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    B3亞型患者血型血清學(xué)及家系分析

    2021-07-07 07:59:49王春海王文梅孫然
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2021年11期

    王春海  王文梅  孫然

    [摘要] ABO亞型主要表現(xiàn)為抗原凝集強度的減弱、混合視野的凝集反應(yīng)、抗體效價降低、正反定型不符;其中混合視野的凝集反應(yīng)是B3亞型最大的血清學(xué)特征,通過回顧性分析整理1例疑似B3亞型的血型血清學(xué)試驗結(jié)果、唾液中和試驗結(jié)果、親和力試驗結(jié)果、家系A(chǔ)BO血型調(diào)查結(jié)果,并結(jié)合病史,最終確定先證者及先證者兒子均為B3亞型。因此掌控B3亞型的實驗室特征,B3亞型鑒別診斷要點,應(yīng)用正確試驗方法準(zhǔn)確鑒定B3亞型,選擇合適的血液輸注,可以減少輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。

    [關(guān)鍵詞] 血清學(xué)特征;B3亞型;混合視野;親和力試驗;輸血不良反應(yīng)

    [中圖分類號] R457.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] C? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701(2021)11-0147-03

    Analysis on the blood group serology and genealogy of B3 subtype patients

    WANG Chunhai1? ?WANG Wenmei2? ?SUN Ran1

    1.Department of Blood Transfusion, Inner Mongolia Baogang Hospital, Baotou? ?014010, China; 2.Intensive Care Unit, the First Affiliated Hospital of Baotou Medical College,Inner Mongolia University of Science and Technology, Baotou? ?014010, China

    [Abstract] ABO subtypes are mainly featured by decreased antigen agglutination intensity,agglutination reaction in mixed vision, decreased antibody titer and inconsistent positive and negative typing. Among them, the agglutination reaction in mixed vision is the most important serological feature of B3 subtype. Through retrospective analysis and sorting out of the blood group serological test results, saliva neutralization test results, affinity test results and genealogical ABO blood type survey results of a suspected B3 subtype, and combining with medical history, it was finally determined that the proband and the proband′s son were both B3 subtypes.Therefore, controlling the laboratory features of B3 subtype, the key points of differential diagnosis of B3 subtype, applying the correct test methods to accurately identify B3 subtype, and selecting the appropriate blood transfusion can reduce the incidence of adverse reactions of blood transfusion.

    [Key words] Serological features; B3 subtype; Mixed vision; Affinity test; Adverse reactions of blood transfusion

    ABO血型是人類最重要血型系統(tǒng),常見的表型有A、B、O、AB,但在這之外還存在著一小部分ABO亞型,亞型在人群中發(fā)生的頻率不高,但常表現(xiàn)正反定型不一致、抗原凝集強度的減弱,導(dǎo)致血型鑒定困難[1-4]。B3是ABO血型較為常見的一種弱表現(xiàn)型,其最大特征是混合視野凝集,即B3細(xì)胞與抗-B和大多數(shù)抗-AB孵育后出現(xiàn)一些由數(shù)個紅細(xì)胞形成的小凝集塊,并被絕大部分游離的非凝集紅細(xì)胞包圍[5]?;旌弦曇澳R娨韵聨追N情況:①A3/B3;②急性非淋巴細(xì)胞白血病;③ABO血型不合的骨髓移植;④非O型人近期輸注了O型血,需結(jié)合病史加以鑒別?,F(xiàn)將我院1例B3亞型先證者血清學(xué)及輸血治療原則回顧性病歷資料,現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    先證者,女,52歲,左卵巢囊腫,無輸血史,2019年6月入住我院婦產(chǎn)科,擬行擇期手術(shù),常規(guī)備血,奧森多全自動血型儀鑒定結(jié)果:第二柱(抗-B)為混合外觀2+mf,第五柱(A1細(xì)胞)為4+,出現(xiàn)正反定型不符,進(jìn)一步作血清學(xué)復(fù)核,并隨訪采集先證者父親、母親、兒子的血型標(biāo)本檢測。先證者、家庭成員的血型標(biāo)本采集均征得本人及家屬知情同意。

    1.2 試劑與儀器

    抗-A、抗-B血型試劑、RhD(IgM)血型試劑、抗-H試劑,上海血液醫(yī)藥生物公司生產(chǎn);ABO反定型、篩選細(xì)胞,長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司;抗-AB試劑,法國;以上試劑均在有效期內(nèi),奧森多(Ortho AutoVuet)全自動血型及配血分析儀、臺灣貝索離心機、水浴箱。

    1.3 方法

    ABO血型正反定型用奧森多全自動血型儀檢測、抗AB、抗H用鹽水試管法檢測;唾液ABH血型物質(zhì)檢測按照文獻(xiàn)操作[6];親和力試驗是指抗體與紅細(xì)胞抗原混合后,開始出現(xiàn)肉眼可見凝集,這段時間一般以秒計算。可利用親和力的不同來鑒別弱型抗原結(jié)合還是正常血型抗原結(jié)合的混合視野結(jié)果,具體按照文獻(xiàn)[7]進(jìn)行操作。

    2 結(jié)果

    2.1 ABO血型血清學(xué)結(jié)果

    先證者與兒子紅細(xì)胞存在的B抗原均非常弱,與抗-B和抗-AB均呈混合凝集(mf),并含有強的H抗原,血清與A1型紅細(xì)胞呈4+,結(jié)合病史,基本考慮為B3,而先證者父親為AB3亞型,母親為O型。

    2.2 親和力試驗結(jié)果

    從表3結(jié)果可以看出正常B型紅細(xì)胞的凝集平均時間為6 s,先證者凝集平均時間為25 s,先證者兒子凝集平均時間為27 s,均超過正常對照>3倍,親和力顯著降低,證實先證者及兒子血型均為B3亞型。

    2.3 唾液型物質(zhì)檢測結(jié)果

    從表4結(jié)果可以看出先證者及兒子唾液中含有B、H物質(zhì),但未檢出A物質(zhì),符合B3特征。

    2.4 家系A(chǔ)BO血型調(diào)查結(jié)果

    通過表1~4中對家系4人血型血清學(xué)相關(guān)檢測結(jié)果分析所得,先證者父親符合AB3亞型血清學(xué)格局,母親為O型,先證者父親AB3亞型的B3基因遺傳給先證者,先證者血型呈現(xiàn)B3亞型血清學(xué)格局,而先證者又將B3基因遺傳給自已兒子,先證者兒子血型同樣呈現(xiàn)B3亞型血清學(xué)格局。

    2.5 血清學(xué)結(jié)論

    先證者及兒子血型同屬于B3亞型RhD(陽性)。

    3 討論

    ABO亞型主要表現(xiàn)為抗原凝集強度的減弱、混合視野的凝集反應(yīng)、抗體效價降低、正反定型不符;從分子生物學(xué)方面講,ABO血型亞型是由ABO基因變異形成,A基因變異形成A1和其他A亞型,B基因變異形成B亞型,O基因不表達(dá)糖基轉(zhuǎn)移酶活性,只能變異形成新的O等位基因[7]。

    1972年,Wiener和Cioffi首先報道了1例非分泌型B3,這種表型以抗-B和抗-AB呈現(xiàn)混合凝集視野反應(yīng)為特點,血清中缺乏抗B,唾液中含有正常含量的B抗原[9]。B3是最稀少的一種B亞型,由ABO位點上的稀有等位基因所致。在中國漢族人中,B3亞型比例約為1/900(B型),A1B3型比例約為1/1800(AB型),B3亞型以華南地區(qū)常見,而華北地區(qū)以B(A)亞型最常見[7]。據(jù)文獻(xiàn)報道在中國臺灣B3變異型具有較高頻率[10],而在中國大陸地區(qū)B3變異型頻率較低。

    B3亞型最大的血清學(xué)特征是與標(biāo)準(zhǔn)血清反應(yīng)時出現(xiàn)“混合視野”或“雙群”現(xiàn)象[5],本例先證者在常規(guī)備血血型檢測中被發(fā)現(xiàn),紅細(xì)胞在奧森多血型卡凝集中與抗-B發(fā)生反應(yīng)時,出現(xiàn)部分紅細(xì)胞完全凝集被阻隔在微柱上層,而部分紅細(xì)胞完全沉降在微柱底層,中間無任何拖尾現(xiàn)象,在抗-B柱結(jié)果為混合外觀(2+mf),顯示正反定型不符。通過試管法復(fù)查血型,先證者紅細(xì)胞與抗-B和抗-AB發(fā)生反應(yīng)時,均出現(xiàn)部分凝集塊,周圍還會存在大量游離的非凝集紅細(xì)胞;與抗-H反應(yīng)結(jié)果為強凝集度4+,與抗-AB反應(yīng)結(jié)果為混合外觀(2+mf),從表1、表2考慮可能為B3亞型;通過親和力試驗鑒別本例先證者是否為B3亞型,判斷標(biāo)準(zhǔn):實驗結(jié)果超出正常對照的3倍以上,則可能為A3血型或B3血型;否則可能是輸不同血型的混合視野,或骨髓移植血型,或因白血病先證者造成的抗原減弱等情況[7],由表3先證者紅細(xì)胞親和力平均時間25 s,正常對照平均時間6 s,超過正常對照達(dá)到4倍,則可以證實為B3亞型。

    先證者血清中多無抗-B抗體,唾液中含有正常量的B物質(zhì)[11];家系A(chǔ)BO血型血清學(xué)調(diào)查結(jié)果,先證者父親為AB3亞型,先證者母親為O型,先證者父親將B3基因遺傳先證者,先證者又將B3基因遺傳給自已的兒子,是否具有親代遺傳特征,還需要分子生物學(xué)分析,基于實驗條件所限,沒有進(jìn)一步做基因檢測與測序,但基于血清學(xué)反應(yīng)格局,完全可以確定B3亞型。先證者完全符合B3亞型的特征,同時既往無輸血史,其臨床診斷也排除了急性白血病、骨髓移植的存在,因此,先證者ABO血型為B3亞型。

    B3亞型鑒別診斷要點:①與抗-B,抗AB,抗-H試劑反應(yīng)的強度和類型;②血清中是否存在ABO同種凝集素;③用抗-B做吸收放散試驗;④唾液中是否含有B物質(zhì);⑤分子檢測;⑥認(rèn)真查閱患者臨床資料:無移植史、年齡、性別和診斷,基本排除不同ABO血型干細(xì)胞移植、換血治療、胎母出血、疾病所致(白血?。㈩怋現(xiàn)象導(dǎo)致的混合外觀,以上情況親和力均正常,而B3亞型親和力低,再結(jié)合親和力試驗加以區(qū)別。

    B3亞型的實驗室特征:①B3亞型紅細(xì)胞與抗-B抗血清約有1+~2+混合視野凝集,與抗-AB抗體則可呈2+~3+混合視野凝集;②絕大部分B3血清中無抗-B抗體,但唾液中含有正常B抗原;③B3紅細(xì)胞表面H抗原較強;④在B3人血清中可以查出B轉(zhuǎn)移酶,但在B3紅細(xì)胞上未查出B轉(zhuǎn)移酶;⑤B3亞型紅細(xì)胞與單克隆抗-B試劑親和力比正常B細(xì)胞弱;⑥B3在基因水平上具有異質(zhì)性。

    對于ABO亞型患者,同型供血者無疑是最好的選擇,但實際工作中難以實現(xiàn)[12]。而亞型輸血原則,我國臨床輸血指南中尚無明確規(guī)定,根據(jù)相容性輸注原則,選擇交叉配血相合的血液輸注[13],由于本例先證者血清中沒有產(chǎn)生抗-B,作為患者輸注紅細(xì)胞時可以選擇使用O型RhD陽性洗滌紅細(xì)胞,也可以選擇使用B型RhD陽性懸浮紅細(xì)胞,如果反復(fù)多次輸注B型RhD陽性懸浮紅細(xì)胞后容易產(chǎn)生抗-B,則只能輸注O型RhD陽性洗滌紅細(xì)胞,作為獻(xiàn)血者若因多次輸注B型RhD陽性懸浮紅細(xì)胞后產(chǎn)生了抗-B抗體,獻(xiàn)血后血漿不可以輸注給B型RhD陽性患者,凡是亞型,在輸入血小板的時候都要選擇與其相對應(yīng)的正常血型,依據(jù)輸血的三大原則,即自身輸血和同型輸血以及配合型輸血[8]。

    綜上所述,因ABO血型抗原表達(dá)的復(fù)雜性,B3亞型的診斷必須慎重,一定要在排除異型輸血或可能的疾病狀態(tài)干擾后方可下結(jié)論,對于ABO亞型的鑒定可采用血清學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法進(jìn)行綜合判斷[14]。輸血時應(yīng)根據(jù)是否存在抗-B和可供選擇的血液資源,遵循相容性輸注的基本原則,確保輸血安全[15]。

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    [15] 汪德清,李卉.臨床輸血-個案精選[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:7-8.

    (收稿日期:2020-10-26)

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