• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    美薔薇花粉離體萌發(fā)條件及貯藏特性研究

    2021-07-16 06:02:40華,瑩,蓮,瑩,
    種子 2021年6期
    關(guān)鍵詞:花粉管干燥劑薔薇

    宋 華, 朱 瑩, 鄧 蓮, 杜 瑩, 劉 娜

    (北京市植物園,北京市花卉園藝工程技術(shù)研究中心,城鄉(xiāng)生態(tài)環(huán)境北京實(shí)驗(yàn)室, 北京 100093)

    利用耐寒性強(qiáng)的薔薇與現(xiàn)代月季進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交,是培育耐寒月季的主要途徑之一。美薔薇(Rosabella)是薔薇科(Rosaceae)薔薇屬(Rosa)灌木,為中國(guó)特有種,在北方多個(gè)地區(qū)均有分布,自然分布海拔可達(dá)1 700 m[1],是薔薇屬優(yōu)良的耐寒種質(zhì)資源。有研究指出,美薔薇與現(xiàn)代月季雜交親和性較強(qiáng)[2],可作為培育優(yōu)良耐寒月季的親本。由于目前美薔薇尚未在園林綠化中大量栽培利用,其自然分布多在山區(qū)且花期較晚,因此,在利用自然分布的美薔薇為父本與現(xiàn)代月季進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交時(shí),需將其花粉貯藏至第二年使用。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期貯藏后,花粉能否保持較高活力是雜交成敗的關(guān)鍵。

    花粉貯藏過(guò)程中,生活力受到貯藏溫度、濕度等外界因素的影響。一般認(rèn)為,薔薇屬植物花粉常溫保存時(shí)間較短,活力保持不足一個(gè)月[3-4]。低溫低濕的貯藏條件更利于花粉保存。超低溫保存可以大大延長(zhǎng)花粉的保存時(shí)間[5],但需要特殊的設(shè)備。-20 ℃冷凍保存是節(jié)約能源、簡(jiǎn)便易行的貯藏條件。有研究指出,某些月季品種花粉在-20 ℃冷凍保存,活力可以維持一年以上,而且在190 d內(nèi),與在-80 ℃保存的活力差異不大[6]。薔薇屬不同種(品種)間花粉貯藏特性差異較大[6-7],關(guān)于美薔薇花粉貯藏特性的研究未見(jiàn)報(bào)道。

    花粉離體培養(yǎng)法接近花粉自然萌發(fā)狀況,是測(cè)定花粉生活力的常用方法之一?;ǚ垭x體萌發(fā)受蔗糖、鈣、硼、生長(zhǎng)素等多種因素的影響[8]。薔薇屬不同種(品種)花粉適宜的培養(yǎng)基不同[9-11],美薔薇花粉萌發(fā)的相關(guān)研究較少。本試驗(yàn)擬篩選美薔薇花粉萌發(fā)的最適培養(yǎng)基,并研究不同干燥劑及貯藏溫度對(duì)美薔薇花粉活力的影響,以探索美薔薇花粉長(zhǎng)期貯藏特性,為其在月季遠(yuǎn)緣雜交育種中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    美薔薇(RosabellaRehder & E. H. Wilson)花粉于2017年6月19日采自北京市門(mén)頭溝區(qū)靈山,09:30—10:30時(shí)收集即將開(kāi)放的花苞,13:00時(shí)用鑷子將花苞內(nèi)的花藥取下,所有花藥混合后,置于硫酸紙上,室溫條件下(25 ℃,相對(duì)濕度為30%~40%)干燥約20 h,收集花粉用于花粉離體萌發(fā)測(cè)定及貯藏試驗(yàn)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1花粉萌發(fā)最佳培養(yǎng)基的篩選

    選用L16(45)正交試驗(yàn),各因子水平見(jiàn)表1,各處理重復(fù)3次,每重復(fù)觀察3個(gè)視野,每個(gè)視野花粉總數(shù)不少于50粒,統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度。

    表1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    1.2.2花粉貯藏方法及活力檢測(cè)

    將美薔薇花粉分成小份,每份約2 mg,用硫酸紙包好。一部分放入裝有硅膠或有無(wú)水氯化鈣的離心管中,置于4 ℃冷藏保存,貯藏90 d、180 d、270 d時(shí)各取出1管進(jìn)行花粉活力測(cè)定;另一部分放入不加干燥劑的離心管中,分別置于4 ℃和-20 ℃保存,貯藏90 d、180 d、270 d、360 d、450 d、540 d、630 d時(shí),各取出1管進(jìn)行花粉活力測(cè)定。以篩選出的最佳花粉萌發(fā)培養(yǎng)基進(jìn)行花粉培養(yǎng),各處理重復(fù)3次,每重復(fù)觀察3個(gè)視野,每個(gè)視野花粉總數(shù)不少于50粒,統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)率。

    1.2.3花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度的測(cè)定

    花粉培養(yǎng)參考趙宏波等[12]的方法并稍有改動(dòng),用吸管吸取一定量的培養(yǎng)液滴在載玻片上,用毛筆把花粉均勻地散在培養(yǎng)基上,將載玻片置于鋪有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿中,室溫條件下培養(yǎng)6 h后用Olympus CX 31顯微鏡觀察并用攝像系統(tǒng)截取圖片。

    花粉離體萌發(fā)以花粉管長(zhǎng)于花粉直徑為標(biāo)準(zhǔn)。

    花粉萌發(fā)率(%)=(視野內(nèi)萌發(fā)的花粉數(shù)/視野內(nèi)的花粉總數(shù))×100%。

    使用ImageJ圖像處理系統(tǒng)進(jìn)行花粉管長(zhǎng)度測(cè)量,每個(gè)處理每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇10根花粉管測(cè)量;萌發(fā)數(shù)量不足10根的測(cè)量所有花粉管長(zhǎng)度。

    1.2.4雜交授粉方法

    2018年5月13日,在北京市植物園月季育種基地進(jìn)行雜交授粉。母本選用“金獎(jiǎng)?wù)隆?R.‘Gold Medal’)及“粉后”(R.‘Queen Elizabeth’)2個(gè)月季品種,各挑選50朵即將開(kāi)放的花苞,用鑷子小心地把雄蕊去除,套袋。2018年5月14日,用毛筆將貯藏的美薔薇花粉輕刷在母本柱頭上,套袋。2018年10月8日統(tǒng)計(jì)各雜交組合的結(jié)實(shí)率及單果種子數(shù)。

    結(jié)實(shí)率(%)=(結(jié)實(shí)數(shù)/授粉數(shù)) ×100%;

    單果種子數(shù)(粒)=收獲的種子總數(shù)/結(jié)實(shí)數(shù)。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析;用OriginPro 9.1軟件進(jìn)行圖表制作。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同因子對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)的影響

    對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行主效應(yīng)分析可知(表2、表3),蔗糖、H3BO3、CaCl2、MgSO4·7 H2O、KNO3等5因子對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度均有極顯著影響(p<0.01)。按影響大小排序,影響花粉萌發(fā)率的因子依次為CaCl2>蔗糖>MgSO4·7 H2O>KNO3>H3BO3(表2),即CaCl2對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)率影響最大,其次為蔗糖;影響花粉管長(zhǎng)度的因子依次為CaCl2>蔗糖>KNO3>MgSO4·7 H2O>H3BO3(表3)。

    表2 影響花粉萌發(fā)率的主效應(yīng)分析

    表3 影響花粉管長(zhǎng)度的主效應(yīng)分析

    正交試驗(yàn)均值(表4)表明,不同因子對(duì)花粉萌發(fā)的影響規(guī)律不完全相同。蔗糖濃度較低時(shí)(50~100 g·L-1),隨著蔗糖濃度的增加,美薔薇花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度均逐漸升高;濃度為100 g·L-1時(shí)花粉萌發(fā)率為19.00%,是蔗糖濃度為50 g·L-1時(shí)的3.2倍;花粉管長(zhǎng)度為88.80 μm,是蔗糖濃度為50 g·L-1時(shí)的1.73倍;蔗糖濃度超過(guò)100 g·L-1時(shí),花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度隨蔗糖濃度的增加而逐漸下降,蔗糖濃度為200 g·L-1時(shí)花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度均為最低;說(shuō)明蔗糖最佳濃度為100 g·L-1,過(guò)高或過(guò)低均不利于美薔薇花粉萌發(fā)。不添加H3BO3時(shí)花粉萌發(fā)率較低、花粉管長(zhǎng)度較短,分別為7.31%及41.53 μm;添加0.1 g·L-1H3BO3時(shí),花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度顯著提高至14.26%和67.23 μm;H3BO3濃度高于0.1 g·L-1時(shí),花粉萌發(fā)率顯著降低;說(shuō)明H3BO3最佳濃度為0.1 g·L-1,過(guò)高或過(guò)低均不利于美薔薇花粉萌發(fā)。不添加CaCl2時(shí)花粉萌發(fā)率為18.45%、花粉管長(zhǎng)度為90.43 μm,顯著高于其他水平;CaCl2濃度為0.1 g·L-1時(shí)花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度顯著降低,分別為10.09%和56.55 μm,說(shuō)明添加CaCl2不利于美薔薇花粉萌發(fā)。MgSO4·7 H2O、KNO3對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)率的影響趨勢(shì)類似,不添加MgSO4·7 H2O或KNO3時(shí),花粉萌發(fā)率最低,隨著濃度的增加花粉萌發(fā)率顯著提高,較高濃度(0.2 g·L-1、0.3 g·L-1)時(shí)花粉萌發(fā)率無(wú)顯著差異;花粉管長(zhǎng)度變化趨勢(shì)與花粉萌發(fā)率不同,雖然MgSO4·7 H2O濃度為0.3 g·L-1時(shí)、KNO3濃度為0.2 g·L-1時(shí)花粉管長(zhǎng)度顯著高于其他水平,但在低濃度時(shí),花粉管長(zhǎng)度沒(méi)有隨濃度的增加而上升,MgSO4·7 H2O濃度為0.2 g·L-1、KNO3濃度為0.1 g·L-1時(shí)花粉管長(zhǎng)度出現(xiàn)了顯著下降。

    表4 不同因子水平對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)率和花粉管長(zhǎng)度的影響

    2.2 不同營(yíng)養(yǎng)成分組配對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)的影響

    綜合考慮花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度(表4)可知,不同因子的最佳水平分別為:蔗糖為100 g·L-1,H3BO3為0.1 g·L-1,CaCl2為0,MgSO4·7 H2O為0.3 g·L-1,KNO3為0.2 g·L-1。這與正交試驗(yàn)中的6號(hào)處理的培養(yǎng)基配比吻合(表1)。在正交試驗(yàn)16個(gè)處理中,6號(hào)處理的花粉萌發(fā)率為40.26%、花粉管長(zhǎng)度為166.77 μm,均顯著高于其他處理(表5)。因此可以推斷,美薔薇花粉萌發(fā)最佳培養(yǎng)基為6號(hào)培養(yǎng)基,即10%蔗糖+0.1 g·L-1H3BO3+0.3 g·L-1MgSO4·7 H2O+0.2 g·L-1KNO3。

    表5 美薔薇花粉在正交試驗(yàn)中的萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度

    2.3 不同干燥劑對(duì)花粉活力的影響

    4 ℃貯藏溫度下,無(wú)論是否使用干燥劑,美薔薇花粉活力都隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而降低(圖1)。貯藏90 d時(shí),使用無(wú)水氯化鈣干燥劑的花粉萌發(fā)率最低,為27.33%;ck的花粉萌發(fā)率最高,為33.00%。貯藏180 d時(shí),使用無(wú)水氯化鈣干燥劑的花粉萌發(fā)率較高,15.54%的花粉具有活力;使用硅膠干燥劑和ck的花粉活力較低,萌發(fā)率分別為11.50%和11.24%。方差分析表明,不同處理間的花粉萌發(fā)率無(wú)顯著差異,說(shuō)明使用干燥劑并不能顯著延緩花粉活力的降低;無(wú)論是否使用干燥劑,4 ℃貯藏270 d時(shí)美薔薇花粉萌發(fā)率均低于10%。

    圖1 不同干燥劑對(duì)美薔薇貯藏花粉活力的影響(p<0.05)Fig.1 Effects of different desiccant on pollen viability of Rosa bella pollen in storage(p<0.05)

    2.4 不同貯藏溫度對(duì)花粉活力的影響

    美薔薇花粉活力隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,但不同溫度貯藏的花粉壽命不同(圖2)。4 ℃貯藏90 d時(shí),花粉萌發(fā)率為33.00%;貯藏180 d時(shí),花粉萌發(fā)率迅速降低,為11.33%;貯藏270 d時(shí)花粉萌發(fā)率低于10%;貯藏360 d的花粉不再萌發(fā),失去活力。-20 ℃冷凍的花粉貯藏前期(90~270 d)活力下降較為緩慢,貯藏270 d時(shí),花粉萌發(fā)率為32.71%,與新鮮花粉相比,萌發(fā)率僅降低了20.2%;貯藏270 d后,花粉萌發(fā)率迅速下降,貯藏360 d時(shí)花粉萌發(fā)率為19.88%,為新鮮花粉萌發(fā)率的48.5%;貯藏450 d時(shí)花粉萌發(fā)率不足10%;貯藏540 d時(shí)花粉萌發(fā)率為3.04%,基本喪失活力。-20 ℃更利于花粉長(zhǎng)期保存。

    圖2 不同貯藏時(shí)間不同貯藏溫度對(duì)美薔薇花粉活力的影響Fig.2 Effects of different storage times and temperatures on the vigor of Rosa bella pollen

    2.5 利用雜交育種驗(yàn)證貯藏花粉活力

    利用貯藏330 d的美薔薇花粉與月季品種進(jìn)行人工授粉,結(jié)果(表6)表明,4 ℃貯藏330 d的花粉與月季品種雜交后不能結(jié)實(shí),花粉已失去活力。-20 ℃貯藏330 d的花粉與2個(gè)月季品種雜交后均可以結(jié)實(shí),結(jié)實(shí)率均超過(guò)50%;美薔薇貯藏花粉與“粉后”及“金獎(jiǎng)?wù)隆钡碾s交單果種子數(shù)分別為8.45粒和1.38粒。說(shuō)明-20 ℃不添加干燥劑貯藏330 d的花粉具有活力,應(yīng)用于月季雜交育種中是可行的。

    表6 美薔薇花粉貯藏330 d后在雜交中的結(jié)實(shí)情況

    3 結(jié)論與討論

    花粉離體萌發(fā)受蔗糖、鈣、硼、生長(zhǎng)素等多種因素的影響[8]。本研究中,蔗糖、鈣、硼、鎂、鉀等5因子均對(duì)美薔薇花粉萌發(fā)率及花粉管伸長(zhǎng)有顯著影響。適宜美薔薇花粉萌發(fā)的蔗糖濃度為100 g·L-1,與單瓣黃刺玫花粉萌發(fā)研究結(jié)果一致[13];也有研究認(rèn)為,5%~8%[14]、15%[15]或20%[9]的蔗糖溶液更利于薔薇屬植物花粉的萌發(fā),這種差異應(yīng)該是由不同種類植物的花粉萌發(fā)特性差異導(dǎo)致。低濃度的H3BO3(0.1 g·L-1)顯著促進(jìn)美薔薇花粉萌發(fā),與王澤翻等[13]、王嵐嵐等[16]的研究結(jié)果相似。一般認(rèn)為外源Ca2+可以促進(jìn)花粉萌發(fā)[17],但本研究結(jié)果表明,添加CaCl2不利于美薔薇花粉萌發(fā),與短梗冬青花粉萌發(fā)條件[18]一致。鎂和鉀是植物體內(nèi)重要元素,對(duì)油茶花粉萌發(fā)有明顯的促進(jìn)作用[19],但對(duì)核桃[17]和某些月季品種[16]花粉萌發(fā)沒(méi)有顯著影響。本研究結(jié)果顯示,高濃度的MgSO4·7 H2O或KNO3(0.2~0.3 g·L-1)可顯著提高花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度;但MgSO4·7 H2O或KNO3濃度低于0.2 g·L-1時(shí),花粉管長(zhǎng)度并不隨濃度變化呈規(guī)律性變化,可能由于鈣或蔗糖對(duì)花粉管的伸長(zhǎng)影響更大,且本研究未考慮不同因子間的交互作用,具體原因有待進(jìn)一步研究。

    適宜的花粉貯藏方法可以延長(zhǎng)花粉壽命。有研究表明,比較干燥的環(huán)境(相對(duì)濕度30%~40%)中代謝過(guò)程減弱和呼吸作用降低,能夠較長(zhǎng)時(shí)間保持花粉的活力[20]。本研究中,2種干燥劑不能顯著延緩美薔薇花粉活力的降低,可能由于花粉收集干燥時(shí)室內(nèi)空氣相對(duì)濕度較低,花粉貯藏時(shí)已較為干燥,所以干燥劑的使用對(duì)花粉活力變化影響不大。本研究結(jié)果表明,貯藏溫度是影響花粉長(zhǎng)期保存的主要因素,-20 ℃冷凍貯藏利于美薔薇花粉的長(zhǎng)期保存,花粉活力可以保持一年以上,與Giovannini等[6]研究結(jié)果一致。

    本研究中,美薔薇花粉萌發(fā)率偏低,最高萌發(fā)率為40.26%,顯著低于平陰玫瑰品種新鮮花粉萌發(fā)率(80%以上)[21]。一方面,花粉離體萌發(fā)受培養(yǎng)組分、培養(yǎng)溫度[17]、pH值[22]等多方面影響,具體萌發(fā)條件還需進(jìn)一步優(yōu)化。另一方面,花發(fā)育時(shí)期也是影響花粉活力的重要因素[15],本研究中為了保證花粉純度,選擇收集的花苞均未開(kāi)放,花粉萌發(fā)率偏低是否受花發(fā)育時(shí)期影響還需進(jìn)一步研究。

    猜你喜歡
    花粉管干燥劑薔薇
    Nadorcott 柑桔無(wú)核化處理對(duì)組培花粉管生長(zhǎng)的影響
    薔薇滿架,好眠一夏
    細(xì)胞質(zhì)膜AHAs維持花粉管的生長(zhǎng)和受精(2020.5.20 Plant Biotechnology Journal)
    花開(kāi)恣意是薔薇
    藍(lán)豬耳花粉管在雌蕊生長(zhǎng)途徑中鈣的分布特征
    食品干燥劑遇水會(huì)發(fā)生爆炸嗎
    重金屬對(duì)梨花粉萌發(fā)及生長(zhǎng)有影響
    互動(dòng)小游戲
    大灰狼(2016年2期)2016-03-03 11:11:23
    干燥劑,不能吃
    大灰狼(2016年2期)2016-03-03 11:10:03
    干燥劑不能玩
    久久久午夜欧美精品| 综合色丁香网| 午夜激情欧美在线| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 淫秽高清视频在线观看| 一级黄片播放器| 欧美97在线视频| 久久亚洲国产成人精品v| 精品酒店卫生间| 欧美+日韩+精品| kizo精华| 国产精品99久久久久久久久| 午夜视频国产福利| 国产精品电影一区二区三区| 看片在线看免费视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 夜夜爽夜夜爽视频| av黄色大香蕉| 在线播放国产精品三级| 国产在视频线在精品| 国产精品久久电影中文字幕| 国产在线一区二区三区精 | 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲中文字幕日韩| 欧美日本亚洲视频在线播放| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 一级黄片播放器| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| АⅤ资源中文在线天堂| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日本一本二区三区精品| 亚洲精品aⅴ在线观看| 日韩欧美三级三区| 精品一区二区三区视频在线| 午夜视频国产福利| 村上凉子中文字幕在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 好男人在线观看高清免费视频| 久久人妻av系列| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 国产午夜福利久久久久久| 国产精品一及| 亚洲精品国产av成人精品| 国产精品蜜桃在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 有码 亚洲区| 麻豆成人午夜福利视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产极品天堂在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 一级av片app| 国产探花极品一区二区| 久久这里只有精品中国| 午夜福利在线观看吧| 亚洲久久久久久中文字幕| 看免费成人av毛片| 亚洲国产精品专区欧美| 国产精品嫩草影院av在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 在线观看av片永久免费下载| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 好男人在线观看高清免费视频| 国产色婷婷99| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产精品一区二区三区四区久久| 成人特级av手机在线观看| 在线免费十八禁| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 日本黄大片高清| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美色视频一区免费| 欧美97在线视频| 一区二区三区高清视频在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美不卡视频在线免费观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 免费搜索国产男女视频| 国产日韩欧美在线精品| 1000部很黄的大片| 国产成人福利小说| 桃色一区二区三区在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 99久久精品热视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产又色又爽无遮挡免| 日韩中字成人| 亚洲av免费高清在线观看| 日韩视频在线欧美| 国产精品无大码| 岛国在线免费视频观看| 亚洲国产精品国产精品| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 黑人高潮一二区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 免费一级毛片在线播放高清视频| 日韩欧美精品v在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲人成网站在线播| 国产精品1区2区在线观看.| 日韩制服骚丝袜av| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲性久久影院| av国产免费在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 在线播放国产精品三级| 亚洲精品自拍成人| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 日韩欧美国产在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 国产成人freesex在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产精品人妻久久久影院| 嫩草影院入口| 午夜激情福利司机影院| 99久久人妻综合| 午夜久久久久精精品| 午夜视频国产福利| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产成人精品久久久久久| 99视频精品全部免费 在线| 99视频精品全部免费 在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 日韩av不卡免费在线播放| 成人三级黄色视频| 国产av在哪里看| 看非洲黑人一级黄片| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | a级一级毛片免费在线观看| 欧美日本视频| 国产高清三级在线| 人妻少妇偷人精品九色| 久99久视频精品免费| 女人被狂操c到高潮| 免费观看精品视频网站| 国产成人freesex在线| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 欧美bdsm另类| 一边亲一边摸免费视频| 中文字幕熟女人妻在线| 嫩草影院新地址| 国产高清有码在线观看视频| 国产美女午夜福利| 极品教师在线视频| 欧美97在线视频| 亚洲电影在线观看av| 久久99热这里只有精品18| 一区二区三区免费毛片| 91精品一卡2卡3卡4卡| 热99re8久久精品国产| 18+在线观看网站| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 观看免费一级毛片| 日韩人妻高清精品专区| 91久久精品国产一区二区成人| 国产成人a区在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 美女内射精品一级片tv| 国产又色又爽无遮挡免| 日韩大片免费观看网站 | 久久亚洲国产成人精品v| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 午夜福利视频1000在线观看| 欧美人与善性xxx| 久久久成人免费电影| 成人性生交大片免费视频hd| 三级经典国产精品| 青春草亚洲视频在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| 国产熟女欧美一区二区| 欧美一区二区亚洲| 啦啦啦韩国在线观看视频| 免费看a级黄色片| 亚洲高清免费不卡视频| 97超碰精品成人国产| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲最大成人手机在线| 天天一区二区日本电影三级| 男女边吃奶边做爰视频| 精品久久久久久成人av| 男人舔奶头视频| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲真实伦在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲av成人av| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 可以在线观看毛片的网站| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产午夜精品一二区理论片| 国产精品一及| 最近视频中文字幕2019在线8| 男人狂女人下面高潮的视频| 成年女人看的毛片在线观看| 日韩av在线大香蕉| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日韩精品有码人妻一区| 国产在视频线精品| 欧美人与善性xxx| 亚洲av免费在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 波野结衣二区三区在线| 超碰av人人做人人爽久久| 99久久成人亚洲精品观看| 午夜日本视频在线| 春色校园在线视频观看| 欧美人与善性xxx| 亚洲自偷自拍三级| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲av中文av极速乱| av国产久精品久网站免费入址| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 五月伊人婷婷丁香| 人妻系列 视频| 一级黄色大片毛片| 视频中文字幕在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 精华霜和精华液先用哪个| 午夜精品在线福利| 国产毛片a区久久久久| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产av在哪里看| 久久国内精品自在自线图片| 三级经典国产精品| 一级二级三级毛片免费看| 日本一本二区三区精品| 久久99热这里只有精品18| 国产精品一二三区在线看| 高清午夜精品一区二区三区| 久久6这里有精品| 一级毛片aaaaaa免费看小| 精品久久久久久久久亚洲| 亚洲人与动物交配视频| 欧美日韩综合久久久久久| 久久综合国产亚洲精品| 国产午夜精品一二区理论片| 天堂√8在线中文| 精品久久久久久成人av| 只有这里有精品99| 久99久视频精品免费| 国产精品1区2区在线观看.| 青春草亚洲视频在线观看| 国产在线一区二区三区精 | 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲综合精品二区| 久久这里有精品视频免费| 国内揄拍国产精品人妻在线| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲电影在线观看av| 久久精品综合一区二区三区| a级毛色黄片| 欧美激情久久久久久爽电影| 午夜a级毛片| 97在线视频观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 精品久久久久久久久久久久久| 男女那种视频在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久久久久国产a免费观看| 国产淫片久久久久久久久| av在线老鸭窝| 1000部很黄的大片| 床上黄色一级片| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲在线观看片| 国产精品1区2区在线观看.| www.色视频.com| 精品欧美国产一区二区三| 日韩一区二区视频免费看| 欧美日韩在线观看h| 国产精品一区www在线观看| 一级黄色大片毛片| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲色图av天堂| 一级二级三级毛片免费看| 国产精品电影一区二区三区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲图色成人| 午夜a级毛片| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 精品国产三级普通话版| 亚洲国产成人一精品久久久| 91av网一区二区| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲欧美精品自产自拍| 99久国产av精品国产电影| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产精品久久久久久精品电影| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产乱人视频| 亚洲人与动物交配视频| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 在线观看66精品国产| 天美传媒精品一区二区| 国产成人一区二区在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 看片在线看免费视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 真实男女啪啪啪动态图| 我的女老师完整版在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 26uuu在线亚洲综合色| 国产69精品久久久久777片| 亚洲精品亚洲一区二区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲欧美精品自产自拍| 在现免费观看毛片| 国产精品一区二区性色av| 好男人视频免费观看在线| www.av在线官网国产| 免费观看人在逋| 国产精品不卡视频一区二区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 看片在线看免费视频| 天堂√8在线中文| 国产一区有黄有色的免费视频 | 精品午夜福利在线看| 国产精品永久免费网站| 久久久成人免费电影| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久人人爽人人片av| 91久久精品电影网| 一区二区三区乱码不卡18| 欧美不卡视频在线免费观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 色5月婷婷丁香| 激情 狠狠 欧美| 99久久精品一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲三级黄色毛片| 变态另类丝袜制服| 欧美变态另类bdsm刘玥| 精品久久国产蜜桃| 欧美潮喷喷水| 久久久久久大精品| 午夜视频国产福利| 亚洲国产欧美人成| 国产激情偷乱视频一区二区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 成人特级av手机在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 久久久久久久午夜电影| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 免费大片18禁| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲av一区综合| 伦精品一区二区三区| 欧美一区二区亚洲| 日本熟妇午夜| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 丝袜美腿在线中文| 国语自产精品视频在线第100页| 69av精品久久久久久| 亚洲最大成人中文| 国产免费视频播放在线视频 | 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久久成人免费电影| 又爽又黄a免费视频| 七月丁香在线播放| 久久久久久久亚洲中文字幕| 麻豆国产97在线/欧美| 欧美潮喷喷水| 舔av片在线| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日韩成人av中文字幕在线观看| 麻豆成人av视频| 免费大片18禁| 少妇高潮的动态图| 久久午夜福利片| 国产高清不卡午夜福利| 日本欧美国产在线视频| 成人毛片60女人毛片免费| 久久久久网色| 欧美又色又爽又黄视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 在线观看一区二区三区| 久久久久久久久久久丰满| 免费av毛片视频| 十八禁国产超污无遮挡网站| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 免费在线观看成人毛片| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲怡红院男人天堂| 国产在视频线在精品| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| a级一级毛片免费在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲成av人片在线播放无| 在线观看美女被高潮喷水网站| 久久鲁丝午夜福利片| 久久6这里有精品| .国产精品久久| 午夜免费激情av| 三级国产精品欧美在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| av播播在线观看一区| 欧美成人免费av一区二区三区| 热99在线观看视频| 国产成人精品一,二区| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 日日干狠狠操夜夜爽| av福利片在线观看| 嫩草影院入口| 99久久九九国产精品国产免费| 嫩草影院新地址| 嫩草影院入口| 中文字幕久久专区| 精品酒店卫生间| 久久久精品欧美日韩精品| 九九爱精品视频在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产免费男女视频| av在线天堂中文字幕| 欧美潮喷喷水| 婷婷六月久久综合丁香| 美女高潮的动态| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲最大成人av| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 五月玫瑰六月丁香| 国产久久久一区二区三区| 深夜a级毛片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产精品久久久久久久电影| 久久99热这里只频精品6学生 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 久久久精品94久久精品| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲最大成人中文| 国产成人精品婷婷| 亚洲在线观看片| 美女国产视频在线观看| 成年av动漫网址| 亚洲精品成人久久久久久| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 日韩av不卡免费在线播放| 一本一本综合久久| h日本视频在线播放| 我要搜黄色片| 久久久久久久久中文| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产大屁股一区二区在线视频| 日韩精品有码人妻一区| 国产精品伦人一区二区| 美女高潮的动态| 久久久亚洲精品成人影院| 99在线视频只有这里精品首页| 国产老妇女一区| 国产精品久久视频播放| 精品酒店卫生间| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 日韩国内少妇激情av| 听说在线观看完整版免费高清| 看片在线看免费视频| 天堂√8在线中文| 99热精品在线国产| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产在视频线在精品| 久久这里只有精品中国| 男人狂女人下面高潮的视频| 婷婷色麻豆天堂久久 | 日韩一本色道免费dvd| 国产精品伦人一区二区| 色综合亚洲欧美另类图片| 夜夜爽夜夜爽视频| 舔av片在线| 色综合色国产| 亚洲av免费高清在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲精品色激情综合| 在线播放无遮挡| av卡一久久| 永久免费av网站大全| 欧美丝袜亚洲另类| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 欧美最新免费一区二区三区| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲自拍偷在线| 在线播放国产精品三级| 精品久久久久久久久av| 黄色配什么色好看| 1024手机看黄色片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 欧美日韩在线观看h| 级片在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲国产精品成人久久小说| 日本午夜av视频| 丝袜喷水一区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产成人精品久久久久久| 亚洲四区av| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 小说图片视频综合网站| 97热精品久久久久久| 永久免费av网站大全| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产成人91sexporn| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久韩国三级中文字幕| 欧美精品一区二区大全| 成年免费大片在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 在线播放无遮挡| 国模一区二区三区四区视频| 欧美又色又爽又黄视频| 在线播放国产精品三级| 国产高清国产精品国产三级 | 精品一区二区三区视频在线| 五月伊人婷婷丁香| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲国产精品成人综合色| 国产爱豆传媒在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲国产欧美人成| av天堂中文字幕网| 国产视频内射| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 精品欧美国产一区二区三| www日本黄色视频网| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 69人妻影院| 日韩欧美 国产精品| 亚洲久久久久久中文字幕| 丰满乱子伦码专区| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 亚洲国产精品成人久久小说| 午夜a级毛片| 午夜视频国产福利| 能在线免费看毛片的网站| 免费看a级黄色片| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国产精品久久久久久av不卡| 中文字幕av成人在线电影| 高清毛片免费看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 高清午夜精品一区二区三区| 三级国产精品片| 日日撸夜夜添| 欧美激情国产日韩精品一区| 性色avwww在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 又爽又黄a免费视频| 男女国产视频网站| 高清午夜精品一区二区三区| 国产v大片淫在线免费观看| 精品久久国产蜜桃| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲成人久久爱视频| 欧美bdsm另类| 中文字幕久久专区| 一二三四中文在线观看免费高清| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 成年av动漫网址| 久久久精品欧美日韩精品| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产精品久久久久久久久免| 久久久久久国产a免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 欧美丝袜亚洲另类| 长腿黑丝高跟| .国产精品久久| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲18禁久久av| 三级经典国产精品| 青春草国产在线视频| 国产亚洲91精品色在线| 欧美激情久久久久久爽电影| 精品人妻熟女av久视频| 七月丁香在线播放| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久99久视频精品免费| 色吧在线观看| 精品酒店卫生间| a级毛色黄片| 一边亲一边摸免费视频| 国产高清不卡午夜福利| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久久久久国产a免费观看| 中文亚洲av片在线观看爽| 中文字幕制服av| 亚洲国产欧美人成|