難溶性成分口服吸收促進技術在中藥復方中的應用進展

王艷華，張繼芬

（西南大學藥學院，重慶 400716）

口服給藥是中藥傳統(tǒng)的、臨床最常用的方式，其吸收效果受溶解性、滲透性、胃腸道及肝臟的降解等諸多因素影響，其中低溶解度導致的低生物利用度是許多中藥有效成分面臨的難題，雖然固體分散體、包合物、脂質載體可改善這類成分的溶出，提高生物利用度［1-2]，但它們在中藥領域的應用大多集中于單體［3-5]。眾所周知，中醫(yī)藥特色為將多味藥按辨證論治的需求配伍組成方劑，多成分共同作用來發(fā)揮多途徑、多靶點的綜合療效，單一成分往往難以實現(xiàn)方劑的整體療效。因此，研究如何將這些難溶性成分的口服吸收促進技術運用于中藥復方更具有臨床意義。

不同于結構、性質明確，純度很高的單體，中藥復方藥效成分眾多，性質復雜，各有效成分的理化性質也可能存在很大差異。此外，它還含有大量雜質，有效成分含量低，這些都給制劑新技術的應用帶來巨大挑戰(zhàn)。

本文以提高中藥復方中難溶性成分的口服吸收為立足點，綜述了近年來可提高難溶性成分口服吸收的各類制劑技術在中藥復方中的應用，探討現(xiàn)有研究中存在的問題、困難和發(fā)展方向，以期為相關新制劑的開發(fā)提供參考。

1 現(xiàn)有研究

早期報道的提高難溶性成分口服吸收的制劑技術主要有固體分散體、包合物、脂質載體、微乳與自微乳、納米混懸液、聚合物納米粒、聚合物膠束等，近年來還出現(xiàn)了Pickering 乳液、共晶、樹狀大分子、立方液晶等新技術，其機制［6-9]主要有①直接提高難溶性藥物的溶解度，改善溶出，如固體分散體、包合物等；②生物相容性好，可提高藥物滲透性，如脂質體、磷脂復合物等；③粒徑小，分散度大，對胃腸道黏膜具有一定的黏附性，進而延長藥物在胃腸道內的滯留時間，如微乳、納米混懸液、聚合物納米粒；④所含脂質、表面活性劑等輔料與消化道中的膽鹽作用，形成膠束或混合膠束，提高溶解度，并增加藥物與小腸上皮細胞的接觸，如微乳、固體脂質納米粒；⑤增強腸道淋巴轉運，如脂質體、微乳、自微乳。目前，這些技術在中藥領域的應用主要集中于單體，其次是單味藥有效部位，如布渣葉總黃酮固體分散體［10]、石菖蒲揮發(fā)油包合物［11]、刺五加葉總黃酮脂質體［12]、虎杖總蒽醌固體脂質納米粒［13]、山楂葉總黃酮磷脂復合物［14]、玳玳果總黃酮自微乳［15]、葛根總黃酮納米混懸液［16]、三七總皂苷長循環(huán)納米粒［17]等。

相對于單味藥有效部位，中藥復方的物質體系更復雜，它含有不少大分子雜質，有效成分種類多、含量低（往往不足10%），性質差異大，既有水難溶性成分，又有水溶性成分，而且其酸堿性、溶解性、油水分配系數(shù)等還可能存在很大差異。因此，各制劑新技術在中藥復方中的應用更少，僅有固體分散技術、包合技術、微乳/自微乳、磷脂復合物、固體脂質體納米粒的少量報道。

1.1 固體分散技術 腦得生由三七、紅花、川芎、葛根、山楂5 味藥材組成，臨床主要用于缺血性腦血管疾病的預防及治療。羅蘭等［18]將方中藥材用70%乙醇提取后，經大孔吸附樹脂純化，制得總有效部位群（總皂苷、總黃酮質量分數(shù)分別為7.9%、8.4%），再以聚乙二醇PEG6000 為載體，采用熔融法制得了固體分散體，發(fā)現(xiàn)10 min 時總黃酮溶出率達100%。但該研究僅以總黃酮為指標，忽略了腦得生中三七皂苷類有效成分。

目前，基于復方總提取物的固體分散體尚未見報道，但已有不少單味藥材總提取物固體分散體的研究。王瀟等［19]以PEG6000-F68（0.9∶1）為載體，采用溶劑法將厚樸70%乙醇提取物制成固體分散體，厚樸酚、和厚樸酚總溶出率從不足20%提高至97.12%?；魸凉龋?0]將雷公藤用95%乙醇回流提取后過硅膠柱純化，以三氯甲烷-甲醇（90∶1）洗脫物為原料，PEG6000-F68（2∶1）為載體，采用溶劑-熔融法制備固體分散體，發(fā)現(xiàn)它與原料藥相比，在60 min 內雷公藤內酯酮、雷公藤甲素、雷公藤次堿溶出度提高了2～3 倍，雷公藤紅素、雷公藤內酯甲的溶出率更是從原料藥的低于檢測限顯著提高至80%以上；大鼠腸吸收動力學顯示，固體分散體中5 種成分吸收速率常數(shù)顯著增大，但僅有雷公藤紅素表觀滲透系數(shù)升高，提示該固體分散體提高難溶性成分口服吸收的機制主要是改善溶出而非腸滲透性［21]。而且，對虎杖提取物［22]、布渣葉提取物［23]也制備了固體分散體，可顯著提高指標成分的體外溶出。

此外，已上市的滴丸劑，如藿香正氣滴丸、復方丹參滴丸等也正是基于固體分散理論而制備的，證實它是適用于中藥復方總提取物的制劑新技術。

1.2 包合技術 包合技術已成功用于中藥復方揮發(fā)油，一方面可提高揮發(fā)油的穩(wěn)定性，另一方面也能提高揮發(fā)油的口服吸收。席駿鉆等［24-25]采用飽和水溶液法，將香附四物湯的揮發(fā)油制成β-環(huán)糊精包合物，發(fā)現(xiàn)灌胃給予SD 大鼠后其主要活性成分洋川芎內酯A、丁基苯酞、藁本內酯、去氫木香內酯、α-香附酮的AUC 分別較揮發(fā)油提高了155.33%、167.14%、195.21%、124.08%、209.52%，可能與提高各成分的滲透性有關，同時跨Caco-2 細胞單層的表觀滲透系數(shù)分別是原揮發(fā)油的2.82、2.34、4.53、1.91、2.81 倍。

除揮發(fā)油外，包合技術在中藥總提取物中也得到應用。龍血竭是一種樹脂類中藥，具有活血散瘀、定痛止血、斂瘡生肌的功效，鐘鳴等［26]采用共沉淀法制備其HP-β-環(huán)糊精包合物，將主要有效成分龍血素B 在120 min 時的累積溶出率從原料藥中的0 提高到88.9%。中藥中難溶性成分大多采用乙醇提取，醇提物的包合工藝雖然可參考揮發(fā)油，但其中的成分性質差別比揮發(fā)油更大，給揮發(fā)油的包合工藝未必適用于醇提液，鄭夢成等［27]也證實了這一點，他們以石菖蒲中主要成分β-細辛醚為指標，將金思維復方中石菖蒲、郁金用95% 乙醇提取后，采用β-環(huán)糊精將其包合，發(fā)現(xiàn)由于醇提液存在一定體積分數(shù)的乙醇，當采用飽和水溶液法、超聲法時大量水會使醇提液中藥物溶解度降低而易被析出，難以進入β-環(huán)糊精籠狀結構中，同時乙醇的存在使包合物在水中溶解度增加，冷藏時不能完全沉淀析出，致使包合物得率較低；球磨法依靠球磨機外力使其進入包合空腔，不必制備飽和溶液，水量可調至較合適范圍，更適合金醇提物包合。劉玲等［28]以穿心蓮內酯包合率為評價指標，采用超聲法制備其85%乙醇提取物的β-CD 包合物，并通過星點設計優(yōu)化制備工藝，發(fā)現(xiàn)模型預測性良好，表明該優(yōu)化方法同樣適用于組分復雜的中藥提取物。

1.3 微乳、自微乳技術 相比于單體，中藥復方具有給藥劑量大、理化性質復雜的特點，這就要求其口服藥物傳遞系統(tǒng)載藥能力高，受藥物性質影響小，適用范圍廣。在各制劑新技術中，微乳可同時包載水溶性、水難溶性成分，同時中藥揮發(fā)油還可充當油相，適合復雜的中藥多組分體系。目前，已有中藥復方總提取物制成微乳的研究，如復方徹清膏微乳［29]、復方甘草湯微乳［30]的經皮給藥，但未見復方總提取物口服微乳的報道。中藥復方由“飲片配伍”向“組分配伍”的發(fā)展，既符合中藥復方的用藥特點，體現(xiàn)中醫(yī)藥整體觀，又滿足現(xiàn)代制劑技術設計需求的第三代中藥制劑——組分中藥制劑，近年來受到越來越多關注，已有不少相關微乳/自微乳制劑被研制出。

交泰丸（黃連、肉桂組成）的鎮(zhèn)靜催眠成分主要是黃連生物堿、肉桂揮發(fā)油，楊麗娟等［31]將黃連總堿（總堿質量分數(shù)79.47%）、肉桂揮發(fā)油（桂皮醛質量分數(shù)＞85%）配伍，先將黃連總堿完全溶于丙二醇，再與熔融的聚氧乙烯醚（40）氫化蓖麻油和辛酸/癸酸甘油三辛癸酸酯混勻，然后加入肉桂油，制備了交泰丸自微乳，它在3 min 內能乳化形成粒徑為（34.12±1.71）nm 的微乳；黃連總堿的大鼠在體腸吸收表觀吸收速率常數(shù)是原料藥的1.5 倍，表明交泰丸自微乳化系統(tǒng)可顯著提高黃連總堿的腸吸收。

丹參是臨床常用活血藥，其藥效成分是以丹參酮類為主的脂溶性成分和以酚酸類為主的水溶性成分。蔣俏麗等［32]將丹參總酮（純度為60%）分別溶于油相及混合表面活性劑，制得飽和溶液，再將兩者混合均勻，而丹參總酚酸（純度為60%）則溶于純化水中。攪拌下將水相逐滴加入混合油相中，制得澄清透明的含丹酚酸的丹參酮微乳。研究表明，水溶性丹酚酸的加入對復合微乳的粒徑及丹參酮ⅡA 的包封率和載藥量無明顯影響，丹酚酸載藥量僅與水相用量有關。楊少林等［33]將腦得生處方中紅花水提液的大孔吸附樹脂純化物、川芎醇提物、三七總皂苷、葛根總黃酮、山楂總黃酮配伍，制備了腦得生口服微乳制劑。大鼠灌胃給藥后，微乳中主要活性成分羥基紅花黃色素A、人參皂苷Rg1、葛根素、川芎嗪的AUC 分別是原料藥的1.24、1.32、1.36、1.72 倍。

1.4 磷脂復合物 目前，單味藥提取物制備磷脂復合物以促進吸收的研究相對較多，鮮有涉及中藥復方。李婧琳等［34]將丹參90%乙醇提取物與大豆磷脂復合，大鼠單向腸灌流實驗證實，磷脂復合物中丹酚酸B、丹參酮ⅡA 吸收速率常數(shù)分別是提取物的2.70、2.29 倍，表觀滲透系數(shù)分別是2.90、2.21 倍。此外，也有天山雪蓮提取物［35]、紅花提取物［36]磷脂復合物的研究報道；國外還有銀杏提取物、人參提取物等數(shù)10 種單味藥提取物的磷脂復合物保健品上市。

王景媛等［37]將由葛根、穿山龍、川芎、蜂膠4 味藥材組成的復方龍脈寧提取物制成磷脂復合物。先將葛根、穿山龍、川芎用70%乙醇回流提取，再用AB-8 大孔吸附樹脂純化，收集80%乙醇洗脫液減壓濃縮，加入除蠟后的蜂膠，混勻，噴霧干燥，制得提取物，將其與磷脂溶于無水乙醇，恒溫攪拌一段時間，實現(xiàn)了提取物與磷脂的分子間結合，復合率為86.72%，低于葛根素單體的100%，這是因為提取物成分復雜，可能含有其他不含羥基的化合物，無法與大豆卵磷脂進行復合；外翻腸囊法結果表明，復方龍脈寧提取物與磷脂復合后葛根素腸吸收量分別較原料藥提高了60%，但并未報道復方總提取物的具體組成，口服吸收效果評價也僅選擇葛根素單一指標。李晶晶等［38]將人參莖葉水提液和紅參麥冬水提醇沉液過AB-8 大孔樹脂純化，分別收集70%、95%乙醇洗脫液，得皂苷類有效成分，兩者合并后與磷脂共溶于乙醇，50 ℃下攪拌1 h 后減壓揮除乙醇，制得了復合率高達97.8%的參麥提取物皂苷類物質磷脂復合物。

1.5 固體脂質納米粒 乳香、沒藥為臨床常用的活血散瘀、消腫止痛對藥，兩者經常配伍使用，可達到氣血兼顧、相互促進的作用，揮發(fā)油是其有效活性成分。施峰等［39]先將乳香、沒藥揮發(fā)油與山崳酸甘油酯共熔，再采用高壓乳勻法制得固體脂質納米粒，由于中藥揮發(fā)油是由幾十種甚至上百種結構不同的單體成分組成，僅采用單一成分作為指標時不能全面客觀第進行質量評價，有可能存在所選指標成分包封良好，而其他成分甚至未被包裹的情況，故又將中藥指紋圖譜引入制劑評價中，通過超濾法分離，發(fā)現(xiàn)超濾管截留部分與原液指紋圖譜的相似度高達0.986 9，表明揮發(fā)油中大多數(shù)成分可被固體脂質納米粒包裹，再結合醋酸辛酯、β-欖香烯2 個指標成分的總包封率，實現(xiàn)了從宏觀到微觀的全方位評價。

陳克玲等［40]采用高剪切乳化超聲法，將更復雜的復方一枝蒿（一枝蒿、板藍根、大青組成）提取物制成固體脂質納米粒，并對其處方和制備工藝進行了優(yōu)化。但該研究未介紹提取物的制備復方、組成、含量，指標成分也僅有一枝蒿酮酸。

1.6 應用特點

1.6.1 藥材多需經提取、純化后方可進行制劑制備 與單體研究中直接以市售高純度化合物為制劑原料不同，復方制劑研究中藥材往往需要先提取、純化、干燥，制得復方提取物，再以其為原料進行制劑工藝、質量等研究，提取以醇提為主，以盡可能提高難溶性成分的提取率；提取液經適當方法純化，以去除雜質，減小浸膏質量，同時提高難溶性成分含量；干燥可去除溶劑，減小溶劑，尤其是乙醇對后續(xù)制劑的影響，這一過程對中藥復方提取物的成分（包括有效物質、雜質）的種類、有效成分的含量、提取物表觀理化性質都有巨大影響，甚至可能影響后續(xù)新技術應用的成敗。不同的制劑技術對提取物有不同的要求，見表1。

表1 難溶性成分口服吸收促進制劑在中藥復方中的應用特點

1.6.2 制劑工藝更復雜 由于復方制劑原料藥組成復雜，性質各異，在制劑成型時往往不能像單體那樣，直接溶于某一輔料或溶劑中。課題組前期在用反溶劑法制備冠心寧復方提取物納米混懸液時發(fā)現(xiàn)，無法完全參照單體的反溶劑工藝制備該納米混懸液，這是因為提取物不能完全溶于乙醇等有機溶劑中。復方制劑在純化時往往就會進行成分分離，故制備過程中需根據各自溶解性選擇合適的溶劑［31-32]，以盡可能提高新制劑對復方中各類成分的載藥能力。

1.6.3 質量評價的指標成分增多 在各載藥系統(tǒng)的評價方面，多數(shù)復方制劑往往選用2～5 個主要藥效成分或總成分（如總皂苷、總黃酮等），體現(xiàn)了其多藥效成分的特點，更有甚者，還將中藥指紋圖譜引入評價系統(tǒng)中［39]，以盡可能實現(xiàn)全面質量控制。

2 不足之處

2.1 研究模式仍照搬單體，沒有體現(xiàn)中藥復方多組分的特點 目前，各制劑技術應用于中藥復方的研究模式都主要參照化藥、中藥單體，沒有真正考慮到中藥復方多組分的特點，也不一定適用于復雜的中藥復方總提取物。以結構表征為例，對于總提取物而言，由于其成分復雜，含量低，雜質的大量存在對總提取物、物理混合物中藥物的熔融峰、結晶衍射峰、結晶形態(tài)等特征信息干擾很大，甚至完全掩蓋了這些信息［16，19，22]，這種情況下DSC、X射線衍射、SEM 等手段就難以正確表征提取物各成分的微觀狀態(tài)。同樣，目前生物利用度研究僅以幾個主要有效成分表征中藥的整體吸收行為也是不妥的，這種評價模式獲得的某一種或幾種成分的生物藥劑學參數(shù)缺乏整體性和系統(tǒng)性，也不能給后續(xù)的臨床給藥方案帶來實質性的指導。

2.2 現(xiàn)有研究重工藝、體外表征與評價，體內行為研究欠缺 二十一世紀藥劑學的發(fā)展已從以“劑型”為中心轉變?yōu)橐浴叭恕睘橹行?，越來越多的關注點集中在這些新制劑進入體內后的命運，如載體及藥物變化、口服吸收行為、機制等。目前，對難溶性中藥口服制劑的研究仍大多集中在制備方法優(yōu)化、理化性質表征、體外溶出度與吸收、體外藥動學，與藥劑學發(fā)展趨勢明顯脫節(jié)。

2.3 復方制劑原料藥的處方前研究薄弱 處方前研究是劑型設計、制劑研發(fā)的基礎，現(xiàn)代中藥制劑大多以藥材提取物為制劑原料，雜質多，有效成分含量低，組成復雜，黏性強，易吸潮，即使是含量較高的有效部位，其理化性質與單體成分也有所差異。雜質大量存在對制劑成型有何影響，提取物中主要藥效物質的表觀理化性質是否改變，這些基礎問題對制劑工藝具有重要意義，但已發(fā)表的文獻幾乎沒有對提取物（復方制劑原料）的理化性質進行研究。

3 發(fā)展方向

各種制劑新技術難以用于多組分的中藥復方，主要原因在于中藥的共性問題，即中藥組分中化學成分復雜，物質基礎不明，理化性質多樣，導致組分整體性質難表征，作用機制不清楚，評價方法也存在局限。因此，中藥復方口服給藥系統(tǒng)具有廣闊的研究空間。

3.1 加強藥效物質基礎研究，明確中藥復方的質量標志物 搞清楚復方的藥效物質基礎是中藥新制劑開發(fā)的基礎，近年來已有網絡藥理學、血清藥物化學、中醫(yī)“征候”代謝組學、基因組學、蛋白質組合等多種先進手段用于相關研究［41]，但其藥效物質基礎復雜，往往有數(shù)十甚至上百個成分起到貢獻，同時以如此多的成分為重點在現(xiàn)階段是難以實現(xiàn)的。因此，科學合理地選擇具有代表性、貢獻度大的藥效成分，使其性質能反映中藥復方的整體特點，是相關口服新制劑研究的又一關鍵。劉昌孝院士提出了“中藥質量標志物”這一概念［42]，可為中藥復方研究過程中篩選重點考查成分提供了新思路。

3.2 開發(fā)適用于中藥復方多組分特點的制劑新技術、新載體 新載體的開發(fā)需適應中藥復方的特點，即載藥量大，能同時兼顧水溶性、難溶性甚至揮發(fā)油，對藥物的結構、酸堿性等理化性質無特殊要求。針對這些特點，課題組前期構建了一種新型乳液，即藥物納米晶自穩(wěn)定Pickering 乳液［43]，該系統(tǒng)中的中藥難溶性成分部分溶于油相，部分以納米晶形式作為固體微粒穩(wěn)定劑吸附于油滴表面，形成固體微粒吸附膜而穩(wěn)定乳滴，中藥揮發(fā)油可充當油相，水溶性藥物則主要溶解于水相。該制劑不僅將復方中各類溶解性成分載入其中，還能提高乳液的載藥能力。

3.3 構建組分中藥的多元口服遞藥系統(tǒng) 鑒于各藥效組分的溶解性、酸堿性、滲透性、化學結構都可能存在很大差異，找到能同時兼容這些差異的新載體不是一蹴而就的事。針對不同藥效組分的性質，采用多元化的制劑技術修飾其性質缺陷，并在中醫(yī)藥理論指導下將各釋藥單元整合，制備由多組分、多單元構成的中藥復方多元口服遞藥系統(tǒng)，既可緩解現(xiàn)有難溶性制劑新技術載藥量低的壓力，又能保持中藥整體觀，從而達到提高生物利用度、增強整體藥效的目的，這也是中藥復方口服制劑發(fā)展的方向之一。

3.4 完善制劑評價體系，突出中藥復方的整體特性 中藥復方質量評價雖已突破單一成分的局限，但數(shù)個有限的指標成分仍不能完全表征復方的整體質量。近年來，已有不少學者對中藥多組分給藥系統(tǒng)的體外釋放評價模式進行了有益探索，提出了“統(tǒng)計矩總量動力學”“總量釋放動力學”“多組分譜特征”等評價模式［44]，但這些評價模式更多的還是停留在理論層面，如何在實踐中用于復方制劑的評價還有待探索。對中藥復方生物利用度的評價除了應注意單一代表性成分的吸收特性外，還應關注體系內各成分吸收特性之間的關系，以及其對復方整體生物療效的影響。

3.5 加強體內行為及機制研究 對中藥復方口服制劑的研究不應僅關注低吸收成分生物利用度的提高、各釋藥系統(tǒng)口服后的體內命運和吸收機制，也要重視體系中各類成分吸收的影響及其規(guī)律。同時，中藥方劑按傳統(tǒng)方式口服時難溶性成分口服吸收很少，而采用新制劑技術后其吸收增加，并且吸收速率、程度存在差異，這種入血成分的整體變化對臨床給藥劑量、療效等方面到底產生多大的影響仍需進行研究，這對中藥多復方口服給藥系統(tǒng)設計，對臨床應用都具有指導意義。

4 結語

中藥制劑的發(fā)展必須從單體研究轉移至成分復雜的復方研究，中醫(yī)用藥應立足于以復方為主。針對復方成分復雜、性質差異大、藥效成分含量低的特點，需考察其口服給藥系統(tǒng)，最終達到改善體系中各成分口服吸收、增強整體療效、減臨床用藥劑量的目的，從而實現(xiàn)對中醫(yī)藥更好的繼承與發(fā)展。