火試等方式進(jìn)行辨別[2]，但由于藥材傳統(tǒng)鑒別易受藥材的形態(tài)、數(shù)量以及部位所影響，從而無(wú)法保證藥材質(zhì)量，降低了臨床用藥的安全性[3]。因此，提高藥材的鑒別的準(zhǔn)確率對(duì)臨床合理用藥至關(guān)重要，基于此背景下，青島市黃島區(qū)中醫(yī)醫(yī)院對(duì)中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果進(jìn)行了相關(guān)研究與分析，具體論述如下。

1 ?資料與方法

1.1 ?一般資料

選擇青島市黃島區(qū)中醫(yī)醫(yī)院于2020年1月～2020年5月所庫(kù)存的30味中藥材進(jìn)行調(diào)查研究，所有藥材均采用中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法進(jìn)行鑒別，其中包括丹參、人參、西洋參、黃柏、黃連、白芍、白前、白薇、白芷、板藍(lán)根、半夏、柴胡、赤芍、川芎、當(dāng)歸、地黃、地榆、防風(fēng)、附子、甘草、何首烏、黃精、黃連、杜仲、紅花、女貞子、連翹、魚(yú)腥草、益母草、五倍子等。

1.2 ?方法

傳統(tǒng)鑒別方法：通過(guò)聞、觸、嘗、視、水試以及火試進(jìn)行中藥材鑒別，聞即通過(guò)嗅覺(jué)識(shí)別中藥材的氣味，如敗醬草具有特異之氣，新鮮時(shí)無(wú)異味，但曬干后則有臭醬氣味;檀香氣味芳香馥郁，燃燒時(shí)香氣更濃等。觸即通過(guò)手觸摸中藥材的重量、堅(jiān)實(shí)、老嫩以及松軟等，如豬苓質(zhì)感硬且較輕。嘗即通過(guò)品嘗中藥材味道，視即通過(guò)眼睛觀察中藥材的外形、紋理以及色澤等方面，水試或火試即通過(guò)水與火鑒別中藥材真假。鑒別人員由中藥鑒定委員會(huì)成員組成，名譽(yù)主委1名，男，57歲;委員會(huì)顧問(wèn)2名，男，48歲，男，50歲;副秘書(shū)長(zhǎng)2名，男45歲，男51歲;委員4名，男性3名，女性1名，年齡43～55歲;青年委員6名，男性3名，女性3名，年齡29～37歲。鑒別藥物的品種、藥性、真假，根據(jù)《中國(guó)藥典》監(jiān)督管理藥品質(zhì)量的法定技術(shù)為標(biāo)準(zhǔn)。

中藥特征圖譜技術(shù)：將所選藥材進(jìn)行生物特征圖譜與化學(xué)特征圖譜分析，鑒定其質(zhì)量。設(shè)備：色譜儀（國(guó)家：美國(guó)，品牌：賽默飛，型號(hào)：TRACE GC ULTRE）;超純水機(jī)：（生產(chǎn)企業(yè)：南京培胤儀器有限公司，品牌：培胤，型號(hào)：PY-LDS-50/80/100/120YY醫(yī)用超純水機(jī)），溶液制備：以杜仲藥材為樣品進(jìn)行圖譜分析，將杜仲研磨成粉狀，準(zhǔn)確稱(chēng)量1 g、2 g、3 g、分為5份，放入錐形瓶加入25 mL甲醇，超聲處理20分鐘，搖均，取續(xù)濾液為樣品溶液。取綠原酸150 μg、松脂醇二葡萄糖苷20 μg為對(duì)照品，加甲醇制成1 mL的混合溶液。色譜條件：色譜柱為4.6 mm×250 mm，5 μm，流動(dòng)相：以乙腈為流動(dòng)相A，以0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B;采用梯度洗脫方式;柱溫：30 ℃;流速：1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：227 nm杜仲特征圖譜的建立和分析：將杜仲研磨成粉，按照上述方法制成試品溶液和對(duì)照品溶液，按照上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，確定色譜圖中出峰時(shí)間基本一致峰面積較大的峰為共有特征色譜峰。重復(fù)性試驗(yàn)，取同一批杜仲，按照上述方法制備5份試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以參照峰為準(zhǔn)進(jìn)行各個(gè)特色峰的相對(duì)保留時(shí)間。

1.3 ?觀察指標(biāo)

比較中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別的正確率。

1.4 ?統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS21.0對(duì)數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，使用χ2校檢;P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

2.1 ?中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率對(duì)比

鑒別后，中藥特征圖譜技術(shù)對(duì)中藥材鑒別正確率100%，顯著高于傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率83.3%，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 ?杜仲圖譜建立和分析

2號(hào)峰為綠原酸，4號(hào)峰為松脂醇二葡萄糖苷1。其中2號(hào)峰峰形較好，前后無(wú)雜質(zhì)峰干擾，分離完全，出峰時(shí)間居中，選其作為參考峰。見(jiàn)圖1。

圖1 ?杜仲HPLC特征圖譜（5個(gè)特征峰，2號(hào)峰為綠原酸對(duì)照峰）

2.3 ?杜仲圖譜重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

選擇同一批杜仲分為1～3 g為樣品進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，本方法保留時(shí)間的重復(fù)性良好。見(jiàn)表2。

3 ?討論

化學(xué)特征圖譜是一種建立在中藥成分研究基礎(chǔ)上的一種鑒別方法，通過(guò)軟件與化學(xué)手段分析中藥中的化學(xué)成分，達(dá)到鑒別藥材的效果[4-5]，化學(xué)特征圖譜包括色譜法與光譜法，不僅能有效的鑒別藥材的真?zhèn)巍⑵贩N，同時(shí)也可以確定藥材的主要特征，如相似度、峰值面積以及比例等[6]，從而更好得判斷藥材產(chǎn)地、優(yōu)劣等。

色譜法包括了高效液相色譜法（HPLC）、薄層色譜法（TLC）、高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）以及氣相色譜法（GC）等[7]，HPLC是目前最多用的中藥特征圖譜鑒別方法，具有較好的穩(wěn)定性與重現(xiàn)性[8]。

經(jīng)過(guò)研究后發(fā)現(xiàn)，鑒別后，中藥特征圖譜技術(shù)對(duì)中藥材鑒別正確率顯著高于傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。杜仲圖譜建立中，2號(hào)峰為綠原酸，4號(hào)峰為松脂醇二葡萄糖苷。其中2號(hào)峰峰形較好，前后無(wú)雜質(zhì)峰干擾，分離完全，出峰時(shí)間居中，選其作為參考峰，重復(fù)性良好。說(shuō)明了中藥特征圖譜對(duì)于中藥材的鑒別有重要的作用，提高鑒別藥物質(zhì)量效率。雖然中藥特征圖譜對(duì)于藥物的鑒定具有穩(wěn)定、真實(shí)、可靠等優(yōu)點(diǎn)，但是我國(guó)對(duì)于重要特征圖譜技術(shù)的研究是近幾年才開(kāi)始，還未有較系統(tǒng)的方法體系和數(shù)據(jù)依據(jù)，仍然處于研究探索階段，距離廣泛應(yīng)用還需要時(shí)間和推廣。首先應(yīng)加強(qiáng)中藥特征圖譜的系統(tǒng)構(gòu)建，選擇合理、簡(jiǎn)單、便于實(shí)施的鑒別體系，尋找和研究出可以記錄藥材特征、數(shù)據(jù)等中藥信息的軟件平臺(tái)。

綜上所述，中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果顯著，能顯著提高對(duì)中藥材鑒別正確率，在一定程度上保證了中藥材的可靠性，以達(dá)到更好的中藥材使用率，具有專(zhuān)屬性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，可以有效鑒別和評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量，更有利于對(duì)疾病的治療，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，值得進(jìn)一步臨床應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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[8]楊雪梅.淺談幾種中藥指紋圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用[J].中國(guó)藥事，2017，31（2）：119-122.