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    GLCCI1 基因位點(diǎn) rs37972、rs37973 基因多態(tài)性與難治性哮喘間的關(guān)系

    2021-07-15 09:27:48冷秋平王文藝陳麗萍
    中國保健營養(yǎng) 2021年13期
    關(guān)鍵詞:難治性皮質(zhì)激素多態(tài)性

    冷秋平 王文藝 陳麗萍

    新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科,新疆 烏魯木齊 830002

    難治性哮喘是指除外患者藥物依從性和導(dǎo)致支氣管哮喘惡化等因素后,經(jīng)過6個(gè)月及以上的規(guī)范化應(yīng)用兩種或超過兩種的支氣管哮喘控制藥物治療和管理后仍不能理想控制的哮喘[1]。研究發(fā)現(xiàn)支氣管哮喘患者糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1 基因位點(diǎn)基因突變可引起機(jī)體對糖皮質(zhì)激素吸入治療的反應(yīng)性下降,因此我們擬通過探索分析rs37972、rs37973 的基因多態(tài)性和新疆地區(qū)難治性哮喘患者間關(guān)系,為新疆地區(qū)的難治性哮喘患者的個(gè)體化及精準(zhǔn)治療提供理論依據(jù)。

    1 對象與方法

    1.1研究對象 對我院住院規(guī)范化吸入ICS/LABA 治療6月及以上的支氣管哮喘患者進(jìn)行隨訪,從中納入支氣管哮喘完全控制者30 例(ACT 評分 25 分):女17例,男13例,平均年齡為(51.74±16.89)歲;難治性哮喘者30例(ACT 評分<20 分),女18例,男12例,平均年齡為(49.23±12.05)歲;同期健康體檢者30例,女16例,男14例,平均年齡為(50.12±11.25)歲,均已簽署過知情同意書。

    1.2研究方法

    1.2.1DNA制備 依照 Greiner 公司提供全血基因組 DNA 試劑盒說明書進(jìn)行 DNA 制備。

    1.2.2基因位點(diǎn)選取 通過盲篩的方法在UCSC 數(shù)據(jù)中選取GLCCI1 的位于啟動(dòng)區(qū)的基因位點(diǎn)rs37972、rs37973。

    1.2.3引物設(shè)計(jì) 應(yīng)用美國 Sequenom 公司 MassARRAY Assay Design 軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)。

    1.2.4基因分型檢測 應(yīng)用多重 PCR 技術(shù)、MassARRAY?的 i-PLEX 單堿基延伸技術(shù),并最終通過基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行分型檢測。

    1.3數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 22.0 數(shù)據(jù)分析軟件系統(tǒng)進(jìn)行。計(jì)量資料應(yīng)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差;組間基因型或等位基因分布頻率的比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn),計(jì)算相對風(fēng)險(xiǎn)度(OR)和 95%可信區(qū)間(CI);3 種基因型間比較應(yīng)用方差分析,2 種基因型間比較應(yīng)用 t 檢驗(yàn)。P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

    2 結(jié) 果

    2.1rs37972、rs37973 SNP 位點(diǎn)基因型分布情況

    rs37972存在三種基因型(CC/CT/TT)、rs37973存在三種基因型(AA/AG/GG),使用HWE軟件檢測基因型的P值,與哈迪-溫伯格平衡定律相符,具總體代表性。

    2.2rs37972 和 rs37973 基因型的比較rs37972 的基因型分布頻率三組間比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。rs37973 基因型分布頻率三組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);GG 基因型頻率顯著高于正常對照組,P=0.041,但因三組間比較P>0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見表1、表2。

    表1 rs37972 基因型及等位基因分布頻率比較

    表2 rs37973 基因型及等位基因分布頻率比較

    *支氣管哮喘完全控制組和正常對照組間的比較(P=0.041)

    3 討 論

    研究表明,GLCCI1是 GC誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞凋亡的早期信號(hào),若GLCCI1表達(dá)水平降低,將會(huì)直接引起炎癥細(xì)胞凋亡的減少,從而降低機(jī)體對糖皮質(zhì)激素的敏感性,而 rs37972、rs37973 的基因多態(tài)性可致患者對糖皮質(zhì)激素治療的敏感性降低[2]。目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道rs37972、rs37973 基因多態(tài)性與難治性哮喘的關(guān)系。本研究中,我們對新疆地區(qū)支氣管哮喘人群進(jìn)行 GLCCI1 的 rs37972、rs37973 基因多態(tài)性檢測,但未能發(fā)現(xiàn)難治性哮喘與rs37972、rs37973 的基因多態(tài)性存在相關(guān)性;但支氣管哮喘完全控制組的 rs37973 的 GG 基因型頻率顯著高于正常對照組(P=0.041),表明攜帶 GG 基因型支氣管哮喘患者對糖皮質(zhì)激素應(yīng)答弱,可能通過調(diào)節(jié)GLCCI1 基因表達(dá)在糖皮質(zhì)激素應(yīng)答方面起作用。但本研究樣本量較小,結(jié)果可能存在偏差,有待后續(xù)增加樣本量進(jìn)一步深入研究。

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