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    紫草中羥基萘醌總色素含量測定的穩(wěn)定性研究

    2021-07-28 10:12:40李懷國
    當(dāng)代醫(yī)藥論叢 2021年15期
    關(guān)鍵詞:萘醌藥粉通則

    朱 勇,李懷國

    (佛山市中醫(yī)院制劑中心,廣東 佛山 528000)

    紫草是2020 版《中國藥典》中收載的中藥品種。紫草為紫草科紫草屬植物,以干燥的根入藥。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,紫草性寒,味甘、咸,歸心經(jīng)、肝經(jīng),具有涼血活血、解毒透疹之功效[1]?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,紫草具有抗菌、消炎、抗病毒、抗腫瘤、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、興奮平滑肌等作用,對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌等均有抑制作用,且能加速上皮細(xì)胞的生長,在治療燙傷方面有特效[2]。現(xiàn)階段的研究表明,紫草中的紫草素及乙酰紫草素是其能夠發(fā)揮抗炎作用的主要成分。2020 版《中國藥典》紫草項(xiàng)下羥基萘醌總色素含量的測定方法是:將紫草在50℃下干燥3 h,粉碎(過3 號篩),用95%的乙醇浸泡4 h 后震搖并稀釋,然后按照紫外-可見分光光度法(2020 版《中國藥典》四部通則0401)在516 nm 波長處測定其吸收度,羥基萘醌總色素的含量不得少于0.8%(按左旋紫草素計(jì))[3]。我院自主研發(fā)的紫草油、傷科黃水、傷科黃油紗等均需要應(yīng)用到紫草,我院對紫草藥材質(zhì)量的要求較高,對紫草中羥基萘醌總色素含量的要求是《中國藥典》中規(guī)定的3 倍。本文主要是對紫草中羥基萘醌總色素含量測定的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    紫草(批號:20200717,購自佛山馮了性藥材有限公司),經(jīng)鑒定為紫草科紫草屬植物新疆紫草;左旋紫草素標(biāo)準(zhǔn)品(批號:110769-200405,購自中國生物制品有限公司);L5s 紫外可見分光光度計(jì)(由上海分析儀器廠生產(chǎn));AE200 型電子天平(由瑞士METTLER 公司生產(chǎn));CT-C-I 型熱風(fēng)循環(huán)烘箱(由常州益民干燥設(shè)備有限公司生產(chǎn));WIMER 3001 干粉激光粒度儀(由濟(jì)南微納儀器有限公司生產(chǎn))。

    1.2 方法

    1.2.1 試驗(yàn)方法 1)紫草中羥基萘醌總色素含量的測定。取紫草中藥材,按照2020 版《中國藥典》(四部通則0401)中收載的方法,測定其中羥基萘醌總色素的含量,具體的操作方法是:在50℃的環(huán)境下將紫草干燥3 h,粉碎(過3 號篩),用95%的乙醇浸泡4 h 后震搖并稀釋,然后按照紫外-可見分光光度法(2020 版《中國藥典》四部通則0401)在516 nm波長處測定其吸收度,明確其中羥基萘醌總色素的含量。2)精密度試驗(yàn)。配置左旋紫草素(含量為3%)乙醇溶液標(biāo)準(zhǔn)品及空白樣品,按照2020 版《中國藥典》(四部通則0401)中收載的方法及檢測條件重復(fù)檢測6 次,測定其中羥基萘醌總色素的含量。3)穩(wěn)定性考察。將同一批紫草粉碎成不同等級的細(xì)粉,在相同干燥時間、相同含水量下按照2020 版《中國藥典》(四部通則0401)中收載的方法及檢測條件測定羥基萘醌總色素的含量,考察該方法的穩(wěn)定性。4)準(zhǔn)確度試驗(yàn)。取已知左旋紫草素含量為3%的紫草乙醇溶液6 份(每份5 mL),在其中加入左旋紫草素標(biāo)準(zhǔn)品(左旋紫草素的含量為3%)乙醇溶液6 份(每份5 mL)。將上述兩種溶液混合,得到供試品溶液。按照2020 版《中國藥典》(四部通則0401)中收載的方法及檢測條件測定羥基萘醌總色素的含量,計(jì)算加樣回收率。加樣回收率(%)=(測得量-已知量)/加入量×100%。1.2.2 L9(34)正交試驗(yàn) 根據(jù)2020 版《中國藥典》中收載的紫草測定方法中的主要影響因素,以羥基萘醌總色素含量測定為指標(biāo)進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn),考察藥材的粉碎細(xì)度、干燥時間及含水量對測定結(jié)果的影響。L9(34)正交試驗(yàn)的影響因素和水平詳見表1。

    表1 L9(34)正交試驗(yàn)的影響因素和水平

    2 結(jié)果

    2.1 精密度試驗(yàn)結(jié)果

    通過進(jìn)行精密度試驗(yàn)可知,左旋紫草素(含量為3%)乙醇溶液標(biāo)準(zhǔn)品及空白樣品的平均加樣回收率為101%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)為1.46。

    表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果

    2.2 穩(wěn)定性考察結(jié)果

    通過進(jìn)行穩(wěn)定性考察可知,在紫草藥材粉碎成極細(xì)粉的條件下測得羥基萘醌總色素的含量值較為穩(wěn)定。詳見表3。

    表3 紫草粉碎的粗細(xì)度對羥基萘醌總色素含量測定值的影響

    2.3 L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果

    本研究中進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)的結(jié)果詳見表4。

    表4 L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果

    2.4 羥基萘醌總色素含量測定影響因素的方差分析結(jié)果

    對本研究中影響紫草中羥基萘醌總色素含量測定的因素進(jìn)行方差分析的結(jié)果顯示,藥粉細(xì)度是影響紫草中羥基萘醌總色素含量測定的主要因素,其次為藥粉干燥時間和藥粉含水量。詳見表5。

    表5 羥基萘醌總色素含量測定影響因素的方差分析結(jié)果

    2.5 測定紫草中羥基萘醌總色素含量的最佳條件

    本研究中通過進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)可知,將藥材粉碎成極細(xì)粉、在50℃下干燥3 h、將藥粉的水含量控制在9.0%左右是測定紫草中羥基萘醌總色素含量的最佳條件。

    3 討論

    紫草可涼血活血、解毒透疹,可用于治療血熱毒盛、麻疹、斑疹透發(fā)不暢諸證?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,紫草中的羥基萘醌總色素是其主要藥理成分。通過對紫草中羥基萘醌總色素的含量進(jìn)行測定有利于對其進(jìn)行質(zhì)量控制[4]。我們發(fā)現(xiàn),按照2020 版《中國藥典》(四部通則0401)中收載的方法測定紫草中羥基萘醌總色素的含量時,對檢測條件的要求過于寬泛,測定條件不夠細(xì)化,因此導(dǎo)致測定結(jié)果存在較大差異。近年來,我們在測定紫草中羥基萘醌總色素的含量時細(xì)化了測定條件,提高了藥材含量測定的穩(wěn)定性,有利于藥材的質(zhì)量控制。

    本研究的結(jié)果證實(shí),藥粉細(xì)度是影響紫草中羥基萘醌總色素含量測定的主要因素,其次為藥粉干燥時間和藥粉含水量。將藥材粉碎成極細(xì)粉、在50℃下干燥3 h、將藥粉的含水量控制在9.0% 左右是測定紫草中羥基萘醌總色素含量的最佳條件。

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