《紫外分光光度法測定硼》檢測方法驗證

馬 博

（石家莊高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)供水排水公司，河北石家莊 050035）

硼與亞甲胺-H形成黃色配合物，其顏色與硼的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，適用于生活飲用水及其水源水中可溶性硼的測定。最低檢測質(zhì)量為1.0μg，若取5.0mL水樣測定，則最低檢測質(zhì)量濃度為0.20mg/L。

1 測定方法與參數(shù)

對GB/T 5750.5—2006《生活飲用水標準檢驗方法》開展方法驗證。根據(jù)該標準方法，配制標準系列，建立工作曲線；根據(jù)與質(zhì)控樣品數(shù)據(jù)比對檢驗準確度；采用某濃度樣品進行加標回收驗證（注：方法為紫外分光光度法光法，參數(shù)有準確度、精密度）。

2 實驗儀器與試劑

10mL比色管、TU-1901型紫外可見分光光度計及100mL容量瓶。

①硼標準儲備液（100μg/mL）：稱取0.286 0g硼酸，加純水溶解，并定容至500mL，儲存于聚乙烯試劑瓶中。②硼標準使用液：將硼標準溶液或硼標準儲備溶液稀釋10倍。③甲亞胺-H溶液（5g/L）：稱取0.5g甲亞胺-H，2.0g抗壞血酸，加100mL純水，微熱（＜50℃）使完全溶解，此溶液需臨用時配制。④乙酸鹽緩沖溶液（pH 5.6）：稱取75g乙酸銨和5.0g Na2EDTA，溶于110mL純水中；加入37.5mL冰乙酸（ρ20=1.06g/mL）。

3 檢出限與測定下限

3.1 標準曲線溶液配制

取6支10mL比色管，再加入0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0mL硼標準使用液，用純水稀釋至5.0mL。向各管中加入2.0mL乙酸鹽緩沖溶液，混勻。準確加入2.0mL甲亞胺-H溶液，混勻放置90min后檢測。

3.2 樣品處理

取水樣5mL置于10mL比色管中，向各管中加入2.0mL乙酸鹽緩沖溶液，混勻。準確加入2.0mL甲亞胺-H溶液，混勻放置90min后檢測。

3.3 樣品檢測

在紫外分光光度計上，于420nm波長，1cm比色皿，以試劑空白為參比進行檢測。依據(jù)標準曲線溶液檢測結(jié)果繪制標準曲線，并對樣品進行測定。

3.4 方法檢出限的確定

根據(jù)HJ 168—2010《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則》要求，進行檢出限的確定。

3.4.1 標準曲線限的建立

水中硼的標準系列：0mg/L、0.2mg/L、0.6mg/L、1.0mg/L、1.4mg/L、2.0mg/L.線性方程為Y=0.018 24Abs+2.234 64，相關(guān)系數(shù)為r=0.999 4

3.4.2 離群值得取舍

使用標準溶液液配制一估計方法檢出限2～5倍的樣品的標準溶液。測定11次結(jié)果見表1。取顯著性水平α=0.05，采用dixon檢驗，檢驗最大值和最小值，未檢出離群值。

表1 方法檢出限、測定下限測試數(shù)據(jù)

檢出限和測定下限的確定：

n=11，=0.695 7，S=0.001 3mg/L，根據(jù)HJ168—20110《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則》。

方法檢出限 ：MDL=t（n-1，0.99）×S

即：2.764×0.001 3=0.003 6mg/L

根據(jù)HJ 168—20110《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則》。

限：4倍檢出限作為測定下限。即4×0.003 6=0.014mg/L

綜上所述，本方法的檢出限為0.003 6，測定下限為0.014。

4 精密度的驗證

4.1 兩種溶液測定結(jié)果

分別配制0.20mg/L、1.0mg/L兩個濃度溶液，對上述兩種溶液分別測定6次，測定結(jié)果填入表2，并進行計算。

表2 測定結(jié)果

通過以上檢測數(shù)據(jù)對精密度進行評估，符合GB/T 32465—2015《化學(xué)分析方法驗證確認和內(nèi)部質(zhì)量控制要求》《合格評定 化學(xué)分析方法驗證確認和驗證指南》相關(guān)要求。

4.2 有證標準樣品的重復(fù)性和回收率確定

選用國家環(huán)境標準樣品（批號206805，濃度0.902mg/L±0.042mg/L準確移取10.0mL樣品于250mL容量瓶中，用純水定容至刻度，作為檢測樣品，按作業(yè)指導(dǎo)書要求進行分析。測定結(jié)果見分別為0.925 9、0.928 2、0.930 7、0.934、0.930 5、0.941 9mg/L，平均值0.931 9mg/L。

通過以上檢測數(shù)據(jù)可知，有證標準物質(zhì)的測定值在證書范圍內(nèi)。

4.3 加標回收率測定

對實際樣品和實際樣品加標進行檢測，選取某濃度水樣平行測定，測定結(jié)果及加標回收率見表3。

表3 實際水樣及加標回收率數(shù)據(jù)

通過以上檢測數(shù)據(jù)對加標回收率進行評估，符合GB/T 27417—2017 《合格評定 化學(xué)分析方法驗證確認和驗證指南》附錄A相關(guān)要求。

5 結(jié)論

通過以上驗證方法及驗證參數(shù)，在本實驗室確立的條件下，該方法的標準曲線線性關(guān)系良好，硼的線性范圍為0.2～2.0mg/L。精密度相對標準偏差在0.13%～0.25%，重復(fù)性良好；有證標準物質(zhì)測定值在證書范圍內(nèi)，水樣回收率在113.3%。本方法結(jié)果能滿足實驗室水中硼的測定要求，各項指標均能達到規(guī)定的要求。