兒童哮喘吸入性糖皮質(zhì)激素療效評價與GLCCI1、FCER2基因多態(tài)性的研究

朱雙桂 陳強 萬慕湲 李嵐 朱曉華 李建 熊友健 杜云

【摘要】 目的：探討兒童哮喘吸入性糖皮質(zhì)激素療效及其與GLCCI1、FCER2基因多態(tài)性的關(guān)系。方法：選取2017年5月-2018年5月在本院呼吸科診斷為支氣管哮喘患兒60例為治療組，并選取同期在本院進行體檢的正常健康兒童30名為對照組。治療組治療前采用華夏時代的快速基因分析方法檢測入選患兒吸入性糖皮質(zhì)激素（ICS）相關(guān)的基因類型（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2，檢測對照組及治療組患兒治療前、治療24周后血清SIgE水平和血清IL-6、IL-8、IL-10的水平變化，同時對治療組患兒治療前后的肺功能FEV1%進行檢測。結(jié)果：治療組60例哮喘患兒（-1106）GLCCI1表現(xiàn)基因型有GG基因型（野生純合子）、GA基因型（雜合子）、AA基因型（突變型純合子）。治療組60例哮喘患兒（2206）FCER2基因型有AA基因型（野生純合子）、AG基因型（雜合子）、GG基因型（突變型純合子）。治療組治療前血清SIgE、IL-6、IL-8水平均高于對照組，IL-10水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。治療前，治療組（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2各基因表現(xiàn)型之間的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10、FEV1%pred比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，治療組（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2表現(xiàn)基因型為AA基因型SIgE、IL-6、IL-8水平較治療前均下降，IL-10、FEV1%pred較治療前均上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。治療后，治療組（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型且（2206）FCER2表現(xiàn)型也為AA基因型哮喘患兒的血清SIgE、IL-6、IL-8水平較治療前均明顯下降，且明顯低于其他類型患兒（P<0.05）。治療后，治療組（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型且（2206）FCER2表現(xiàn)型也為AA基因型哮喘患兒的IL-10、FEV1%pred均較治療前升高，且均明顯高于其他類型患兒（P<0.05）。結(jié)論：兒童哮喘吸入性糖皮質(zhì)激素療效與GLCCI1、FCER2基因多態(tài)性密切相關(guān)，其中（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型和（2206）FCER2表現(xiàn)型為AA基因型哮喘兒童吸入性糖皮質(zhì)激素療效更佳。

【關(guān)鍵詞】 兒童 哮喘 吸入性糖皮質(zhì)激素 GLCCI1 FCER2 基因多態(tài)性

Efficacy Evaluation of Inhaled Glucocorticoids in Children with Asthma and Study on GLCCI1 and FCER2 Gene Polymorphism/ZHU Shuanggui， CHEN Qiang， WAN Muyuan， LI Lan， ZHU Xiaohua， LI Jian， XIONG Youjian， DU Yun. //Medical Innovation of China， 2021， 18（14）： -123

[Abstract] Objective： To investigate the efficacy of inhaled glucocorticoids in children with asthma and its relationship with GLCCI1 and FCER2 gene polymorphisms. Method： A total of 60 children with bronchial asthma diagnosed in the respiratory department of our hospital from May 2017 to May 2018 were selected as the treatment group， 30 healthy children who underwent physical examination in the same period were selected as the control group. In the treatment group， the gene types associated with inhalation glucocorticoids （ICS） （-1106） GLCCI1 and （2206） FCER2 were detected by rapid gene analysis in the Chinese era before treatment. Serum SIgE levels and serum IL-6， IL-8 and IL-10 levels of children in the control group and the treatment group were detected before and after treatment for 24 weeks. Meanwhile， FEV1%pred of lung function in the treatment group before and after treatment was detected. Result： GG genotype （wild homozygous）， GA genotype （heterozygous） and AA genotype （mutant homozygous） were found in 60 asthmatic children （-1106） in the treatment group. The genotypes of FCER2 in the treatment group （2206） were AA genotype （wild homozygous）， AG genotype （heterozygous） and GG genotype （mutant homozygous）. Before treatment， serum SIgE， IL-6 and IL-8 levels in the treatment group were all higher than those in the control group， and IL-10 level was lower than that in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Before treatment， there were no statistically significant differences in SIgE， IL-6， IL-8， IL-10

levels and FEV1%pred between （-1106） GLCCI1 and （2206） FCER2 gene phenotypes in the treatment group （P>0.05）. After treatment， the expression genotypes of （-1106） GLCCI1 and （2206） FCER2 in the treatment group were AA genotype SIgE， IL-6 and IL-8 levels decreased compared with before treatment， while IL-10 and FEV1%pred were increased compared with before treatment， the differences were statistically significant （P<0.05）. After treatment， serum levels of SIgE， IL-6 and IL-8 in asthmatic children with AA genotype （-1106）GLCCI1 and AA genotype （2206） FCER2 genotype in the treatment group were significantly lower than those before treatment， and significantly lower than those in other types of children （P<0.05）. After treatment， IL-10 and FEV1%pred in asthmatic children with AA genotype （-1106） GLCCI1 phenotype and AA genotype （2206） FCER2 phenotype were significantly higher than those before treatment， and significantly higher than those of other types （P<0.05）. Conclusion： The efficacy of inhaled glucocorticoids in children with asthma is closely related to GLCCI1 and FCER2 gene polymorphism， and the efficacy of inhaled glucocorticoids in children with asthma with GLCCI1 phenotype and FCER2 phenotype of AA genotype is better.

[Key words] Children Asthma Inhaled glucocorticoids GLCCI1 FCER2 Genetic polymorphism

First-authors address： Jiangxi Childrens Hospital， Nanchang 330006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.14.029

吸入性糖皮質(zhì)激素（ICS）是目前臨床最有效的哮喘控制藥物[1]。但是臨床觀察發(fā)現(xiàn)，哮喘患兒ICS的療效具有較明顯的個體差異[2]。哮喘患兒ICS后的治療反應(yīng)70%與遺傳有關(guān)[3]。因此，尋找ICS反應(yīng)性的藥物遺傳標(biāo)記指導(dǎo)ICS治療對改善哮喘療效具有重要意義。本研究通過比較（-1106）GLCCI1、（2206）FCER2位點基因不同表型哮喘患兒應(yīng)用ICS治療后肺功能以及血清SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平的變化，分析（-1106）GLCCI1與（2206）FCER2基因多態(tài)性對哮喘患兒ICS治療后反應(yīng)的影響，為兒童哮喘的個體化治療提供可靠的理論依據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年5月-2018年5月在江西省兒童醫(yī)院呼吸科診斷為支氣管哮喘患兒60例為治療組，并選取同期在江西省兒童醫(yī)院進行體檢的6～14歲、無家族及個人過敏性疾病史，且近一個月內(nèi)無上呼吸道感染的正常健康兒童30例為對照組。患兒納入標(biāo)準(zhǔn)：所有確診患兒均符合兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）中兒童輕度支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];年齡6～14歲;性別不限;未使用激素治療。患兒排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他急慢性內(nèi)科疾病;經(jīng)特異性免疫治療干預(yù)、既往有不可控哮喘發(fā)作。兩組兒童及其監(jiān)護人均簽署了知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會通過。

1.2 方法 治療組依據(jù)兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）中關(guān)于糖皮質(zhì)激素的用藥標(biāo)準(zhǔn)[4]，在哮喘急性發(fā)作緩解后，給予入選患兒丙酸氟替卡松吸入氣霧劑（輔舒酮）[生產(chǎn)廠家：Glaxo Wellcome S.A.（西班牙），批準(zhǔn)文號：H20130190，規(guī)格：每撳含125 μg丙酸氟替卡松×60撳]經(jīng)口腔吸入治療，初始劑量100 mg/次，2次/d，根據(jù)具體病情變化調(diào)整輔舒酮用量（100～250 mg，2次/d），當(dāng)達到哮喘控制之后，維持至少3個月，可考慮降級治療。治療組均隨訪觀察24周。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) （1）治療組治療前均抽取外周靜脈血2 mL，以EDTA抗凝的無菌真空采血管采集，于-20 ℃低溫保存[使用分析保存液（耀金保）保存]，采用華夏時代的快速基因分析方法檢測吸入性糖皮質(zhì)激素（ICS）相關(guān)的基因類型

[（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2]。（2）分別抽取對照組及治療組患兒治療前、治療24周后的外周靜脈血2 mL，室溫放置30 min，然后1 000 r/min、3 cm半徑離心20 min，將上清液置于-80 ℃保存，用于檢測SIgE檢測。分別抽取對照組及治療組患兒治療前、治療24周后的外周靜脈血3 mL，室溫放置30 min，然后1 000 r/min、3 cm半徑離心20 min，

將上清液置于-80 ℃保存，用于檢測IL-6、IL-8、IL-10。SIgE檢測采用免疫印跡法，血清IL-6、IL-8、IL-10檢測應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法檢測，檢測相關(guān)試劑盒均購自上海江萊生物科技有限公司，嚴(yán)格參照說明書指導(dǎo)進行檢測操作。（3）對照組健康體檢兒童未統(tǒng)一進行肺功能的檢測。治療組哮喘患兒治療前及治療24周后均進行肺功能第1秒用力呼氣容積占預(yù)計值的百分比（FEV1%pred）測定，肺功能測定采用德國耶格MasterScreen PFT System肺功能儀進行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 24.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，組內(nèi)比較采用配對t檢驗，組間比較采用獨立t檢驗，多組數(shù)據(jù)比較采用方差分析并采用SNK-q檢驗進行進一步的兩兩比較;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的基線資料比較 兩組的性別、平均年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見表1。

2.2 治療組ICS相關(guān)的基因類型分析 治療組60例哮喘患兒（-1106）GLCCI1表現(xiàn)基因型有GG基因型（野生純合子）、GA基因型（雜合子）、AA基因型（突變型純合子）。治療組60例哮喘患兒（2206）FCER2基因型有AA基因型（野生純合子）、AG基因型（雜合子）、GG基因型（突變型純合子）。具體例數(shù)和占比見表2。

2.3 兩組血清SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平比較 治療組治療前血清SIgE、IL-6、IL-8水平均高于對照組，IL-10水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.4 治療組治療前后不同（-1106）GLCCI1表現(xiàn)基因型患兒各指標(biāo)比較 治療前，治療組（-1106）GLCCI1各基因表現(xiàn)型之間的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10、FEV1%pred比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，治療組表現(xiàn)基因型為AA基因型SIgE、IL-6、IL-8水平較治療前均下降，IL-10、FEV1%pred均較治療前均上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

2.5 治療組治療前后不同（2206）FCER2表現(xiàn)基因型患兒各指標(biāo)比較 治療前，治療組（2206）FCER2各基因表現(xiàn)型之間的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平、FEV1%pred比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，治療組表現(xiàn)基因型為AA基因型SIgE、IL-6、IL-8水平較治療前均下降，IL-10、FEV1%pred均較治療前均上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表5。

2.6 治療組不同（-1106）GLCCI1+（2206）FCER2表現(xiàn)基因型患兒各指標(biāo)比較 治療后，治療組（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型且（2206）FCER2表現(xiàn)型也為AA基因型哮喘患兒的血清SIgE、IL-6、IL-8水平較治療前均明顯下降，且明顯低于其他類型患兒（P<0.05）。治療后，治療組（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型且（2206）FCER2表現(xiàn)型也為AA基因型哮喘患兒的IL-10、FEV1%pred均較治療前升高，且均明顯高于其他類型患兒（P<0.05）。見表6。

3 討論

支氣管哮喘是兒童常見呼吸系統(tǒng)疾病，近年來兒童哮喘的發(fā)病呈現(xiàn)逐年上升趨勢，已成為嚴(yán)重影響兒童健康和消耗眾多醫(yī)療衛(wèi)生資源病癥。兒童哮喘可明顯影響患兒肺功能，影響其日常生活乃至正常人際交流，可對其心理健康造成影響，且其治療可加重家庭以及社會經(jīng)濟負(fù)擔(dān)[5-7]。哮喘的治療包括避免接觸過敏原、藥物治療和過敏原特異性治療，支氣管舒張劑、糖皮質(zhì)激素、白三烯調(diào)節(jié)劑均是其治療藥物，但這些藥物總體哮喘控制水平不一[8-10]。目前兒童哮喘的治療首選藥物干預(yù)，而治療藥物中，糖皮質(zhì)激素是首選長期控制藥物[11-12]。糖皮質(zhì)激素可有效降低氣道反應(yīng)性，緩解患者的臨床癥狀，減少疾病惡化的發(fā)生，改善肺功能狀況并提高患者生存質(zhì)量[13-14]。本研究中，哮喘患兒中（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型、（2206）FCER2表現(xiàn)型為AA基因型者，其血清SIgE、IL-6、IL-8水平均升高，IL-10水平較降低，而糖皮質(zhì)激素治療亦可有效改善哮喘患兒的肺功能和控制其炎癥反應(yīng)。然而本研究各哮喘患兒糖皮質(zhì)激素治療的效果不一。多個研究亦表明，哮喘的糖皮質(zhì)激素治療效果有很大的個體差異性[15-17]。因此，明確哮喘糖皮質(zhì)激素的治療的可能影響因素，指導(dǎo)臨床進行有效干預(yù)，對改善哮喘糖皮質(zhì)激素干預(yù)效果具有重要意義。

有研究認(rèn)為，哮喘的治療效果差異與基因變異有關(guān)，認(rèn)為哮喘是由遺傳因素和環(huán)境因素相互作用、共同影響形成的多基因遺傳傾向性疾病[18-20]。GLCCI1與FCER2均為與哮喘密切相關(guān)基因[21-22]。因此，遺傳因素對藥物效應(yīng)的個體間差異的影響較大，而確定具體的遺傳狀況對哮喘治療效果的影響可指導(dǎo)臨床選取更佳的治療方法進行干預(yù)以改善療效。本研究分析哮喘兒童的GLCCI1與FCER2基因多態(tài)性，并分析其對哮喘患兒ICS治療后反應(yīng)差異的影響，研究結(jié)果顯示，哮喘患兒（-1106）GLCCI1表現(xiàn)基因型有GG基因型（野生純合子）、GA基因型（雜合子）、AA基因型（突變型純合子）。治療組60例哮喘患兒（2206）FCER2基因型有AA基因型（野生純合子）、AG基因型（雜合子）、GG基因型（突變型純合子）。治療前，治療組（-1106）GLCCI1各基因表現(xiàn)型之間的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平、FEV1%pred比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），哮喘治療前GLCCI1與FCER2基因多態(tài)性對其病情影響差異不大。哮喘患兒（-1106）GLCCI1表現(xiàn)基因型為AA基因型對ICS治療應(yīng)答較好，哮喘患兒（2206）FCER2基因型表現(xiàn)為AA基因型SIgE水平不高，哮喘發(fā)作較GG基因型容易控制（P<0.05），而（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型且（2206）FCER2表現(xiàn)型也為AA基因型哮喘患兒經(jīng)ICS治療后患兒的肺功能改善明顯高于其他類型患兒，且血清SIgE、IL-6、IL-8水平較治療前下降明顯，IL-10較治療前升高。（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型和（2206）FCER2表現(xiàn)型為AA基因型時其糖皮質(zhì)激素治療效果最佳，而其他基因型哮喘患兒需考慮更改治療方案，聯(lián)合增加其他治療藥物或選取更有效治療藥物進行治療，以提高療效，改善生存質(zhì)量和預(yù)后。

綜上所述，兒童哮喘吸入性糖皮質(zhì)激素療效不一，不同GLCCI1、FCER2基因多態(tài)性哮喘患兒糖皮質(zhì)激素差異較大，其中（-1106）GLCCI1表現(xiàn)型為AA基因型和（2206）FCER2表現(xiàn)型為AA基因型哮喘兒童可獲得最佳療效。治療前GLCCI1、FCER2等基因多態(tài)性分析有助于指導(dǎo)臨床為哮喘兒童制定更佳的治療方案，提高治療效果。

參考文獻

[1]邵琦，郁志偉，李天宇，等.IL-17F基因多態(tài)性和兒童哮喘易感性相關(guān)性分析[J].臨床兒科雜志，2019，37（6）：401-404.

[2] Rajan S，Gogtay N J，Konwar M，et al.The global initiative for asthma guidelines （2019）： change in the recommendation for the management of mild asthma based on the SYGMA-2 trial - A critical appraisal[J].Lung India，2020，37（2）：169-173.

[3]任丹陽，涂彩霞，李惠英，等.ADRB2（rs1042713）基因多態(tài)性對抗膽堿能藥物治療難治性哮喘患兒療效的影響[J].中國藥房，2019，30（23）：3265-3270.

[4]中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組，《中華兒科雜志》編輯委員會.兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）[J].中華兒科雜志，2016，54（3）：167-181.

[5]任丹陽，李云巍，涂彩霞，等.ADRB2、GLCCI1、FCER2基因檢測在2例難治性哮喘患兒個體化用藥中的實踐[J].中國藥房，2018，29（5）：659-662.

[6] Irusen E M.The Global Initiative for Asthma 2019 recommendation for mild asthma-A critique[J].S Afr Fam Pract （2004），2020，62（1）：e1-e4.

[7]金光日，池永學(xué)，金燦.IL-10通路基因多態(tài)性與哮喘及OPN、TGF-β1水平相關(guān)性探討[J].免疫學(xué)雜志，2020，36（7）：628-632.

[8]熊曉琦，宋新宇，曾凡軍，等.支氣管哮喘患者eotaxin-3基因多態(tài)性對吸入糖皮質(zhì)激素的影響[J].重慶醫(yī)學(xué)，2017，46（27）：3786-3788，3791.

[9] Matera M G，Rinaldi B，Berardo C，et al.A review of the pharmacokinetics of M3 muscarinic receptor antagonists used for the treatment of asthma[J].Expert Opin Drug Metab Toxicol，2020，16（2）：143-148.

[10] Nair A P，Bardin B P，Humbert C M，et al.Efficacy of Intravenous Reslizumab in Oral Corticosteroid-Dependent Asthma[J].The Journal of Allergy and Clinical Immunology： In Practice，2020，8（2）：555-564.

[11]尉耘翠，賈露露，胡利華，等.兒童哮喘緩解期吸入性糖皮質(zhì)激素用藥依從性現(xiàn)況調(diào)查[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2019，39（14）：1494-1498.

[12]葉冬梅，李明，張泉.ADRB2、GLCCI1、FCER2基因多態(tài)性與小兒哮喘治療效果以及患兒肺功能的關(guān)系[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2019，25（24）：11-15.

[13]朱妤，劉金玲，王建華，等.糖皮質(zhì)激素對哮喘小鼠CD4+T細(xì)胞中miRNA-155表達調(diào)控的研究[J].中國病理生理雜志，2019，35（3）：565-570，576.

[14]謝凈余，張亮，何兵，等.吸入性糖皮質(zhì)激素聯(lián)合長效β2受體激動劑治療老年支氣管哮喘的效果[J].中國老年學(xué)雜志，2019，39（13）：3165-3167.

[15]王星翹，尹琴，王天祺，等.哮喘患者GLCCI1基因檢測指導(dǎo)吸入糖皮質(zhì)激素的安全性用藥效果[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2017，21（1）：34-36.

[16]丁穎，陸敏，董曉艷，等.GLCCI1基因多態(tài)性對吸入型糖皮質(zhì)激素治療兒童哮喘療效的影響[J].中國臨床藥學(xué)雜志，2017，26（6）：353-358.

[17] Koloskova O，Bilous T，Bilyk G，et al.Clinical and spirographic features of bronchial asthma in schoolchildren depending on the different regimens of basic anti-inflammatory therapy[J].Wiad Lek，2020，73（1）：31-35.

[18]黃秀芳，廖鋼，高運吉，等.哮喘相關(guān)基因與治療藥物的生物信息學(xué)分析[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2020，26（2）：155-163.

[19]郭青，沈照波，孫曉敏，等.胞漿型磷脂酶A2多態(tài)性與兒童支氣管哮喘發(fā)生及孟魯司特療效的相關(guān)性[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2019，21（2）：155-160.

[20]廉悅，宋滄桑，張陽.ADRB2、FCER2、GLCCI1、CRHR1基因多態(tài)性與哮喘患者氣道高反應(yīng)性的相關(guān)性[J/OL].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2019，19（57）：47-49.

[21]沈建玲，李惠英，李明，等.云南地區(qū)哮喘患兒GLCCI1基因rs37973位點多態(tài)性分布特點[J].兒科藥學(xué)雜志，2020，26（6）：32-35.

[22]邱玉明，李劍雄，李慧.GLCCI1基因rs37973位點多態(tài)性與哮喘的相關(guān)性[J].廣東醫(yī)學(xué)，2017，38（S1）：22-24.

（收稿日期：2020-08-11） （本文編輯：姬思雨）