骨髓增生異常綜合征細(xì)胞遺傳學(xué)特征與臨床的關(guān)系

鄧琳，劉文,3，李英,3，張月陽，魏婷，唐陶，劉青松,2

(1.川北醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系；川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，2.產(chǎn)前診斷中心；3.檢驗科，四川 南充 637000)

骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome，MDS)是一組異質(zhì)性的克隆性造血干細(xì)胞疾病，特點是髓系細(xì)胞發(fā)育異常，表現(xiàn)為無效造血，外周血細(xì)胞減少，高風(fēng)險向急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)轉(zhuǎn)化。目前，尚無診斷MDS的金標(biāo)準(zhǔn)。染色體核型異常在MDS中表現(xiàn)特異，且與預(yù)后密切相關(guān)，在診斷中占據(jù)了重要地位；而骨髓病態(tài)造血導(dǎo)致一個或多個譜系血細(xì)胞減少是MDS的基本特征，常用作為診斷的主要指標(biāo)[1-2]。本研究通過回顧性分析MDS患者染色體核型及骨髓病態(tài)造血特點，并結(jié)合臨床特征和預(yù)后積分系統(tǒng)評價，旨在探討MDS患者細(xì)胞遺傳學(xué)改變及其與病態(tài)造血、臨床特點的關(guān)系，為臨床診斷、病情及預(yù)后評估等提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年11月川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院診治的61例MDS患者為研究對象，按照有無染色體核型異常分為核型正常組(n=34)和核型異常組(n=27)。核型正常組中，男性18例，女性16例；平均年齡(58.91±14.68)歲。核型異常組中，男性13例，女性14例；平均年齡(63.33±14.79)歲。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 診斷及預(yù)后分層 MDS診斷參照中國診斷與治療指南(2019版)[2]的標(biāo)準(zhǔn)；預(yù)后分層分別采用MDS國際預(yù)后積分系統(tǒng)(IPSS)及修訂國際預(yù)后積分系統(tǒng)(IPSS-R)[2]評估：IPSS分為低危、中危-1、中危-2和高危；IPSS-R分為極低危、低危、中危、高危和極高危。

1.2.2 染色體檢測 肝素抗凝骨髓標(biāo)本，短期培養(yǎng)制備染色體。G顯帶后分析中期染色體分裂象(每個標(biāo)本≥20個)，并以《人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制(ISCN，2016)》進(jìn)行描述：≥3個獨立的核型異常定義為復(fù)雜核型(Complex Karyotype，CK)[3]。

1.2.3 骨髓象病態(tài)造血觀察 骨髓片行瑞氏-姬姆薩混合染液染色及細(xì)胞鐵染色，顯微鏡低倍視野判斷骨髓增生程度，油鏡對有核細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)，觀察粒紅巨三系病態(tài)造血情況。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)MDS患者染色體核型；(2)MDS患者預(yù)后各分層染色體異常核型檢出率；(3)外周血象：采用全自動血細(xì)胞分析儀(sysmex XE2000)檢測，包括中性粒細(xì)胞(Neutrophils，NEU)、血紅蛋白(hemoglobin，HB)、血小板(platelet，PLT)等；(4)患者生存期及死亡率：生存期指確診至死亡時間或至隨訪終點。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 MDS患者染色體核型

61例MDS患者中，核型異常有27例(44.3%)，其中復(fù)雜核型8例(29.6%)。異常核型分析顯示，單純數(shù)目異常10例(37.0%)，單純結(jié)構(gòu)異常11例(40.7%)，數(shù)目及結(jié)構(gòu)異常同時存在6例(22.2%)；5號染色體異常8例(29.6%)。見表1和圖1。

表1 8例復(fù)雜核型患者檢測結(jié)果

2.2 MDS患者預(yù)后各分層染色體異常核型檢出率比較

61例患者中有1例因臨床資料收集不齊未作預(yù)后分層。34例核型正常和26例核型異?；颊逫PSS預(yù)后分層高危分別為0例(0.0%)和6例(23.1%)，IPPSS-R預(yù)后分層高危和極高危分別為10例(29.4%)和20例(76.9%)；60例患者IPSS及IPSS-R預(yù)后各分層染色體異常核型檢出率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且危險度越高，檢測率越高(P<0.05)。見表2。

表2 MDS患者預(yù)后各分層染色體異常核型檢出率比較[n(%)]

2.3 核型正常組與核型異常組外周血象比較

核型異常組NEU、PLT低于核型正常組(P<0.05)，三系細(xì)胞減少患者比例高于核正常組(P<0.05)。表3。

表3 核型正常組與核型異常組外周血象比較

2.4 MDS患者骨髓病態(tài)造血表現(xiàn)

本研究有1例未收集到骨髓涂片結(jié)果。60例中存在病態(tài)造血48例(80%)，其中單系病態(tài)造血27例(56.3%)，主要以紅系為主；兩系病態(tài)造血10例(20.8%)；三系病態(tài)造血11例(22.9%)。核型異常組與核型正常組單系、兩系、三系病態(tài)造血患者比例比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。病態(tài)造血骨髓細(xì)胞形態(tài)中，紅系表現(xiàn)為巨幼樣變(46.7%)、環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞(16.7%)、核型異常(畸形核30.0%、雙核20.0%、多核11.7%、核碎裂10.0%、核出芽8.3%、花瓣核8.3%)；粒系表現(xiàn)為核型異常(畸形核1.7%、雙核6.7%、核分葉不良8.3%等)、胞漿顆粒減少(10.0%)、胞漿顆粒增粗(10.0%)、Auer小體(5.0%)、核漿發(fā)育不平衡(5.0%)；巨核系表現(xiàn)為小巨核(8.3%)、單圓核(6.7%)、多圓核(11.7%)、畸形血小板(3.3%)等。與染色體核型正常組比較，8例復(fù)雜核型更易出現(xiàn)紅系巨幼樣變(P=0.045)和核畸形幼紅細(xì)胞(P=0.020)。見圖2。

2.5 核型正常組與核型異常組患者生存期及死亡率比較

在有效追蹤的42例患者中，核型正常和核型異?；颊哌M(jìn)展為AML各5例；在有效回訪的36例患者中，核型異?；颊?n=16)的中位生存期短于核型正常患者(n=20)(Z=5.187，P<0.05)；截止隨訪結(jié)束，核型異?；颊咚劳雎?0例(62.5%)，核型正?；颊咚劳雎?例(45.0%)，核型異?；颊叩乃劳雎矢哂诤诵驼；颊?χ2=24.34，P<0.05)。見圖3。

3 討論

MDS是一組細(xì)胞遺傳學(xué)特征、形態(tài)學(xué)表現(xiàn)、臨床病程有明顯異質(zhì)性的骨髓疾病。研究[4]證實，核型是評估MDS預(yù)后最重要的參數(shù)之一。在本研究中，染色體核型異常的發(fā)生率為44.3%，與文獻(xiàn)[5]報道大致相同。患者主要表現(xiàn)出克隆性染色體異常，以缺失、單體或三體多見，其中5號染色體異常檢出率最高，其次為8號染色體、7號染色體、20q-，與Gangat等[6- 7]的報道基本一致。單純del(5q)在西方人MDS患者中最常見，其后是+8，-Y，del(20q)和-7[8-9]；而我國相關(guān)研究則顯示8號染色體異常最為多見，其次為7號、5號、20號[10]，可能與納入的樣本量差異有關(guān)。但I(xiàn)PSS和IPSS-R預(yù)后積分均顯示，危險度越高，染色體異常的檢出率越高。

血細(xì)胞減少通常為MDS患者首診的主要原因。本研究結(jié)果顯示，核型異常的MDS患者更易發(fā)生白細(xì)胞和血小板減少，尤其是當(dāng)三系血細(xì)胞減少時，核型異常的發(fā)生率明顯增加，提示在血細(xì)胞減少患者中，異常核型的檢出對MDS的診斷具有重要價值[11]。血細(xì)胞減少源自骨髓病態(tài)造血，本研究對比各系病態(tài)造血與核型異常的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，復(fù)雜核型患者更易出現(xiàn)多種病態(tài)造血表現(xiàn)。目前普遍認(rèn)為，MDS病態(tài)造血細(xì)胞更易來源于惡性克隆細(xì)胞[12]，本研究結(jié)果也證明了這一觀點。雖然病態(tài)造血可作為MDS診斷指標(biāo)之一，但并非其特有[13]，因為可能骨髓細(xì)胞在尚未出現(xiàn)或不出現(xiàn)病態(tài)造時，細(xì)胞遺傳學(xué)就已經(jīng)發(fā)生了與MDS相關(guān)的畸變。本研究也發(fā)現(xiàn)，有2例存在染色體異?；颊卟⑽幢憩F(xiàn)病態(tài)造血，提示染色體異常的出現(xiàn)可能早于形態(tài)異常，這對MDS的早期診斷具有重要意義。

中位生存期和死亡率通常用來評價惡性疾病的轉(zhuǎn)歸，本研究通過長期隨訪跟蹤發(fā)現(xiàn)，伴有核型異常的MDS患者生存期短于核型正常患者，與已有報道[11]相符。但由于樣本量及有效隨訪相對不多，本研究未對各染色體異常類型進(jìn)行分類評估，無法驗證染色體異常類型與預(yù)后的關(guān)系相關(guān)性結(jié)論[14-15]，后續(xù)將擴大樣本量繼續(xù)研究。有研究[6]報道，異常核型患者進(jìn)展為白血病的傾向高于正常核型患者，而本研究并未顯示出有明顯差異(P>0.05)，可能與本研究樣本量小、追蹤時間短及異常核型死亡率高導(dǎo)致數(shù)據(jù)丟失有關(guān)。

綜上，骨髓染色體核型檢測對MDS患者的病情評估、預(yù)后及轉(zhuǎn)歸等均有重要意義，復(fù)雜核型與紅系病態(tài)造血關(guān)系密切。