• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同病原學(xué)檢測(cè)方法對(duì)肺結(jié)核復(fù)治確診的價(jià)值分析

    2021-07-29 08:08:04潘育文肖海浩湯春梅張言斌蘇鐸華李天義
    現(xiàn)代醫(yī)院 2021年6期
    關(guān)鍵詞:抗酸活動(dòng)性涂片

    潘育文 肖海浩 湯春梅 張言斌 蘇鐸華 張 琳 李天義

    肺結(jié)核是我國(guó)最常見(jiàn)的傳染病之一,其發(fā)病和死亡數(shù)長(zhǎng)期占據(jù)我國(guó)法定傳染病報(bào)告的第二位,2019年全國(guó)報(bào)告的新發(fā)結(jié)核病為77.576 4萬(wàn)例,發(fā)病率為55.5491/10萬(wàn)[1]。肺結(jié)核復(fù)發(fā)是不容忽視的問(wèn)題,國(guó)內(nèi)的調(diào)查認(rèn)為肺結(jié)核的復(fù)發(fā)率在5.3%~6.7%左右[2-3],每年確診的肺結(jié)核復(fù)治病例不在少數(shù)。肺結(jié)核復(fù)治病例有其一定的特殊性,由于癥狀、體征多無(wú)特異性,血清學(xué)及免疫學(xué)檢查、胸部影像學(xué)檢查等很難迅速地做出精準(zhǔn)的活動(dòng)性判斷,確定肺結(jié)核是否為復(fù)治的“金標(biāo)準(zhǔn)”仍是病原學(xué)檢查。本研究對(duì)擬診為肺結(jié)核復(fù)治患者的痰或支氣管肺泡灌洗液(BALF)標(biāo)本,進(jìn)行傳統(tǒng)的涂片找抗酸桿菌和分枝桿菌培養(yǎng),同時(shí)進(jìn)行2種分子生物學(xué)快速檢測(cè):利福平耐藥實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)(Gene Xpert MTB/RIF)和結(jié)核分枝桿菌RNA恒溫?cái)U(kuò)增實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)( SAT-TB),探討不同病原學(xué)檢測(cè)方法對(duì)診斷肺結(jié)核復(fù)治的臨床應(yīng)用價(jià)值。

    1 資料與方法

    1.1 研究對(duì)象

    收集廣州市胸科醫(yī)院結(jié)核內(nèi)科 2019年1月—12月期間住院收治的擬診為肺結(jié)核復(fù)治患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn):①有咳嗽、咯痰、咯血、胸痛、呼吸困難等呼吸道癥狀,伴或不伴發(fā)熱、消瘦等全身中毒癥狀;②影像學(xué)檢查結(jié)果考慮有肺結(jié)核的影像學(xué)改變;③既往有肺結(jié)核病史,不合理或不規(guī)則用抗結(jié)核藥物≥1月或曾規(guī)律抗結(jié)核治療完成療程;④初治失??;⑤痰或BALF均完成涂片找抗酸桿菌,分枝桿菌培養(yǎng),Gene Xpert MTB/RIF和SAT-TB檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn):①初治肺結(jié)核;②既往無(wú)肺結(jié)核病史;③病歷資料不完全。

    診斷標(biāo)準(zhǔn):復(fù)治肺結(jié)核與非活動(dòng)性肺結(jié)核(含非結(jié)核分枝桿菌肺病)的診斷參考《WS288-2017肺結(jié)核診斷》的標(biāo)準(zhǔn)[4];非活動(dòng)性肺結(jié)核的其他肺部疾病診斷參考林果為主編的《實(shí)用內(nèi)科學(xué)》呼吸系統(tǒng)疾病章節(jié)[5]。

    1.2 儀器與方法

    1.2.1 涂片找抗酸桿菌 根據(jù)中國(guó)防癆協(xié)會(huì)2006年版《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》,采用熒光涂片染色鏡檢法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行涂片染色和鏡檢。

    1.2.2 分枝桿菌培養(yǎng) 使用BectonDickinson公司的BACTEC MGIT 960系統(tǒng),按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明書(shū)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行快速液體培養(yǎng)。

    1.2.3 Gene Xpert MTB/RIF檢測(cè) 設(shè)備及試劑盒來(lái)自于賽沛公司,按照儀器、試劑操作說(shuō)明書(shū)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。

    1.2.4 SAT-TB檢測(cè) 檢測(cè)試劑盒來(lái)自于上海仁度生物科技公司,應(yīng)用ABI 7300熒光定量 PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行檢測(cè)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    2 結(jié)果

    2.1 患者的一般情況

    符合標(biāo)準(zhǔn)的患者共323例,其中男242人、女81人,年齡19~87歲,平均年齡(56.08±13.77)歲;最后診斷肺結(jié)核復(fù)治92例(28.48%),非活動(dòng)性肺結(jié)核231例(71.52%),其中支氣管擴(kuò)張并感染76例,肺炎61例,慢性肺曲霉病(Chronic pulmonary aspergillosis,CPA)55例,非結(jié)核分枝桿菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)肺病36例,肺癌3例。

    2.2 不同檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果

    在肺結(jié)核復(fù)治確診病例組中Gene Xpert MTB/RIF的陽(yáng)性檢出率為95.65%,分枝桿菌培養(yǎng)為89.13%,兩種方法進(jìn)行比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=2.783 2,P>0.05);SAT-TB的陽(yáng)性檢出率78.26%,涂片法為69.57%,兩種方法進(jìn)行比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=1.803 9P>0.05);Gene Xpert MTB/RIF和分枝桿菌培養(yǎng)的陽(yáng)性檢出率比SAT-TB和涂片法明顯較高(P<0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 323例患者不同檢測(cè)方法的結(jié)果 [n]

    2.3 不同檢測(cè)方法的診斷效能

    以最后確診肺結(jié)核復(fù)治作為標(biāo)準(zhǔn),來(lái)評(píng)估不同檢測(cè)方法的效能,結(jié)果顯示:靈敏度的高低順序?yàn)镚ene Xpert MTB/RIF>分枝桿菌培養(yǎng)>SAT-TB>涂片法;特異度的高低順序?yàn)镾AT-TB>Gene Xpert MTB/RIF>涂片法>分枝桿菌培養(yǎng);Youden指數(shù)的大小順序?yàn)镚ene Xpert MTB/RIF>SAT-TB>分枝桿菌培養(yǎng)>涂片法;陽(yáng)性預(yù)測(cè)值的高低順序?yàn)?SAT-TB>Gene Xpert MTB/RIF>涂片法>分枝桿菌培養(yǎng);陰性預(yù)測(cè)值的高低順序?yàn)?Gene Xpert MTB/RIF>分枝桿菌培養(yǎng)>SAT-TB>涂片法,見(jiàn)表2。

    表2 不同檢測(cè)方法對(duì)肺結(jié)核復(fù)治確診的診斷效能 [%]

    3 討論

    結(jié)核的轉(zhuǎn)歸方式,注定了大部分肺結(jié)核患者治愈后影像學(xué)檢查仍保留著結(jié)核的特點(diǎn),當(dāng)再次出現(xiàn)癥狀時(shí),影像學(xué)檢查難以準(zhǔn)確區(qū)分肺部病灶是否出現(xiàn)活動(dòng)[6]。對(duì)肺結(jié)核活動(dòng)性的判斷,常規(guī)的CRP、ESR等炎性指標(biāo)無(wú)太多臨床意義,而傳統(tǒng)的結(jié)核菌素皮膚實(shí)驗(yàn)(Tuberculin skin test,TST)和近年來(lái)廣泛開(kāi)展的結(jié)核分枝桿菌特異性γ干擾素釋放試驗(yàn)(Interferon gamma release assays,IGRAs)的價(jià)值也有限[7-8]。因此病原學(xué)檢查才是確定肺結(jié)核是否復(fù)治的金標(biāo)準(zhǔn),涂片找抗酸桿菌、分枝桿菌培養(yǎng)和分子生物學(xué)檢測(cè)是目前臨床廣泛開(kāi)展的結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)技術(shù)。

    涂片找抗酸桿菌在本組研究不同方法中,對(duì)肺結(jié)核復(fù)治確診病例的陽(yáng)性檢出率最低,靈敏度也是最低,與國(guó)內(nèi)研究報(bào)道一致[9],Youden指數(shù)最小,其診斷效能最差。傳統(tǒng)的涂片找抗酸桿菌,雖然有簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì),易于開(kāi)展的優(yōu)點(diǎn),但其缺點(diǎn)也比較明顯:陽(yáng)性率低,無(wú)法辨別死菌與活菌,不能區(qū)分是MTB還是NTM。近年來(lái)隨著分子生物學(xué)檢測(cè)手段的發(fā)展,涂片陽(yáng)性的標(biāo)本可進(jìn)一步行線性探針技術(shù)( LPAs)、熒光 PCR 溶解曲線法、基因芯片技術(shù)等檢測(cè),通過(guò)對(duì)結(jié)核分枝桿菌核酸能否檢出,從而可初步區(qū)分MTB或NTM,并對(duì)檢出的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行異煙肼和利福平等主要抗結(jié)核藥物的耐藥快速檢測(cè), 1~2天內(nèi)可出報(bào)告結(jié)果[10],因此涂片找抗酸桿菌對(duì)于肺結(jié)核復(fù)治確診及治療方案的制定,仍具有重要的參考價(jià)值。

    本文的研究結(jié)果顯示分枝桿菌培養(yǎng)的靈敏度僅次于Gene Xpert MTB/RIF,對(duì)肺結(jié)核復(fù)治確診病例的陽(yáng)性檢出率也較高,但特異度較差,診斷效能優(yōu)于涂片,但差于兩種分子生物學(xué)檢測(cè)方法。培養(yǎng)仍是目前診斷肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn),快速液體法培養(yǎng)較傳統(tǒng)的羅氏培養(yǎng)已有明顯改進(jìn),但平均報(bào)告陽(yáng)性時(shí)間也要9.5~10.2 d[11-12],耗時(shí)仍較長(zhǎng),仍很難滿足臨床的診療需要,但培養(yǎng)陽(yáng)性后可進(jìn)一步做菌型鑒定區(qū)分MTB還是NTM,同時(shí)做藥敏實(shí)驗(yàn),對(duì)最終的確診,臨床用藥的選擇以及后續(xù)耐藥性監(jiān)測(cè)等具有其他方法無(wú)法替代的作用。本研究中共有36.53%(118/323)的患者培養(yǎng)陽(yáng)性,其中30.51%(36/118)通過(guò)菌型鑒定確定為NTM,因此當(dāng)可疑肺結(jié)核復(fù)發(fā)患者的培養(yǎng)結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性時(shí),應(yīng)注意是否有NTM的可能,應(yīng)等待最終菌型鑒定結(jié)果才能作出最后結(jié)論。

    臨床需要快速、靈敏度和特異度高的病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)來(lái)幫助診斷肺結(jié)核是否為復(fù)治,近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)提供了可能。Gene Xpert MTB/RIF是世界衛(wèi)生組織唯一推薦用于快速診斷結(jié)核的檢測(cè)方法,以全自動(dòng)半巢式實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)為基礎(chǔ),能在2 h內(nèi)迅速檢出結(jié)核分枝桿菌,同時(shí)確定有無(wú)對(duì)利福平耐藥[13],是目前已知分子生物學(xué)檢測(cè)手段中具有最高靈敏度的方法[14]。本研究Gene Xpert MTB/RIF在肺結(jié)核復(fù)治確診病例組中陽(yáng)性檢出率最高,和分枝桿菌培養(yǎng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在四種檢測(cè)方法中靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值最高,特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值僅次于SAT-TB,Youden指數(shù)最大,反映出其極佳的診斷效能,這與國(guó)內(nèi)外學(xué)者所做的研究基本一致[15-17]。本研究中非活動(dòng)性肺結(jié)核也有6.06%(14/231)的患者Gene Xpert MTB/RIF陽(yáng)性,但檢出結(jié)核分枝桿菌的濃度均為低或極低,考慮出現(xiàn)假陽(yáng)性的主要原因是這些既往有肺結(jié)核的患者,體內(nèi)仍存有死菌[18],也存在標(biāo)本污染的可能性。Gene Xpert MTB/RIF具有極高的靈敏度,但無(wú)法分辨死菌或活菌,因此對(duì)于肺結(jié)核復(fù)治的診斷時(shí)應(yīng)注意,尤其是檢出濃度低或極低時(shí)應(yīng)注意是否為死菌的可能。對(duì)于初治病例,當(dāng)涂片陽(yáng)性,同時(shí)Gene Xpert MTB/RIF檢測(cè)陽(yáng)性,提示標(biāo)本存在MTB,可做出活動(dòng)性結(jié)核的診斷[19],但對(duì)于復(fù)治病例,必須慎重,應(yīng)結(jié)合臨床,綜合培養(yǎng)等其他檢測(cè)手段分析后再做判斷。本組非活動(dòng)性肺結(jié)核病例中,36例NTM肺病有50%(18/36)涂片陽(yáng)性,而同時(shí)Gene Xpert MTB/RIF僅有2.78%(1/36)為陽(yáng)性,提示當(dāng)涂片找抗酸桿菌陽(yáng)性,而同時(shí)Gene Xpert MTB/RIF檢測(cè)陰性時(shí),要高度懷疑NTM肺病的可能。

    SAT-TB是一種應(yīng)用恒溫RNA擴(kuò)增和實(shí)時(shí)熒光技術(shù)同時(shí)檢測(cè)臨床標(biāo)本中結(jié)核分枝桿菌復(fù)合物的方法,可在1.5~2 h內(nèi)快速確定標(biāo)本中有無(wú)結(jié)核分枝桿菌。而 RNA 只存在結(jié)核分枝桿菌活菌中,在結(jié)核菌死亡后會(huì)迅速發(fā)生降解,因此SAT-TB檢測(cè)可有效明確標(biāo)本中有無(wú)存在活菌;同時(shí)與NTM等呼吸道病原體沒(méi)有交叉反應(yīng),是一種簡(jiǎn)便、快捷、具有較高特異性的方法,可提高結(jié)核的檢出率[20]。本研究中SAT-TB對(duì)肺結(jié)核復(fù)治確診病例的陽(yáng)性檢出率與涂片法接近(P>0.05),低于Gene Xpert MTB/RIF和分枝桿菌培養(yǎng)(P<0.05);在四種檢測(cè)方法中特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高,Youden指數(shù)僅次于Gene Xpert MTB/RIF,說(shuō)明SAT-TB對(duì)肺結(jié)核復(fù)治的診斷有高度的準(zhǔn)確性,具有較好的診斷效能,其靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值低于Gene Xpert MTB/RIF和培養(yǎng),這與國(guó)內(nèi)對(duì)3608例疑似肺結(jié)核患者進(jìn)行SAT-TB檢測(cè)的大樣本研究結(jié)果相符[21]。從本研究可看出,當(dāng)SAT-TB和Gene Xpert MTB/RIF同時(shí)陽(yáng)性時(shí),尤其是Gene Xpert MTB/RIF檢出結(jié)核分枝桿菌濃度為中等以上時(shí),基本可判定為肺結(jié)核復(fù)治確診;而SAT-TB為陰性,同時(shí)Gene Xpert MTB/RIF檢出結(jié)核分枝桿菌濃度為低或極低時(shí),應(yīng)注意非活動(dòng)性肺結(jié)核的可能,應(yīng)聯(lián)合培養(yǎng)才能作出正確判斷。

    綜上所述,Gene Xpert MTB/RIF具有較高的靈敏度,SAT-TB有較高的特異度,兩種分子生物學(xué)檢測(cè)方法對(duì)臨床快速診斷肺結(jié)核復(fù)治確診有著重要的應(yīng)用價(jià)值,涂片和培養(yǎng)作為傳統(tǒng)的檢測(cè)手段,仍具有不可替代的作用,多種方法聯(lián)合運(yùn)用,綜合臨床分析,能對(duì)肺結(jié)核復(fù)治進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的診斷。

    猜你喜歡
    抗酸活動(dòng)性涂片
    抗酸染色法、細(xì)菌培養(yǎng)法和實(shí)時(shí)熒光PCR法在分枝桿菌檢查中的應(yīng)用比較
    痰涂片與痰培養(yǎng)在下呼吸道感染診斷中的比較
    金屬活動(dòng)性順序的應(yīng)用
    直腸FH檢測(cè)剩余液涂片用于評(píng)估標(biāo)本取材質(zhì)量的探討
    T-SPOT.TB在活動(dòng)性肺結(jié)核治療效果的監(jiān)測(cè)
    金屬活動(dòng)性應(yīng)用舉例
    低溫高速離心沉淀集菌涂片法查分枝桿菌與直接涂片法查分枝桿菌的比較研究
    活動(dòng)性與非活動(dòng)性肺結(jié)核血小板參數(shù)、D-D檢測(cè)的臨床意義
    PCR技術(shù)、抗酸染色法在肺結(jié)核病理學(xué)診斷中應(yīng)用比較
    改良抗酸染色法在結(jié)核性漿膜炎臨床診斷中的價(jià)值
    男人和女人高潮做爰伦理| 美女高潮的动态| 日韩人妻高清精品专区| 国产毛片a区久久久久| 亚洲经典国产精华液单| 免费av观看视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 久久久久久久久久成人| x7x7x7水蜜桃| 亚洲国产色片| 欧美3d第一页| 欧美色视频一区免费| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 精品国产三级普通话版| 国产精品一及| 久久精品综合一区二区三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 在现免费观看毛片| 好男人在线观看高清免费视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品伦人一区二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品不卡视频一区二区| 联通29元200g的流量卡| 亚洲成a人片在线一区二区| x7x7x7水蜜桃| 一区二区三区免费毛片| videossex国产| 在线观看午夜福利视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产综合懂色| 亚洲图色成人| 在线观看舔阴道视频| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 级片在线观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 又紧又爽又黄一区二区| 悠悠久久av| 国产主播在线观看一区二区| 日日啪夜夜撸| 黄色欧美视频在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 搞女人的毛片| 精品福利观看| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲专区中文字幕在线| 99在线人妻在线中文字幕| 99国产精品一区二区蜜桃av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 麻豆一二三区av精品| 大型黄色视频在线免费观看| 999久久久精品免费观看国产| 国产 一区精品| 有码 亚洲区| 亚洲五月天丁香| 91精品国产九色| 成人精品一区二区免费| 亚洲第一区二区三区不卡| av中文乱码字幕在线| 精品一区二区免费观看| 国产av不卡久久| 国产精品人妻久久久影院| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 天堂动漫精品| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产精品久久视频播放| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| av在线老鸭窝| 无人区码免费观看不卡| 久久精品国产亚洲网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 欧美最黄视频在线播放免费| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 女同久久另类99精品国产91| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产在线男女| 国产一级毛片七仙女欲春2| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 搡老妇女老女人老熟妇| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 美女cb高潮喷水在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 十八禁国产超污无遮挡网站| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产毛片a区久久久久| 嫩草影视91久久| 亚洲精品粉嫩美女一区| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲图色成人| 特级一级黄色大片| 22中文网久久字幕| 最新中文字幕久久久久| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产黄片美女视频| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 黄色欧美视频在线观看| 在线a可以看的网站| 网址你懂的国产日韩在线| 一区二区三区高清视频在线| 久久热精品热| 男女下面进入的视频免费午夜| 五月玫瑰六月丁香| av视频在线观看入口| 国产真实乱freesex| 内地一区二区视频在线| 91在线观看av| 日韩国内少妇激情av| 免费观看在线日韩| 国产 一区精品| 丰满人妻一区二区三区视频av| 偷拍熟女少妇极品色| 久9热在线精品视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 搞女人的毛片| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久99热这里只有精品18| 国产高清有码在线观看视频| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲美女搞黄在线观看 | 午夜久久久久精精品| 搞女人的毛片| 国产av在哪里看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲欧美清纯卡通| 午夜久久久久精精品| 国语自产精品视频在线第100页| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲成人久久爱视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 999久久久精品免费观看国产| 久久99热这里只有精品18| 久久久久久久久久成人| 在线观看66精品国产| 日韩人妻高清精品专区| 久久这里只有精品中国| 日韩欧美免费精品| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 中文字幕久久专区| 成年版毛片免费区| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 老司机午夜福利在线观看视频| 18+在线观看网站| 国产高潮美女av| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 性色avwww在线观看| 国产日本99.免费观看| 免费在线观看日本一区| 免费观看在线日韩| 国产 一区精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲国产色片| 天堂影院成人在线观看| 国产黄片美女视频| 国产一区二区三区av在线 | 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 高清在线国产一区| 黄色一级大片看看| 成人三级黄色视频| 露出奶头的视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 在线国产一区二区在线| 日韩精品青青久久久久久| 久久人人爽人人爽人人片va| 18禁黄网站禁片午夜丰满| netflix在线观看网站| 亚洲专区中文字幕在线| 色综合站精品国产| 成人性生交大片免费视频hd| 日日夜夜操网爽| 亚洲成人久久性| 五月伊人婷婷丁香| 日韩欧美免费精品| 91麻豆av在线| 欧美+日韩+精品| 欧美日本亚洲视频在线播放| 我要搜黄色片| 啦啦啦啦在线视频资源| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 波多野结衣高清作品| 亚洲自偷自拍三级| 欧美成人a在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 成人综合一区亚洲| 亚洲成av人片在线播放无| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美成人a在线观看| 男女那种视频在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 日韩欧美免费精品| 级片在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产精品久久久久久久久免| 国产黄片美女视频| 欧美精品国产亚洲| 男插女下体视频免费在线播放| 国产久久久一区二区三区| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产高清视频在线观看网站| 高清毛片免费观看视频网站| 国产 一区 欧美 日韩| 日本成人三级电影网站| 国产私拍福利视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 中文字幕久久专区| 国产爱豆传媒在线观看| 我要搜黄色片| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 99久久精品一区二区三区| 国产一区二区三区视频了| 亚洲18禁久久av| 男女之事视频高清在线观看| 久久国产乱子免费精品| 神马国产精品三级电影在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲人成网站高清观看| av中文乱码字幕在线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 村上凉子中文字幕在线| 日韩欧美精品免费久久| 欧美潮喷喷水| 久久精品国产自在天天线| 69av精品久久久久久| 91麻豆av在线| 亚洲欧美日韩东京热| 中文字幕av成人在线电影| 国产精品女同一区二区软件 | av天堂中文字幕网| 日日撸夜夜添| 亚洲四区av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲av二区三区四区| 日本 av在线| 真人一进一出gif抽搐免费| 99热精品在线国产| 色在线成人网| 岛国在线免费视频观看| 国产精品永久免费网站| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲熟妇熟女久久| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲男人的天堂狠狠| 伊人久久精品亚洲午夜| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 极品教师在线视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 成年免费大片在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 1000部很黄的大片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久精品国产亚洲av天美| 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久99热6这里只有精品| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 嫩草影院新地址| 99久久无色码亚洲精品果冻| 久久精品影院6| www.www免费av| 午夜视频国产福利| 国产一区二区在线观看日韩| 日韩亚洲欧美综合| 欧美高清成人免费视频www| 国产高清视频在线播放一区| 欧美一区二区国产精品久久精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 不卡一级毛片| 99热只有精品国产| 国产人妻一区二区三区在| 99热这里只有精品一区| 内射极品少妇av片p| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产亚洲91精品色在线| 国产成人aa在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 黄片wwwwww| 毛片一级片免费看久久久久 | 亚洲av不卡在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久人人精品亚洲av| 99久久中文字幕三级久久日本| 男插女下体视频免费在线播放| 国产久久久一区二区三区| 特级一级黄色大片| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美黑人巨大hd| av在线老鸭窝| 国产熟女欧美一区二区| 久久精品影院6| 韩国av在线不卡| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久久久久伊人网av| 丰满人妻一区二区三区视频av| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲熟妇熟女久久| 日本三级黄在线观看| 日韩欧美 国产精品| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产成人av教育| 亚洲色图av天堂| 九九热线精品视视频播放| 成年免费大片在线观看| 欧美三级亚洲精品| 亚洲熟妇熟女久久| 很黄的视频免费| 欧美最黄视频在线播放免费| 日韩人妻高清精品专区| 日韩强制内射视频| 校园春色视频在线观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲人成伊人成综合网2020| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美色欧美亚洲另类二区| 在线a可以看的网站| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 干丝袜人妻中文字幕| 永久网站在线| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 又黄又爽又刺激的免费视频.| av天堂在线播放| 一个人观看的视频www高清免费观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 国产一区二区亚洲精品在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 很黄的视频免费| 国产淫片久久久久久久久| 国产精品99久久久久久久久| 午夜福利18| 毛片一级片免费看久久久久 | 麻豆成人av在线观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 成人二区视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产精品免费一区二区三区在线| 好男人在线观看高清免费视频| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 22中文网久久字幕| 岛国在线免费视频观看| 日韩欧美在线乱码| 免费电影在线观看免费观看| 两人在一起打扑克的视频| 国产精品国产高清国产av| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲图色成人| 深夜a级毛片| av女优亚洲男人天堂| 亚洲欧美日韩东京热| 久久久久久久午夜电影| 精品久久久久久久久久久久久| 身体一侧抽搐| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品国产高清国产av| 国产久久久一区二区三区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美在线一区亚洲| 波多野结衣巨乳人妻| 久久99热这里只有精品18| 亚洲avbb在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 2021天堂中文幕一二区在线观| 免费观看的影片在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 嫁个100分男人电影在线观看| 在线播放无遮挡| 成人特级av手机在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 婷婷色综合大香蕉| 国产v大片淫在线免费观看| 国产男靠女视频免费网站| 国产美女午夜福利| 国产乱人视频| bbb黄色大片| 久久热精品热| x7x7x7水蜜桃| 日本与韩国留学比较| xxxwww97欧美| 日韩欧美精品v在线| 国产亚洲欧美98| 亚洲美女黄片视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 午夜福利高清视频| 能在线免费观看的黄片| 亚洲 国产 在线| 精品一区二区三区视频在线| 在线观看av片永久免费下载| x7x7x7水蜜桃| 亚洲成人中文字幕在线播放| 精品久久久久久成人av| 国产精品免费一区二区三区在线| 老司机福利观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 成人亚洲精品av一区二区| 在线观看一区二区三区| 高清在线国产一区| 99热只有精品国产| 成人美女网站在线观看视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 99热精品在线国产| 精品久久久久久久久av| netflix在线观看网站| 乱人视频在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美zozozo另类| 少妇高潮的动态图| 亚洲精华国产精华精| 九九在线视频观看精品| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 精品一区二区免费观看| 观看免费一级毛片| 亚洲熟妇熟女久久| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 天堂网av新在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲av一区综合| 国内精品一区二区在线观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 精品不卡国产一区二区三区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久国产乱子免费精品| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产私拍福利视频在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲最大成人av| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产久久久一区二区三区| 久久99热这里只有精品18| 亚洲人成网站高清观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 中国美白少妇内射xxxbb| 日本免费a在线| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产成人影院久久av| 三级国产精品欧美在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 色在线成人网| 日本三级黄在线观看| 美女黄网站色视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 日本熟妇午夜| 亚洲欧美清纯卡通| 中文字幕av成人在线电影| 啦啦啦啦在线视频资源| 午夜a级毛片| 老女人水多毛片| 变态另类丝袜制服| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 人妻少妇偷人精品九色| 国产一区二区三区av在线 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 91av网一区二区| 国产av一区在线观看免费| 精品国产三级普通话版| 精品午夜福利视频在线观看一区| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产精品人妻久久久影院| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 噜噜噜噜噜久久久久久91| 天天一区二区日本电影三级| 久久久久九九精品影院| 欧美+亚洲+日韩+国产| 老司机午夜福利在线观看视频| 99久久精品热视频| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲av第一区精品v没综合| 又紧又爽又黄一区二区| 少妇人妻精品综合一区二区 | 网址你懂的国产日韩在线| 免费观看的影片在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲av电影不卡..在线观看| 精品午夜福利在线看| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 日韩欧美免费精品| 精品不卡国产一区二区三区| 99热6这里只有精品| 久久精品国产自在天天线| 最近最新中文字幕大全电影3| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| www.www免费av| 国产乱人视频| 免费黄网站久久成人精品| 日本精品一区二区三区蜜桃| 在线观看舔阴道视频| videossex国产| 午夜福利高清视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 99在线人妻在线中文字幕| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 午夜福利高清视频| 精品人妻熟女av久视频| 两个人的视频大全免费| 麻豆国产av国片精品| 动漫黄色视频在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 成人国产综合亚洲| 男女之事视频高清在线观看| 日韩欧美在线乱码| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产黄a三级三级三级人| 可以在线观看毛片的网站| 天堂√8在线中文| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲精品色激情综合| 国产综合懂色| 99热网站在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 丰满的人妻完整版| 中出人妻视频一区二区| 我的老师免费观看完整版| 最近中文字幕高清免费大全6 | 亚洲av二区三区四区| 一个人免费在线观看电影| 成人精品一区二区免费| 亚洲18禁久久av| 精品久久久久久久久久久久久| 成人三级黄色视频| 国产高清三级在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲中文字幕日韩| 免费看日本二区| 长腿黑丝高跟| 国产精品国产高清国产av| 能在线免费观看的黄片| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 色综合婷婷激情| 性色avwww在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲天堂国产精品一区在线| 舔av片在线| 亚洲电影在线观看av| 久久草成人影院| 国产亚洲91精品色在线| 天天一区二区日本电影三级| 午夜爱爱视频在线播放| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 欧美不卡视频在线免费观看| 无人区码免费观看不卡| 久久久成人免费电影| 色综合婷婷激情| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲在线观看片| 一区二区三区四区激情视频 | 动漫黄色视频在线观看| 特大巨黑吊av在线直播| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产精品乱码一区二三区的特点| 久久久国产成人免费| 一区福利在线观看| 中文字幕高清在线视频| 在线观看午夜福利视频| 国产三级在线视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产爱豆传媒在线观看| 国产精品永久免费网站| 嫩草影院精品99| 999久久久精品免费观看国产| 中出人妻视频一区二区| 亚洲国产欧美人成| 久久香蕉精品热| 久久久国产成人精品二区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲,欧美,日韩| 99在线视频只有这里精品首页| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产在线男女| 嫁个100分男人电影在线观看| 日韩中字成人| 国产伦精品一区二区三区四那| 性色avwww在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 欧美高清成人免费视频www| 禁无遮挡网站| 一区福利在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 人妻少妇偷人精品九色| 久久中文看片网| 人妻制服诱惑在线中文字幕|