CD66b在涎腺腺樣囊性癌組織中的表達(dá)及其意義

麻雪夢，曹陽

（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院 病理科，南寧）

0 引言

涎腺腺樣囊性癌（SACC）是一種較常見的口腔頜面部惡性腫瘤，約占所有頭頸部腫瘤的1%和所有唾液腺腫瘤的10%，具有生長速度緩慢、侵襲性強，術(shù)后可見局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，常侵犯周圍神經(jīng)等獨特的生物學(xué)行為[1-2]。近年來的研究表明，CD66b與多種惡性腫瘤的病變密切相關(guān)[3-6]。本研究采用PV-6000免疫組織化學(xué)檢測技術(shù)對已確診的51例涎腺腺樣囊性癌標(biāo)本和35例正常涎腺組織中CD66b的表達(dá)進(jìn)行觀察，探討CD66b的表達(dá)與涎腺腺樣囊性癌的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

實驗組標(biāo)本采集：收集廣西醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院病理科2016年3月至2021年1月的涎腺腺樣囊性癌手術(shù)切除病理組織標(biāo)本51例（門診10例+住院41例），男29例，女22例，年齡21～75歲，平均49歲，≥49歲28例，＜49歲23例。局部有神經(jīng)侵犯者6例，無神經(jīng)侵犯者45例；頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移6例，無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。

對照組標(biāo)本采集：正常涎腺組織35例。

1.2 試劑和方法

CD66b兔多克隆抗體購自Abcam公司，PV-6000試劑盒、DAB顯色液購自北京中杉金橋公司。所有組織標(biāo)本均嚴(yán)格按常規(guī)處理，將組織蠟塊連續(xù)切片層厚4 μm。60 ℃烤片3 h，脫蠟、梯度酒精復(fù)水，高壓抗原堿修復(fù)，一抗4 ℃過夜孵育，37 ℃20 min孵育二抗，DAB顯色和蘇木素染液復(fù)染，脫水，透明，封片，鏡下觀察。

1.3 結(jié)果判讀

CD66b陽性信號主要定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色或黃色。評分標(biāo)準(zhǔn)為：選取6個具有代表性的高倍鏡視野對癌組織的染色率及染色強度進(jìn)行評分。染色率：0%～25%（1分），25%～50%（2分），50%～75%（3分），75%～100%（4分）；染色強度：藍(lán)色（0分），淺黃色（1分），黃色（2分），棕黃色（3分）。每個視野的評分=染色率X染色強度，取平均值作為該片子最終的免疫組化評分。由于本組病例數(shù)有限，故將評分≥3分表示高表達(dá)，評分＜3分表示低表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料用率（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD66b在SACC組織及正常涎腺組織中的表達(dá)

陽性表達(dá)產(chǎn)物：CD66b的染色部位主要定位于胞質(zhì)和包膜中。以免疫組化PV-6000技術(shù)檢測的CD66b在SACC組織及正常涎腺組織中的表達(dá)情況見圖1、圖2。

圖1 CD66b在SACC組織中的表達(dá)（×400）

圖2 CD66b在正常涎腺組織中的表達(dá)（×400）

2.2 CD66b在SACC組織中的表達(dá)情況及與SACC各臨床病理特征之間的相關(guān)性

CD66b在SACC組織中的表達(dá)低于CD66b在正常涎腺組織中的表達(dá)，兩者的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

在SACC組織中，CD66b的表達(dá)水平與患者性別、年齡、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和神經(jīng)累犯無關(guān)（P＞0.05），見表1。

表1 SACC組織及正常涎腺組織中CD66b的表達(dá)情況及與臨床病理特征之間的相關(guān)性（n）

3 討論

CD66b為單鏈、gpi錨定、高糖基化蛋白，分子量為95 kDa，是人癌胚Ag（CEA）家族成員。以往的研究發(fā)現(xiàn)在中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞上可看到CD66b蛋白的表達(dá)，它被認(rèn)為是粒細(xì)胞“激活標(biāo)記物”[7-9]。有研究顯示CD66陽性中性粒細(xì)胞的表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[10-11]。

本研究通過對35例正常涎腺組織進(jìn)行免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)，CD66b在正常涎腺組織中呈穩(wěn)定的陽性或強陽性表達(dá)，這意味著CD66b可能在維持正常涎腺組織的結(jié)構(gòu)和功能方面發(fā)揮關(guān)鍵的作用，機制尚不清楚。同時本研究還發(fā)現(xiàn)CD66b在涎腺腺樣囊性癌中表達(dá)較弱或表達(dá)缺失，與其在正常涎腺組織表達(dá)相比有顯著性差異，表明CD66b在涎腺腺樣囊性癌組織中表達(dá)的異?？赡芘c發(fā)病的狀態(tài)有關(guān)，可能可作為一個潛在的標(biāo)記物用于區(qū)分SACC組織和正常涎腺組織。本研究對CD66b的表達(dá)與臨床病理特征之間的相關(guān)性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)CD66b的表達(dá)水平與涎腺腺樣囊性癌患者的性別、年齡、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和神經(jīng)累犯無顯著差異，這表明CD66b可能與涎腺腺樣囊性癌的進(jìn)展沒有顯著性相關(guān)。

本課題證實CD66b可能可作為一個潛在的標(biāo)記物用于區(qū)分SACC組織和正常涎腺組織，CD66b不僅存在于粒細(xì)胞中，也存在于涎腺組織中。本研究下一步將繼續(xù)增加樣本量來進(jìn)一步驗證CD66b與涎腺腺樣囊性癌進(jìn)展的關(guān)系。