獸醫(yī)眼表移植學(xué)及植片材料的研究進(jìn)展

胥輝豪，鄭小波，楊 恒，唐 靜，馮雪倩，慎曉軍，龔雨豪，林珈好，金藝鵬，林德貴

(1.西南大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，重慶 402460； 2.西南大學(xué) 發(fā)光分析與分子傳感教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400700； 3.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193)

近年來(lái)，隨著我國(guó)國(guó)民物質(zhì)與文化水平的急劇提升，動(dòng)物醫(yī)學(xué)診療行業(yè)發(fā)展迅猛。同時(shí)，教育部關(guān)于動(dòng)物醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)以及中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)小動(dòng)物醫(yī)學(xué)分會(huì)對(duì)于診療行業(yè)專(zhuān)科考核機(jī)制的逐步推行，使得動(dòng)物醫(yī)學(xué)的人才培養(yǎng)與行業(yè)發(fā)展已經(jīng)走向更為專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)科化道路。在人類(lèi)醫(yī)學(xué)或動(dòng)物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，眼科學(xué)都是極其獨(dú)立且精細(xì)的一門(mén)醫(yī)學(xué)專(zhuān)科，而角膜作為眼球重要的屈光與屏障器官[1]，其生理與病理變化以及治療手段尤其受到廣泛關(guān)注。外傷[2]、病原體[3]、自身免疫性疾病[4]等多種刺激因素均可導(dǎo)致動(dòng)物角膜出現(xiàn)不同程度的病變，其結(jié)果可嚴(yán)重影響視力，甚至威脅眼球。

角膜具有獨(dú)特的組織結(jié)構(gòu)與免疫特點(diǎn)，尤其“免疫特赦”的生理獨(dú)特性，讓多種移植手術(shù)更具可行性，也使之成為移植手術(shù)中成功率最高的器官。但角膜各層結(jié)構(gòu)對(duì)疾病的反應(yīng)以及愈合的特點(diǎn)各不相同[5]，總體而言，眼表移植手術(shù)最終治療目的分為治療性移植術(shù)和光學(xué)性移植術(shù)，前者主要維持角膜的完整性，而后者則主要針對(duì)功能的保留。經(jīng)過(guò)幾十年的探索研究與臨床實(shí)踐，動(dòng)物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域針對(duì)各種眼表疾病總結(jié)出了不同的治療方法，對(duì)于絕大多數(shù)角膜病變，眼表移植手術(shù)是穩(wěn)定角膜形態(tài)、維持眼球完整性以及恢復(fù)一定透光度的首要治療手段。但對(duì)于各種移植手術(shù)以及移植物的適應(yīng)癥、生物相容性、預(yù)后特點(diǎn)等方面則需綜合考慮，以期達(dá)到最佳的預(yù)后。本文就眼表移植學(xué)以及植片材料在獸醫(yī)眼科的應(yīng)用現(xiàn)狀與展望進(jìn)行綜述，并對(duì)獸醫(yī)眼科學(xué)中各種移植方法與材料的適應(yīng)癥和療效進(jìn)行討論。

1 眼表移植術(shù)的角膜適應(yīng)癥

角膜是眼球自身的第一道組織結(jié)構(gòu)屏障，并為眼球提供了2/3以上的屈光率。各種病因?qū)е聞?dòng)物角膜受累的性質(zhì)與程度各異，涉及到角膜嚴(yán)重缺損(例如角膜深度潰瘍、后彈力層膨出、角膜穿孔等)、角膜增生性病變(例如眼表腫瘤、皮樣囊腫、壞死性角膜炎等)、嚴(yán)重角膜感染(角膜基質(zhì)層膿腫、角膜真菌感染等)和角膜透光度下降(角膜內(nèi)皮功能障礙以及視軸區(qū)的嚴(yán)重瘢痕、礦物質(zhì)沉積、黑色素沉積等)等情況需要對(duì)角膜修剪或切割后進(jìn)行移植物填充。根據(jù)病灶侵害角膜的深度和面積選擇合理的術(shù)式以及移植材料以最大限度維持角膜形態(tài)與功能。

2 眼表移植術(shù)與植片材料的臨床應(yīng)用

眼表移植技術(shù)主要利用各種手術(shù)技術(shù)對(duì)角膜病灶進(jìn)行修復(fù)，經(jīng)過(guò)不斷地探索與改良，目前，術(shù)式大體上主要分為角膜板層移植、角膜全層移植和角膜內(nèi)皮移植。選擇不同性質(zhì)的移植材料修補(bǔ)角膜缺損，根據(jù)移植物的來(lái)源和性質(zhì)，可分為自體、同種異體、異種異體和生物工程材料。

2.1 自體來(lái)源材料眼表移植

利用受體動(dòng)物自身眼球組織結(jié)構(gòu)對(duì)角膜病灶或缺損進(jìn)行移植或修補(bǔ)是較為傳統(tǒng)的治療手段。常利用的組織包括球結(jié)膜與瞼結(jié)膜(conjunctival graft)甚至第三眼瞼，此類(lèi)材料最主要的治療目的是用于填充角膜缺損、促進(jìn)角膜愈合以及保護(hù)角膜。在20世紀(jì)50年代早期，首次報(bào)道了使用結(jié)膜組織修復(fù)動(dòng)物角膜深度損傷與穿孔[6-7]，至今仍然作為常規(guī)治療手段應(yīng)用于獸醫(yī)眼科臨床。該類(lèi)術(shù)式與材料具備的優(yōu)點(diǎn)：1)取材方便且技術(shù)要求相對(duì)不高，同時(shí)對(duì)植床無(wú)較高需求標(biāo)準(zhǔn)，可直接用于原始角膜缺損病灶；2) 結(jié)膜組織具有一定的張力和較為豐富的血管分布，可提供良好的支撐保護(hù)作用和血液供應(yīng)，促進(jìn)角膜愈合；因此，該術(shù)式廣泛應(yīng)用于各種動(dòng)物角膜的治療性移植中。但由于結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)與角膜差異性大，無(wú)論從組織厚度、纖維走向、彈性張力還是透光度等方面，兩者難以達(dá)到解剖學(xué)的一致性，故在恢復(fù)期將存在明顯瘢痕，角膜表面不平整，血管明顯殘留等弊端。第三眼瞼遮蓋術(shù)盡管?chē)?yán)格上來(lái)說(shuō)屬于暫時(shí)性眼表遮蓋，但作為最原始的眼表疾病治療手段，對(duì)淺層的角膜疾病有一定的治療效果[8]。

隨后，根據(jù)不同的適應(yīng)癥演變出各種類(lèi)型的結(jié)膜瓣術(shù)式用于治療動(dòng)物角膜疾病，包括帶蒂結(jié)膜瓣[9-10]、島狀結(jié)膜植片移植[11-12]、推進(jìn)式結(jié)膜瓣[13]以及360°結(jié)膜遮蓋[14]等。近年來(lái)，有學(xué)者提倡結(jié)膜瓣不僅用于修補(bǔ)角膜缺損，還可用于大皰性角膜病變的治療[15]，以此改善角膜的長(zhǎng)期水腫。在貓壞死性角膜炎中，部分學(xué)者建議長(zhǎng)期保留狹窄的結(jié)膜皮瓣根部以維持治療效果并防止疾病復(fù)發(fā)[16]，但該方法造成了結(jié)膜組織長(zhǎng)期停留于角膜表面并持續(xù)為角膜組織供應(yīng)血液，難以同時(shí)達(dá)到光學(xué)性治療目的，尤其對(duì)于大面積角膜修復(fù)的病例。第三眼瞼遮蓋術(shù)目前多為眼表移植術(shù)的輔助性治療手段，主要為了加強(qiáng)角膜塑性和保護(hù)。此外，對(duì)于單純的大皰性角膜病變也可起到較好的獨(dú)立治療效果。

自體或同種異體板層角膜鞏膜移植術(shù)(corneoscleral transplantation, CST)是針對(duì)角膜，尤其涉及角鞏膜緣區(qū)域病灶的板層移植技術(shù)[17]，該技術(shù)為眼表黑色素瘤提供了有效的治療思路，盡管術(shù)后可能出現(xiàn)輕微和短暫的并發(fā)癥，但能夠保留眼球的解剖與視覺(jué)功能[18]。而自體板層角膜結(jié)膜移植術(shù)(corneoconjunctival transposition, CCT)是在自體板層角膜鞏膜移植的基礎(chǔ)上改良而來(lái)的眼表移植技術(shù)，在切除病理性角膜基質(zhì)層后將周?chē)】到悄づc結(jié)膜組織平行移植到受體基質(zhì)植床中[19]。對(duì)于視軸區(qū)角膜基質(zhì)存在壞死、嚴(yán)重礦物質(zhì)沉積、瘢痕或黑色素沉積等情況可采用該術(shù)式。其主要優(yōu)點(diǎn)在于取材方便，維持了中央角膜區(qū)域的透光度和曲率，無(wú)免疫排斥反應(yīng)。但外周健康角膜區(qū)域平移后需要臨近結(jié)膜組織替代，后期會(huì)殘留一定瘢痕化。臨床中，自體板層角膜結(jié)膜移植術(shù)主要用于貓壞死性角膜炎的治療中。一項(xiàng)大型回顧性研究表明，CCT可用于貓各種厚度的角膜缺損，術(shù)后壞死復(fù)發(fā)率較傳統(tǒng)的結(jié)膜瓣手術(shù)低(8.3%)[20]。但平行移植的角膜組織中可能仍然潛伏皰疹病毒，具有潛在壞死病灶復(fù)發(fā)的可能。同一位點(diǎn)進(jìn)行二次手術(shù)具有一定風(fēng)險(xiǎn)性，尤其當(dāng)外周角膜厚度下降時(shí)，應(yīng)更換切割角膜的象限來(lái)避免穿孔。此外，對(duì)于其他物種的動(dòng)物較為嚴(yán)重的角膜疾病，CCT也可作為治療方式之一。對(duì)于深基質(zhì)層角膜潰瘍、后彈力層膨出等非全層角膜損傷的適應(yīng)癥，大部分病例術(shù)后可獲得植片區(qū)域透明或部分透明，但色素細(xì)胞和血管化可通過(guò)結(jié)膜組織引入角膜中[21]。原則上該術(shù)式適用于病灶面積小于角膜直徑25%～30%的適應(yīng)癥[22]，最新臨床報(bào)道表明，當(dāng)病灶面積較大時(shí)，可選擇橋式角膜結(jié)膜平移的方式分別從病灶對(duì)應(yīng)的兩端向中央取材并匯合，以保證視軸區(qū)角膜植片的供應(yīng)[23]?？傮w來(lái)說(shuō)，該術(shù)式能夠盡量滿(mǎn)足瞳孔區(qū)域角膜的形態(tài)與功能，當(dāng)外周保留足夠健康角膜作為供體時(shí)，可作為較為理想的板層移植手段，對(duì)操作技術(shù)有一定要求。

2.2 異體來(lái)源材料眼表移植

多年來(lái)，各種異體來(lái)源組織材料被廣泛研究并應(yīng)用于動(dòng)物眼表移植學(xué)中，以尋找更為理想且來(lái)源更為便捷、豐富的移植材料。同種異體角膜移植是最具代表性的經(jīng)典眼表移植手術(shù)，該方法的研究可追溯至20世紀(jì)[24]。其保證了植片物種間的一致性，具備相同的組織結(jié)構(gòu)與解剖特點(diǎn)，可根據(jù)適應(yīng)癥選擇不同厚度的角膜植片，最終達(dá)到理想的治療與光學(xué)效果。在理想的情況下，優(yōu)先選擇新鮮角膜供體，新鮮組織被認(rèn)為是成功進(jìn)行同種異體角膜移植的必要條件，但儲(chǔ)存時(shí)間有限(4 ℃冷藏條件下不超過(guò)48 h)[25]；此外，國(guó)外具有動(dòng)物眼庫(kù)，在1個(gè)月到1年的時(shí)間范圍內(nèi)可選擇犬、貓以及馬等物種的冷凍角膜進(jìn)行移植手術(shù)[26]。盡管天然角膜植片是最佳的移植材料，但由于角膜組織來(lái)源具有較大局限性，而獸醫(yī)眼庫(kù)數(shù)量也非常有限，因此限制了新鮮角膜或冷凍角膜在獸醫(yī)臨床的廣泛應(yīng)用。

根據(jù)適應(yīng)癥的不同，同種異體角膜移植分為板層移植和穿透性移植兩類(lèi)。全層角膜移植是傳統(tǒng)的眼表移植技術(shù)，通過(guò)全層角膜置換來(lái)獲取完整角膜結(jié)構(gòu)并維持移植區(qū)角膜光學(xué)功能。該方法可有效治療動(dòng)物嚴(yán)重、全層角膜疾病，該術(shù)式開(kāi)發(fā)的早期主要針對(duì)內(nèi)皮功能障礙的病例。國(guó)內(nèi)外學(xué)者均成功將該方法用于治療動(dòng)物角膜疾病。由于該術(shù)式導(dǎo)致眼內(nèi)組織暴露且損傷相對(duì)較大，故術(shù)后并發(fā)癥明顯，主要包括植片排斥、創(chuàng)口撕裂、青光眼、前房積血、葡萄膜炎等[27-29]。與人類(lèi)一樣，盡管來(lái)自同種異體的角膜植片在本質(zhì)上避免了異源性，但仍然有多個(gè)因素決定著術(shù)后植片的存活，如角膜血管化程度、植片大小、是否偏中心移植、縫合技術(shù)等[30-31]。此外，由于同種異體來(lái)源的全層角膜植片含有大量細(xì)胞組分，其中上皮、角膜細(xì)胞是主要組織相容性復(fù)合體(MHC)抗原和次要H抗原，尤其是新鮮角膜供體植片主要針對(duì)角膜上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，因此相對(duì)具有更大的排斥風(fēng)險(xiǎn)。研究顯示，犬高危穿透性角膜移植術(shù)的排斥發(fā)生率高于板層移植(分別為57%和55%)[27]。

隨著科技的進(jìn)步，異體天然角膜板層移植在獸醫(yī)眼科學(xué)中逐漸具有廣泛的適應(yīng)癥。對(duì)于未全層角膜損傷的病例，在技術(shù)與設(shè)備可行的前提下，均可使用該術(shù)式進(jìn)行治療。異體板層角膜移植可維持角膜的結(jié)構(gòu)和光學(xué)功能，其并發(fā)癥主要包括植片脫落、溶解和色素化[32]。在人眼科學(xué)和比較醫(yī)學(xué)的不斷深入發(fā)展與研究的進(jìn)程中，更多術(shù)式被引入到了動(dòng)物板層角膜移植中。Archila[33]于1984年正式提出深層板狀角膜移植術(shù)(deep lamellar keratoplasty，DLKP)的概念[33]，將該技術(shù)定義為完全切除病理性角膜基質(zhì)組織至后彈力層，隨后將無(wú)內(nèi)皮的供體角膜移植到宿主植床中。與傳統(tǒng)LKP中基質(zhì)與基質(zhì)的對(duì)合方式相比，該術(shù)式中基質(zhì)與后彈力層的對(duì)合方式更符合角膜的解剖結(jié)構(gòu)，更利于角膜透明度的恢復(fù)。在馬屬動(dòng)物角膜的一些傾向性適應(yīng)癥中(易出現(xiàn)真菌性角膜炎或角膜基質(zhì)膿腫)，還可選擇后板層角膜移植術(shù)進(jìn)行治療。臨床結(jié)果顯示，盡管同種異體的后板層角膜移植病例術(shù)后部分出現(xiàn)了排斥反應(yīng)，但最終取得了良好效果，與穿透性角膜移植無(wú)顯著差異[34]。為了更為精準(zhǔn)暴露后彈力層，在獸醫(yī)眼科學(xué)中，將大泡輔助分離切割技術(shù)應(yīng)用到了深板層角膜移植術(shù)中，該技術(shù)的應(yīng)用更有利于動(dòng)物深部角膜基質(zhì)層的切割，由于減少了角膜組織的抗原數(shù)量，相關(guān)臨床報(bào)道稱(chēng)術(shù)后未見(jiàn)免疫排斥反應(yīng)[35]。

2.3 其他組織來(lái)源材料眼表移植

一直以來(lái)，獸醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)不斷研究與摸索將機(jī)體各種組織來(lái)源的材料用于眼表移植，以期篩選出方便獲得、具有修補(bǔ)效果和維持角膜光學(xué)功能的替代移植物。羊膜作為胎衣的一部分，由于其免疫、生理等特點(diǎn)，早在20世紀(jì)初就廣泛應(yīng)用于各種臨床手術(shù)中[36]。羊膜具備無(wú)血管，抗炎、促進(jìn)上皮化、抗纖維化、抗蛋白酶和生長(zhǎng)因子等特征[37-39]，也廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床的眼表移植修復(fù)手術(shù)中。根據(jù)材料來(lái)源，新鮮羊膜和儲(chǔ)存羊膜均可使用[40]，但由于制備工藝略微復(fù)雜以及厚度較薄制約了適應(yīng)癥[41]。對(duì)于角膜上皮包涵體、皮樣囊腫等淺表性角膜疾病，使用羊膜移植能夠促進(jìn)角膜迅速愈合[42-43]。早期報(bào)道稱(chēng)馬胎衣羊膜用于犬角膜全層異種移植時(shí)引起顯著肉芽組織增生和植片不透光，但可作為結(jié)構(gòu)性移植物修補(bǔ)犬全層角膜缺損，推薦在外周角膜病變時(shí)使用[44]。近年來(lái)的臨床研究表明，使用人、牛來(lái)源的冷凍保存羊膜治療犬復(fù)雜性角膜潰瘍(后彈力層膨出、角膜溶解、角膜穿孔等)取得了高度滿(mǎn)意的視力和美觀(guān)效果[45]。

此外，其他組織來(lái)源的膜狀結(jié)構(gòu)也用于獸醫(yī)眼表移植中，有報(bào)道使用牛心包膜治療犬深度溶解性角膜潰瘍和貓壞死性角膜炎，83%的植片與角膜融合，但產(chǎn)生局灶性角膜瘢痕[46]。在使用甘油保存的馬腎包膜對(duì)犬角膜進(jìn)行板層移植手術(shù)中，植片術(shù)后的中、后期出現(xiàn)了水腫、血管浸潤(rùn)和炎性滲出，但最終逐漸消退，提示其可作為犬角膜板層病變移植手術(shù)的替代組織[47]。也有報(bào)道將保存的同源性腹膜用于移植來(lái)治療先天性鞏膜葡萄腫，最終減少了眼球斜視程度和葡萄腫大小，改善了眼睛外觀(guān)[48]。此外，自身大腿皮下筋膜也曾用于眼表移植來(lái)治療犬角鞏膜緣處的鞏膜破裂，術(shù)后植片與組織良好融合且未見(jiàn)明顯炎性反應(yīng)，最終動(dòng)物保留了美觀(guān)、舒適且具有功能的眼球[49]。對(duì)于涉及到角鞏膜大面積的缺損，為了保留眼球，甚至還可以移植非膜性組織。有報(bào)道曾分別使用自體耳廓軟骨和第三眼瞼T形軟骨聯(lián)合結(jié)膜瓣對(duì)犬和貓的眼表黑色素瘤進(jìn)行了穿透性眼表移植術(shù)，術(shù)后未見(jiàn)任何排斥反應(yīng)，成功修復(fù)了眼球壁和角膜缺損，動(dòng)物長(zhǎng)期保持視力。該方法可減少傳染性病原體(皰疹病毒)的醫(yī)源性傳播，對(duì)于角膜鞏膜大面積損傷可能是一種值得考慮的手術(shù)方法[50-51]。

脫細(xì)胞工藝處理的修補(bǔ)材料多年來(lái)廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)眼科臨床中。通過(guò)理化和酶處理過(guò)程可獲得各種黏膜的脫細(xì)胞膠原生物支架[52-53]，該類(lèi)產(chǎn)品對(duì)細(xì)菌敏感性低、抑制金屬蛋白酶活性并具有低抗原性[54-56]。Lewin[57]于1999年首次報(bào)道將豬小腸黏膜下層用于治療犬角鞏膜全層缺損。目前成熟商業(yè)推廣并應(yīng)用的材料主要包括豬小腸黏膜下層(SIS)、豬膀胱基質(zhì)(UBM)和豬膀胱黏膜下層(ACell)。SIS制品可應(yīng)用于各種病因?qū)е碌膭?dòng)物角膜、鞏膜缺損甚至穿孔[58-59]。盡管植片厚度單一，但可通過(guò)疊加多層移植物的方式來(lái)填充不同深度的缺損。術(shù)后可維持角膜形態(tài)，但可能會(huì)遺留部分疤痕或黑色素沉積，是傳統(tǒng)結(jié)膜移植的較好替代品[60]。同樣，也有臨床報(bào)道在馬屬動(dòng)物中使用UBM治療感染性角膜溶解，術(shù)后94%的術(shù)眼具備視力，但均發(fā)生角膜炎，建議該產(chǎn)品也可作為馬屬動(dòng)物眼表移植的替代品，具有商業(yè)可用和便于儲(chǔ)存的優(yōu)點(diǎn)[61]。在一項(xiàng)使用豬膀胱黏膜下層對(duì)犬、貓進(jìn)行角膜移植的大型回顧性研究中，72%的術(shù)眼具有輕微和中度的瘢痕，23%的植片出現(xiàn)脫落，6%的術(shù)眼出現(xiàn)眼球癆、青光眼等并發(fā)癥。該移植物同樣也是角膜移植的一種替代產(chǎn)品，在貓中瘢痕較小，但移植物裂開(kāi)率較傳統(tǒng)技術(shù)更高[62]。此外，對(duì)于嚴(yán)重角膜損傷或角膜穿孔的病例，結(jié)膜瓣聯(lián)合脫細(xì)胞生物補(bǔ)片可增強(qiáng)角膜穩(wěn)定性，進(jìn)而提升治療效果。據(jù)報(bào)道，豬小腸黏膜下層與結(jié)膜瓣遮蓋術(shù)聯(lián)合治療犬、貓和馬的角膜全層創(chuàng)傷中，93%的病例獲得了積極的視覺(jué)效果[63]。

3 眼表移植術(shù)與植片材料的進(jìn)展與展望

經(jīng)過(guò)數(shù)十年的研究與臨床應(yīng)用，盡管有多種眼表移植技術(shù)以及材料可供獸醫(yī)眼科臨床選擇，但為了盡可能地以最精準(zhǔn)的治療手段達(dá)到最佳的角膜組織兼容性和光學(xué)效果，獸醫(yī)眼科學(xué)領(lǐng)域始終在不斷探索與研究眼表移植術(shù)式與植片材料。

3.1 角膜內(nèi)皮移植技術(shù)

角膜內(nèi)皮細(xì)胞擔(dān)負(fù)著為角膜持續(xù)脫水的重要生理作用，但其極為有限的有絲分裂能力導(dǎo)致無(wú)法實(shí)現(xiàn)有效的細(xì)胞再生。內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙所導(dǎo)致的角膜疾病在獸醫(yī)眼科臨床中較為常見(jiàn)，細(xì)胞失代償而出現(xiàn)的脫水功能下降可導(dǎo)致動(dòng)物角膜出現(xiàn)不可逆的高度水腫，嚴(yán)重影響視力，并易出現(xiàn)大皰性角膜炎、角膜穿孔等并發(fā)癥。手術(shù)移植目前仍是最為有效的治療手段。傳統(tǒng)全層角膜置換盡管可提供健康的角膜內(nèi)皮細(xì)胞，但并非針對(duì)病灶進(jìn)行精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)治療，且對(duì)整個(gè)角膜組織損傷較大，增加了術(shù)后免疫排斥的風(fēng)險(xiǎn)，因此，角膜內(nèi)皮移植是最佳的針對(duì)性治療手段。盡管該技術(shù)在人類(lèi)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用已經(jīng)較為成熟，但由于經(jīng)驗(yàn)技術(shù)以及設(shè)備需求等因素，角膜內(nèi)皮移植術(shù)在獸醫(yī)眼科中仍處于摸索階段。Brooks等[64]曾對(duì)66匹馬進(jìn)行了深板層內(nèi)皮移植術(shù)(deep lamellar endothelial keratoplasty，DELK)，其中89.4%的馬匹獲得了有效視力。Armour等[65]對(duì)一例患有角膜內(nèi)皮營(yíng)養(yǎng)不良的10歲波士頓梗進(jìn)行了更為精準(zhǔn)的受體角膜后彈力層撕除-角膜內(nèi)皮細(xì)胞移植術(shù)(descemet’s-stripping endothelial keratoplasty，DSEK)，術(shù)后一年移植區(qū)域與植床邊緣均保持透明。角膜內(nèi)皮移植技術(shù)的日趨成熟將為獸醫(yī)眼表移植學(xué)提供更多的治療選擇與更廣闊的前景。

3.2 新型組織工程角膜

一直以來(lái)，天然角膜供體的匱乏始終是眼表移植手術(shù)中存在的困擾。人眼科學(xué)和獸醫(yī)眼科學(xué)領(lǐng)域始終在不遺余力地研究與開(kāi)發(fā)最接近天然角膜的完美替代品[66]。其中角膜基質(zhì)層所占厚度比例最高，同時(shí)臨床適應(yīng)癥相對(duì)較多且更容易研究與開(kāi)發(fā)，故針對(duì)異種角膜的基質(zhì)脫細(xì)胞材料是目前研究最多也為最成熟的組織工程角膜材料。我國(guó)自主研發(fā)的新型組織工程角膜(BioCorneaVetTM)已經(jīng)用于獸醫(yī)眼科臨床中。該材料同樣是基于細(xì)胞支架的原理，通過(guò)病毒滅活、脫細(xì)胞和滅菌等手段獲得豬角膜細(xì)胞外膠原基質(zhì)[67]。具備可長(zhǎng)期儲(chǔ)存、使用方便以及隨意切割等優(yōu)點(diǎn)。適應(yīng)癥包括各種病因?qū)е碌慕悄せ|(zhì)層不同深度的缺損；在全層角膜損傷中，也可作為塑形支架用于構(gòu)建角膜形態(tài)。近年來(lái)，組織工程角膜用于板層移植治療犬高危角膜損傷病例取得了理想效果，術(shù)后5個(gè)月植片恢復(fù)透明，未見(jiàn)免疫排斥和炎性反應(yīng)[68]；在對(duì)兔的板層角膜移植中，組織工程角膜同樣顯示出了良好的組織相容性，術(shù)后32周恢復(fù)了正常的角膜組織結(jié)構(gòu)，且受體角膜完全透明[69]。前期臨床結(jié)果顯示出了其強(qiáng)大的角膜修復(fù)能力和光學(xué)效果，相信隨著更為深入的研究與多物種、大量臨床病例的效果觀(guān)察，組織工程角膜有望成為獸醫(yī)眼科臨床中最具前景的移植材料。

3.3 角膜移植術(shù)中光學(xué)相干斷層掃描與飛秒激光

在現(xiàn)代眼科學(xué)中，涌現(xiàn)了各種進(jìn)步的技術(shù)用于輔助提升眼表移植的療效，其中最為重要的手段為術(shù)中光學(xué)相干斷層掃描(iOCT)和飛秒激光。

iOCT可提供受體與供體角膜組織精確的厚度數(shù)據(jù)，并在術(shù)中給予切割引導(dǎo)，實(shí)時(shí)識(shí)別薄弱的角膜區(qū)域，保證最大限度地安全切割深度以避免角膜穿透，在各種非全層角膜移植的手術(shù)中極為有用。同時(shí)，通過(guò)iOCT可輕易發(fā)現(xiàn)植片輕微剝離、錯(cuò)位以及界面碎片等顯微鏡下易忽略的細(xì)節(jié)[70]。飛秒激光可輔助板層角膜移植術(shù)(FALK)，以及穿透性角膜移植。不同于人工鉆取，飛秒激光可制備不同形狀且完美匹配的植片與植床，這將盡可能減少角膜損傷、有利于傷口愈合以及減少術(shù)后散光。

上述移植技術(shù)與手段已經(jīng)較為成熟地應(yīng)用于人類(lèi)眼表移植學(xué)中，但由于成本因素，目前還未在獸醫(yī)眼科臨床中廣泛推廣，相信隨著行業(yè)的不斷發(fā)展，在不久將會(huì)逐步運(yùn)用于獸醫(yī)眼科學(xué)中。

4 小 結(jié)

雖然獸醫(yī)眼科學(xué)一個(gè)世紀(jì)以來(lái)取得了一定的發(fā)展，但相關(guān)眼表移植手術(shù)方法和移植材料仍需不斷總結(jié)和探索。隨著高新技術(shù)的不斷開(kāi)發(fā)以及生物組織工程學(xué)、再生醫(yī)學(xué)的整合，將會(huì)進(jìn)一步研發(fā)出更先進(jìn)、更穩(wěn)定的眼表移植技術(shù)與材料。這將為獸醫(yī)眼科學(xué)的發(fā)展、比較醫(yī)學(xué)的進(jìn)步起到極大的推動(dòng)作用。