溫度及種子含水量對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵發(fā)育的影響

肖瑞迪，張智英*，李 維，楊 柳，陳小蘭，

趙倩倩1，周廷予1，蘇文華1

(1. 云南大學(xué)生態(tài)學(xué)與環(huán)境學(xué)院，昆明 650500；2. 云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，昆明 650500)

植食性昆蟲與植物的相互關(guān)系，不僅表現(xiàn)在成蟲及幼蟲取食階段，還反映在成蟲產(chǎn)卵及卵發(fā)育時(shí)期。產(chǎn)卵是昆蟲維持種群，繁衍后代的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，它關(guān)系到后代的發(fā)育和存活。大多數(shù)植食性昆蟲選擇在寄主的表面產(chǎn)卵(Hilker and Meiners, 2011)，少數(shù)產(chǎn)卵于植物組織中(李永福等，2015)。在長(zhǎng)期的相互作用共同進(jìn)化中，植物對(duì)產(chǎn)卵于體表的昆蟲演化出一系列防御特性，如形成刺、毛及次生代謝物質(zhì)等，阻礙昆蟲產(chǎn)卵(Shapiro，1981；吳文偉等，2002；常金華等，2004；唐宇翀等，2010)；著卵部位形成腫瘤或產(chǎn)卵部位周圍葉片組織壞死，造成卵脫落(Berdnikovetal., 1992；Dossetal., 2000)。而針對(duì)植物對(duì)產(chǎn)于組織內(nèi)的卵產(chǎn)生的防御反應(yīng)報(bào)道較少(崔麗婷，2017)。

象甲屬鞘翅目Coleoptera象甲總科Curculionoidea，為植食性昆蟲。大部分種類的象甲產(chǎn)卵時(shí)用喙在產(chǎn)卵部位鉆孔，再利用喙將卵送入植物組織中，其被認(rèn)為是成功進(jìn)化的一項(xiàng)關(guān)鍵創(chuàng)新(Anderson,1995；Oberprieleretal., 2007)。將卵產(chǎn)于寄主組織內(nèi)有助于初孵幼蟲獲取食物，躲避天敵侵害，減少降雨、風(fēng)吹、日曬等氣候因子的影響，從而提高卵的存活率(Hilker and Meiners, 2011)。在進(jìn)行剪枝櫟實(shí)象Mechorisursulu(鞘翅目：卷葉象甲科)雌蟲產(chǎn)卵前后剪斷產(chǎn)卵果枝的獨(dú)特產(chǎn)卵行為研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，如果由于阻止雌蟲的剪枝行為，卵直接產(chǎn)在活的殼斗科Fagaceae寄主植物種子中，則因產(chǎn)卵損傷寄主植物種子的組織，誘導(dǎo)了寄主的防御反應(yīng)。最明顯的表現(xiàn)就是在卵室部位形成愈傷組織(圖1)，使大部分的卵被擠壓致死。而與剪枝櫟實(shí)象同寄主且同樣危害種子的象甲科Curculionidae青岡象Curculiomegadens，雌蟲產(chǎn)卵時(shí)沒有剪枝行為，可直接將卵產(chǎn)于活的寄主種子中。為了弄清青岡象能在活的寄主植物中產(chǎn)卵的機(jī)制，了解它是如何避免寄主植物愈傷組織對(duì)卵的影響，有必要對(duì)這兩個(gè)生態(tài)位相近的象甲進(jìn)行生物生態(tài)學(xué)等特性的比較研究。前期研究發(fā)現(xiàn)，剪枝櫟實(shí)象產(chǎn)卵于寄主植物內(nèi)是誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生防御的關(guān)鍵，而在植物與昆蟲卵的相互作用中，卵歷期的長(zhǎng)短及寄主形成愈傷組織的動(dòng)態(tài)決定著卵的存活情況，而卵發(fā)育歷期及存活率通常受溫度、濕度及寄主含水量的影響。因此，摸清兩種象甲卵生長(zhǎng)發(fā)育與溫度等因子的關(guān)系，對(duì)進(jìn)一步分析寄主愈傷組織對(duì)卵的致死效應(yīng)及青岡象如何避免寄主植物愈傷組織對(duì)卵的影響均有重要的理論意義。此外，由于兩種象甲均是危害許多種殼斗科植物種子的重要害蟲，摸清生態(tài)因子對(duì)兩種象甲各蟲態(tài)的影響，均可為有效防治其危害提供科學(xué)依據(jù)。

圖1 剪枝櫟實(shí)象雌蟲剪枝后在錐連櫟堅(jiān)果上自然產(chǎn)卵(上)與人為阻止剪枝后產(chǎn)卵(下)5 d后卵室對(duì)比情況，顯示被人為阻止剪枝后的堅(jiān)果中卵室(下)被愈傷組織所填滿Fig.1 The egg chamber (no callus, above)in a acorn of Quercus franchetii 5 days after female of Mechoris ursulus cut off fruit branch in natural oviposition was compared to one (filled callus, below)in same 5 days after the female was artificially prevented from cutting off fruit branch in oviposition

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

昆明植物園地處東經(jīng)102°41′，北緯25°1′，海拔1 980 m，屬于中亞熱帶內(nèi)陸高原氣候，干濕季節(jié)分明，冬春季低溫干燥，晴朗少雨，日照充足，春季多風(fēng)；夏季高溫多濕，雨量集中。年平均溫度14.7℃，年平均降雨量為1 006.5 mm，平均相對(duì)濕度為73%。土壤為典型的酸性紅壤，pH 5.59，有機(jī)質(zhì)含量低(龔洵等，2003)。昆明植物園現(xiàn)有植物近4 000種，設(shè)有10個(gè)專類植物區(qū)，其中的殼斗科植物區(qū)，種植有錐連櫟Quercusfranchetii、麻櫟Q.acutissma、槲櫟Q.aliena、柞櫟Q.mongolica和滇青岡Cyclobalanopsisglaucoides等眾多殼斗科植物。

1.2 供試蟲源

由于野外無法判斷青岡象是否產(chǎn)卵，本試驗(yàn)采取室內(nèi)飼養(yǎng)的方法獲取青岡象當(dāng)天所產(chǎn)的卵。剪枝櫟實(shí)象由于產(chǎn)卵前期長(zhǎng)達(dá)2-3月，室內(nèi)飼養(yǎng)獲取大量當(dāng)天產(chǎn)的卵較難，而野外由于成蟲產(chǎn)卵前后具有剪斷產(chǎn)卵果枝的行為，便于識(shí)別。因此，實(shí)驗(yàn)所用的卵均為野外采集。青岡象卵采集方法：在昆明植物園收集受青岡象為害較嚴(yán)重的堅(jiān)果，分別放入盛有細(xì)泥土的容器中，適時(shí)澆水以保持泥土濕度，用尼龍網(wǎng)罩住容器，待翌年成蟲羽化出土后，將成蟲放入飼養(yǎng)籠內(nèi)，以10%蜂蜜水和清水飼養(yǎng)，待雌蟲開始產(chǎn)卵后，每天放入新鮮的種子供其產(chǎn)卵，當(dāng)天解剖種子，取出卵供實(shí)驗(yàn)用。剪枝櫟實(shí)象卵采集方法：從8月下旬剪枝櫟實(shí)象雌蟲開始一定規(guī)模產(chǎn)卵后，在昆蟲植物園錐連櫟種植區(qū)，每天收集剪枝櫟實(shí)象當(dāng)天產(chǎn)卵掉落地上的果枝，解剖種子，取出卵供實(shí)驗(yàn)用。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1溫度對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵發(fā)育的影響

試驗(yàn)溫度分別設(shè)置為15、20、25、30和35℃，無光照。將青岡象和剪枝櫟實(shí)象當(dāng)日產(chǎn)的卵分別置于裝有濾紙直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，加滅菌水使濾紙相對(duì)含水量保持在50%～60%，每個(gè)培養(yǎng)皿放30粒卵，分別置于不同溫度的培養(yǎng)箱內(nèi)，各處理3個(gè)重復(fù)。每天9 ∶00和16 ∶00觀察2次，并添加適量的水保持濾紙濕度。同時(shí)記錄卵孵化日期和存活情況，統(tǒng)計(jì)不同溫度下兩種象甲卵的發(fā)育歷期、發(fā)育起點(diǎn)溫度、有效積溫及卵的存活率。

1.3.2含水量對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵發(fā)育的影響

剪枝櫟實(shí)象和青岡象的主要寄主植物是殼斗科的柞櫟和錐連櫟。兩種植物堅(jiān)果的含水量明顯不同，前期實(shí)驗(yàn)高溫烘干測(cè)兩種堅(jiān)果的含水量，110.36 g新鮮柞櫟測(cè)得絕對(duì)含水量為49.02 g，130.13 g新鮮錐連櫟測(cè)得絕對(duì)含水量為21.23 g，其寄主的含水量是否會(huì)影響卵的發(fā)育，試驗(yàn)通過設(shè)置不同含水量的濾紙，模擬不同的種子含水量，研究對(duì)兩種象甲卵發(fā)育的影響。試驗(yàn)含水量分別設(shè)置為20%、40%、60%和80%，溫度為25℃，無光照。在直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中分別置入不同含水量的濾紙，然后將當(dāng)日產(chǎn)的青岡象和剪枝櫟實(shí)象卵放于濾紙上，每個(gè)培養(yǎng)皿放30粒卵，置于溫度為25℃的培養(yǎng)箱內(nèi)，各處理3個(gè)重復(fù)。每天觀察記錄卵孵化及存活情況。統(tǒng)計(jì)不同含水量下兩種象甲卵的發(fā)育歷期、發(fā)育起點(diǎn)溫度、有效積溫及卵的存活率。

1.3.3剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵和卵室體積的測(cè)量

實(shí)驗(yàn)樣地收集大量受兩種象甲危害嚴(yán)重的堅(jiān)果，在解剖鏡下解剖受蟲害的堅(jiān)果，然后取出卵和卵室，并在電鏡下測(cè)量卵和卵室的體積，各處理30個(gè)重復(fù)。按照公式計(jì)算：體積V1=4/3*πr3(r為半徑)或體積V1=4/3*πabh(a為長(zhǎng)，b為寬，h為高)。統(tǒng)計(jì)和比較兩種象甲卵和卵室的差異，并從兩種象甲卵和卵室的形態(tài)特征分析其適應(yīng)和進(jìn)化的意義。

1.4 數(shù)據(jù)處理

加權(quán)平均法求出各剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育歷期(N=孵化日期-產(chǎn)卵日期)，用發(fā)育歷期的倒數(shù)表示兩蟲卵的發(fā)育速率V，根據(jù)有效積溫法則，采用回歸直線法計(jì)算蟲卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度和有效積溫，其公式如下：

式中，n為試驗(yàn)中溫度處理的組數(shù)；V為發(fā)育速率，N為象甲完成生長(zhǎng)發(fā)育期所需的時(shí)間(d)；T為該期的平均溫度；T'為理論日均溫度，可由T′=C+KV計(jì)算而得；K為有效積溫，Sk為有效積溫的標(biāo)準(zhǔn)誤；C為發(fā)育起點(diǎn)溫度，Sc為發(fā)育起點(diǎn)溫度的標(biāo)準(zhǔn)誤。

采用Excel進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的整理，然后用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析和顯著性檢驗(yàn)。采用單因素方差分析不同溫度和含水量對(duì)卵的發(fā)育歷期的顯著差異性，運(yùn)用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度和種子含水量下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育歷期和發(fā)育速率

溫度對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育歷期有顯著影響(表1)。在15～30℃溫度范圍內(nèi)，兩象甲卵發(fā)育速率隨溫度的升高而明顯加快，發(fā)育歷期縮短。但在35℃時(shí)，剪枝櫟實(shí)象卵發(fā)育歷期延長(zhǎng)，發(fā)育速率減慢，而青岡象卵發(fā)育歷期和發(fā)育速率均為0，其卵無法正常發(fā)育。當(dāng)溫度低于30℃，剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育速率隨溫度降低而延長(zhǎng)發(fā)育歷期，當(dāng)溫度高于30℃，剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育速率隨溫度升高而延長(zhǎng)發(fā)育歷期，甚至卵死亡。30℃為其最適發(fā)育溫度，兩種象甲的卵發(fā)育速率最快，發(fā)育歷期最短。說明溫度過高或過低，對(duì)兩種象甲的卵發(fā)育有抑制作用；當(dāng)溫度適宜時(shí)，對(duì)兩種象甲的卵發(fā)育有促進(jìn)作用。兩種象甲在相同溫度下，發(fā)育速率和發(fā)育歷期不同。除了20℃外，相同溫度下剪枝櫟實(shí)象的卵發(fā)育速率大于青岡象的卵發(fā)育速率，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期短于青岡象卵的發(fā)育歷期。

表1 不同溫度下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育歷期和發(fā)育速率

根據(jù)表1中不同溫度下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育速率，可求出發(fā)育速率V和溫度T之間的線性回歸方程：剪枝櫟實(shí)象的卵V=0.008T-0.052，r=0.957；青岡象的卵V=0.0056T-0.06，r=0.967。在適宜的溫度條件下，剪枝櫟實(shí)象和青岡象的發(fā)育速率和溫度之間呈顯著正相關(guān)(表2)。

表2 剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育速率與溫度的回歸方程

不同含水量處理對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育歷期無顯著差異(表3)。在含水量為20%～40%內(nèi)，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期隨含水量的增大而縮短，發(fā)育速率增大；在含水量為40%～80%內(nèi)，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期隨含水量的增大而延長(zhǎng)，發(fā)育速率減小。當(dāng)含水量為40%時(shí)，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期最短，發(fā)育速率最快，故40%為其卵最適發(fā)育的種子含水量。

表3 模擬不同含水量下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育歷期和發(fā)育速率

在含水量為40%～60%內(nèi)，青岡象卵的發(fā)育歷期隨含水量增大而延長(zhǎng)，發(fā)育速率減慢。在含水量為60%～80%時(shí)，青岡象卵的發(fā)育歷期隨含水量增大而縮短，發(fā)育速率加快。在含水量為20%時(shí)，青岡象卵的發(fā)育歷期最短，發(fā)育速率最快，故20%為其卵最適發(fā)育的種子含水量。在相同含水量時(shí)，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期均長(zhǎng)于青岡象卵的發(fā)育歷期，其卵發(fā)育速率均小于青岡象卵的發(fā)育速率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，含水量過高或過低，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期延長(zhǎng)，發(fā)育速率減慢，而青岡象卵的發(fā)育隨含水量的降低歷期縮短，發(fā)育速率加快。

2.2 剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度和有效積溫

根據(jù)有效積溫法則，可算出剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度和有效積溫(表4)。剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度是7.41±0.09℃，有效積溫是119.33±20.25日·度。青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度是3.83±0.08℃，有效積溫是154.45±26.93日·度。剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度大于青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度，青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度較低，說明其對(duì)溫度的適應(yīng)能力強(qiáng)。剪枝櫟實(shí)象卵的有效積溫小于青岡象卵的有效積溫。根據(jù)發(fā)育起點(diǎn)溫度和有效積溫，可建立發(fā)育歷期預(yù)測(cè)式N=K/(T-C)。

表4 剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度和有效積溫

2.3 不同溫度和種子不同含水量下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率

溫度對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率有顯著影響(表5)。在15～25℃時(shí)，隨著溫度的上升，剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率逐漸增大；溫度為25℃時(shí)，剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率最高。在30～35℃時(shí)，隨著溫度的上升，剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率逐漸減小。35℃時(shí)，青岡象的卵無法正常發(fā)育，其存活率為0，說明青岡象的卵在35℃下不能孵化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，溫度過高或過低，對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的生長(zhǎng)和發(fā)育有抑制作用，在相同溫度下，剪枝櫟實(shí)象卵的存活率高于青岡象卵的存活率。

表5 不同溫度下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率

模擬種子不同含水量對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率無顯著影響(表6)。在含水量20%～80%，剪枝櫟實(shí)象卵的存活率分別為63.33%，62.67%，71.59%，90.93%。結(jié)果顯示除含水量40%外，剪枝櫟實(shí)象卵的存活率隨含水量增大而增大。在含水量為80%時(shí)，剪枝櫟實(shí)象卵的存活率高達(dá)90.93%。說明寄主含水量較高，有利于剪枝櫟實(shí)象卵的存活。在含水量20%～80%，青岡象卵的存活率分別為22.18%，22.32%，16.37%，29.13%。結(jié)果顯示在含水量為20%～40%時(shí)，青岡象卵的存活率相近。在含水量為60%～80%時(shí)，隨含水量增大，青岡象卵的存活率逐漸增大。說明寄主含水量較高，有助于提高青岡象卵的存活率。在相同含水量下，剪枝櫟實(shí)象卵的存活率均大于青岡象卵的存活率。在含水量為80%時(shí)，剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率達(dá)到最大。說明寄主含水量越高，越有利于提高剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率。

表6 模擬不同含水量下剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的存活率

2.4 剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵和卵室體積

在電鏡下測(cè)得剪枝櫟實(shí)象和青岡象的卵和卵室大小有顯著差異(表7)。30粒剪枝櫟實(shí)象卵的平均體積為0.2368 mm3，范圍為0.0704～0.9502 mm3；30粒青岡象卵的平均體積為0.0836 mm3，范圍為0.0454 ～0.2439 mm3。30粒剪枝櫟實(shí)象卵室的平均體積為3.9589 mm3，范圍為0.6770 ～9.4118 mm3；30粒青岡象卵室的平均體積為0.4650 mm3，范圍為0.0633～1.6268 mm3。結(jié)果說明青岡象卵和卵室明顯小于剪枝櫟實(shí)象卵和卵室。

表7 剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵和卵室的測(cè)量

3 結(jié)論與討論

溫度是昆蟲生長(zhǎng)發(fā)育的重要影響因素，對(duì)其研究的應(yīng)用主要涉及對(duì)昆蟲種群消長(zhǎng)的評(píng)估，利用有效積溫法則預(yù)測(cè)昆蟲在某一地區(qū)的發(fā)生代數(shù)及其在地理上的分布界限等(沈建平等，2003；雷仲仁等，2007；何莉梅等，2019)。本文通過研究溫度等因子對(duì)剪枝櫟實(shí)象及青岡象卵生長(zhǎng)發(fā)育的影響，為進(jìn)一步探討植物與產(chǎn)卵在其組織內(nèi)的昆蟲相互作用及昆蟲的適應(yīng)進(jìn)化奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果顯示剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育和存活均受溫度的顯著影響。兩種象甲卵的發(fā)育速率與溫度呈顯著正相關(guān)。在15～30℃的溫度范圍內(nèi)，卵的發(fā)育歷期隨溫度的升高而縮短，發(fā)育速率加快。30℃時(shí)卵的發(fā)育歷期最短。35℃時(shí)剪枝櫟實(shí)象發(fā)育速率減慢，歷期延長(zhǎng)，而青岡象的卵則不能完成生長(zhǎng)發(fā)育。在相同溫度下，青岡象卵的發(fā)育歷期比剪枝櫟實(shí)象長(zhǎng)。由此可見，青岡象并不是通過縮短卵期來避免寄主愈傷組織對(duì)卵的防御。

人為阻止剪枝櫟實(shí)象剪枝行為后，寄主錐連櫟形成愈傷組織充滿卵室并致卵死亡，該過程通常需要5 d，而剪枝櫟實(shí)象在昆明的產(chǎn)卵期為8-10月，期間室內(nèi)變溫情況下，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育歷期約7 d，與本研究恒溫25℃處理較為一致。因此，寄主形成的愈傷組織明顯快于卵的發(fā)育，這是愈傷組織能對(duì)卵形成較高致死率的原因之一。野外人為阻止剪枝櫟實(shí)象雌蟲剪枝行為后，產(chǎn)在活的寄主種子中的卵，死亡率為82.1%(n=28),而孵化出幼蟲的卵通常是卵室中種子形成的愈傷組織較少或沒有，原因可能是種子損傷后個(gè)體間形成愈傷組織的能力存在差異。

本實(shí)驗(yàn)在室內(nèi)恒溫條件下，剪枝櫟實(shí)象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度為7.41±0.09℃，卵的有效積溫為119.33±20.25日·度；青岡象卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度為3.83±0.08℃，卵的有效積溫為154.45±26.93日·度。室內(nèi)變溫條件下，歐洲栗象C.elephas卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度為6.5℃，卵的有效積溫為108.9日·度(Manel and Debouzie，1995)；豆象科的豌豆象Bruchuspisorum卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度為11.76±0.71℃，卵的有效積溫為74.0±6.89日·度(謝成君，2003)；蠶豆象B.rufimanus卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度為11.45℃，卵的有效積溫為79.68日·度(鄭興國(guó)等，1991)。對(duì)比這兩類親緣關(guān)系較近的昆蟲，象甲總科的這3種昆蟲卵的發(fā)育起點(diǎn)溫度比葉甲總科的這兩種昆蟲要低，而卵發(fā)育所需的有效積溫卻更多。而從溫度對(duì)兩種象甲卵的發(fā)育影響可以看出，剪枝櫟實(shí)象卵發(fā)育適宜的溫度范圍比青岡象廣，特別對(duì)高溫的適應(yīng)能力更強(qiáng)，這從剪枝櫟實(shí)象分布區(qū)比青岡象廣得以佐證。青岡象是滇中地區(qū)特有種，而夏季的云南中部地區(qū)氣溫不高，與剪枝櫟實(shí)象相比，青岡象更適應(yīng)夏季溫度相對(duì)較低的地區(qū)。因此，愈傷組織致卵死亡的情況是否存在地區(qū)間差異，或者愈傷組織形成快的地區(qū)，卵的歷期也較短，這些需進(jìn)一步的研究才能摸清寄主愈傷組織與卵的相互關(guān)系。

從模擬種子含水量對(duì)剪枝櫟實(shí)象和青岡象卵的發(fā)育看，種子不同的含水量對(duì)兩象甲的卵歷期無顯著影響。但不同含水量的種子對(duì)愈傷組織的形成是否有影響有待進(jìn)一步研究。如果愈傷組織受含水量影響，那么在卵歷期不變的情況下，愈傷組織生長(zhǎng)越快，可能對(duì)卵的致死能力就越強(qiáng)。

青岡象在含水量實(shí)驗(yàn)中卵的存活率比溫度實(shí)驗(yàn)的結(jié)果低，發(fā)育歷期也縮短。這可能是因?yàn)榍鄬蟮穆咽抢檬覂?nèi)飼養(yǎng)的種群進(jìn)行，而該實(shí)驗(yàn)是在雌蟲產(chǎn)卵后期進(jìn)行，雌蟲后期所產(chǎn)的卵可能生活力降低。而剪枝櫟實(shí)象是野外種群，實(shí)驗(yàn)所用的卵來自不同的種群，卵的活力未受到影響。

在相同的溫度和含水量下，青岡象卵的存活率明顯低于剪枝櫟實(shí)象，這可能與兩者卵及卵室的大小有關(guān)。青岡象開始產(chǎn)卵的時(shí)期比剪枝櫟實(shí)象晚，產(chǎn)卵期寄主果實(shí)更大，然而電鏡測(cè)量結(jié)果顯示青岡象的卵和卵室明顯小于剪枝櫟實(shí)象，這可能是青岡象的一種適應(yīng)進(jìn)化，而青岡象卵的低存活率可能是其進(jìn)化不完善性的表現(xiàn)。此外，本次實(shí)驗(yàn)中將青岡象的卵從卵室中取出培養(yǎng)，卵周圍沒有了寄主組織的包圍，也可能是導(dǎo)致青岡象卵存活率降低的原因之一。當(dāng)青岡象的卵連同卵室周圍的組織一起置于培養(yǎng)皿中觀察時(shí)，又因?qū)嶒?yàn)材料發(fā)霉而沒有得到最終結(jié)果。故青岡象卵存活率低的原因還有待進(jìn)一步探究。

除象甲外，鞘翅目天?？?、雙翅目實(shí)蠅科等昆蟲也將卵產(chǎn)于植物組織中，這些昆蟲各自有一些自身的產(chǎn)卵特性(李煥存，2000；胡隴生等，2012；李永福等，2015)，但它們是如何避免產(chǎn)卵引起的寄主防御反應(yīng)也待進(jìn)一步研究。

致謝：本研究野外調(diào)查取樣得到中國(guó)科學(xué)院昆明植物園的大力支持，特此致謝！