陳大芳,陳光侯,李 平,唐明宗,申金容,曾 金,張?jiān)其?/p>
(貴州省種畜禽種質(zhì)測(cè)定中心,貴州 貴陽(yáng) 550018)
近年來(lái),由于大型規(guī)?;i場(chǎng)在我省的大量興起,豬人工授精技術(shù)在養(yǎng)豬生產(chǎn)中得到廣泛推廣和應(yīng)用。種豬常溫精液產(chǎn)品是開展人工授精技術(shù)的基礎(chǔ),規(guī)范種豬常溫精液的生產(chǎn)保存及檢測(cè)技術(shù),建立建全精液生產(chǎn)、保存、發(fā)放等過(guò)程的質(zhì)量監(jiān)管,才能保證優(yōu)秀種公豬的精液品質(zhì),提高母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù),讓更多的養(yǎng)豬生產(chǎn)者或養(yǎng)殖戶受益,推進(jìn)養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。2020年,貴州省種畜禽種質(zhì)測(cè)定中心首次承接全國(guó)畜牧總站農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管項(xiàng)目“種畜禽質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)工作——《種豬常溫精液》”的監(jiān)督檢查任務(wù),針對(duì)全省9個(gè)地、州、市部分種公豬站及種豬生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的種豬常溫精液進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè),抽檢過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有的場(chǎng)(站)在常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)方面還存在不足。本文按照《豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范》(GB/T 25172—2010)[1]要求及在生產(chǎn)中的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)對(duì)種豬常溫精液產(chǎn)品的生產(chǎn)檢測(cè)及輸配技術(shù)進(jìn)行介紹,供參考。
1.1 公豬選擇原精液是指采集后未經(jīng)稀釋處理的精液,把好原精液的質(zhì)量關(guān)是生產(chǎn)常溫精液的前提,選好種公豬是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)原精液的基礎(chǔ)[2]。選擇生產(chǎn)原精液的公豬要求品種特征明顯,睪丸對(duì)稱且較顯露,包皮不過(guò)長(zhǎng)、不積尿,四肢開張有力,特別是后肢要健壯有力,性欲旺盛(比較騷動(dòng)、陰莖時(shí)常伸出),能爬跨,眼亮有神,膘情適中,這樣的公豬利于調(diào)教采精。而眼無(wú)神、偏肥或偏瘦、嗜睡的公豬通常性欲差,不利于采精。
1.2 公豬調(diào)教種公豬一般在8月齡,體重100 kg左右開始調(diào)教。過(guò)早調(diào)教其生理未發(fā)育成熟,體形較小,爬跨困難,會(huì)使其產(chǎn)生畏懼心理,對(duì)調(diào)教造成不良影響;過(guò)晚調(diào)教則體格過(guò)大、性情暴躁,不易聽從調(diào)教員的指揮,嚴(yán)重的會(huì)攻擊調(diào)教人員,調(diào)教難度增加。調(diào)教時(shí)可讓待訓(xùn)公豬隔欄觀看采精公豬的爬跨和采精過(guò)程,使其有一個(gè)感觀的認(rèn)識(shí)。調(diào)教前收集發(fā)情母豬尿液噴灑于假母豬臺(tái)上,調(diào)教時(shí)把發(fā)情母豬趕入鄰近調(diào)教室的圈舍,使種公豬產(chǎn)生交配欲望,誘導(dǎo)其爬跨假畜臺(tái)。經(jīng)過(guò)2~3 d訓(xùn)練,即可正式調(diào)教種公豬爬跨假母豬臺(tái)。種公豬初次調(diào)教成功后,每隔1~2 d按照初次調(diào)教的方法進(jìn)行再次調(diào)教,經(jīng)過(guò) 7 d左右的調(diào)教就會(huì)形成固定的條件反射進(jìn)行正常采精。
2.1 精液采集常用徒手采精法。采精前對(duì)采精器皿進(jìn)行嚴(yán)格清洗、消毒、干燥。采精時(shí)手要進(jìn)行嚴(yán)格清洗、消毒并戴上無(wú)菌橡膠手套,待公豬爬上假母豬臺(tái)后采精員蹲于假母豬臺(tái)的左后方,當(dāng)公豬伸出陰莖時(shí)即用右手(手心向下)握住公豬陰莖前端的螺旋部,以拇指頂住陰莖的前端,手握松緊適宜,隨公豬陰莖抽動(dòng)時(shí)順勢(shì)把陰莖全部拉出包皮外。公豬射精時(shí)將拇指與食指稍微張開,露出陰莖前端,讓精液射出。先射出的精液易被污染不予收集,待射出乳白色精液時(shí)用左手持集精瓶在陰莖前端收集精液,當(dāng)排出膠樣物時(shí)停止采集。采精量:本地品種100~200 mL,國(guó)外引進(jìn)品種200~400 mL。采精頻率:每周2~3次。
2.2 精液稀釋精液采集后要盡快稀釋,放置時(shí)間不宜超過(guò)15 min,采用等溫(36~38 ℃)稀釋,高低溫差不得超過(guò)1 ℃。稀釋進(jìn)行時(shí)將備好的稀釋液(按配方配制或成品)緩慢加入精液中,輕輕搖動(dòng)混合均勻,靜置5 min后再作精子活力檢查。稀釋液有多種配方或產(chǎn)品,如“全能健”(長(zhǎng)效)、“豬博士”(長(zhǎng)效)、“紅嘉昊”(長(zhǎng)效)等,短效稀釋液一般要求在3 d內(nèi)使用,長(zhǎng)效稀釋液可保存5~7 d。
2.3 精液分裝精液分裝采用袋、瓶或管裝(一次性塑料制品要求對(duì)精子無(wú)毒害作用),以每劑80~100 mL為單位裝入袋、瓶或管中,排出空氣后密封,包裝上標(biāo)明“產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期、批號(hào)、品種、耳號(hào)、保質(zhì)期”。
2.4 精液保存分裝好的精液置于22~25 ℃環(huán)境下1~2 h后再平放入16~18 ℃恒溫箱內(nèi)避光保存,也可用12~15層紗布(或干毛巾)包嚴(yán)直接放入16~18 ℃恒溫箱內(nèi)。保存的精液4~8 h搖動(dòng)1次并記錄,超過(guò)保質(zhì)期的精液不能使用和出售。
2.5 精液運(yùn)輸精液應(yīng)置于16~18 ℃的專用運(yùn)輸箱內(nèi)避光運(yùn)輸,運(yùn)輸過(guò)程中避免強(qiáng)烈震動(dòng)和碰撞。
3.1 外觀、氣味肉眼觀察外觀應(yīng)為“呈乳白色,均勻一致”,鼻嗅氣味應(yīng)為“略帶腥味,無(wú)異味”。
3.2 采精量采用稱量法計(jì)算采精量(1 g≈1 mL)。
3.3 精子活力取中層精液15~25 μL置于200~400倍顯微鏡下觀察精子活力,每份精液取樣2次,每個(gè)樣品觀察3個(gè)視野,計(jì)算平均值。
3.4 精子密度采用精子密度儀或可見分光光度計(jì)法測(cè)定,并定期用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法校正。
3.5 精子畸形率通常采用伊紅或姬姆薩染色法檢查,在400~600倍顯微鏡下觀察計(jì)數(shù),左、中、右3個(gè)視野中的精子數(shù)不少于200個(gè)。也可采用相差顯微鏡直接觀察。每2個(gè)月抽檢1次。自檢能力不足時(shí)建議定期送至有資質(zhì)的相關(guān)單位檢測(cè)。
3.6 細(xì)菌數(shù)按《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》(GB 4789.2—2016)規(guī)定執(zhí)行,每2個(gè)月抽檢1次。自檢能力不足時(shí)建議定期送至有資質(zhì)的相關(guān)單位檢測(cè))
4.1 原精液品質(zhì)檢測(cè)原精液品質(zhì)檢測(cè)樣品各項(xiàng)指標(biāo)判定標(biāo)準(zhǔn)見表1。只有各項(xiàng)檢測(cè)數(shù)據(jù)達(dá)標(biāo)才能稀釋成常溫精液。
表1 原精液品質(zhì)指標(biāo)檢測(cè)[1]
4.2 稀釋頭份稀釋后的精液按每頭份劑量(瓶)80 mL,總精子數(shù)30×108個(gè)進(jìn)行分裝。計(jì)算公式: 稀釋頭份=采精量×原精子活力×精子密度÷總精子數(shù)。稀釋液劑量=稀釋頭份×每頭份劑量-采精量。稀釋比例=采精量∶稀釋液。示例見表2。
表2 原精液稀釋頭份示例
4.3 常溫精液品質(zhì)檢測(cè)常溫精液是原精液經(jīng)稀釋后常溫保存的精液,要求稀釋后精液(即常溫精液)指標(biāo)達(dá)到表3要求才能作為產(chǎn)品銷售和使用。
表3 稀釋后精液產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)[1]
5.1 發(fā)情鑒定母豬開始發(fā)情時(shí)興奮性逐漸增加,表現(xiàn)為頻繁走動(dòng),不安,食欲下降,外陰發(fā)紅微腫,并流出少量透明黏液,此后性欲旺盛,爬欄、爬跨其他母豬或接受其他母豬爬跨,自動(dòng)接近其他公豬。當(dāng)陰戶紅腫達(dá)高峰時(shí)流出白色濃稠帶絲狀黏液,用力按壓母豬腰部表現(xiàn)靜立、兩耳豎立、尾向上翹,此時(shí)是對(duì)母豬進(jìn)行配種的最佳時(shí)期。
5.2 人工輸配輸精前先將發(fā)情母豬陰部清洗干凈,然后在輸精管頭上涂潤(rùn)滑液,用手把陰唇分開,將輸精管略向上呈45°角插入陰道,再邊旋轉(zhuǎn)輸精管邊插入,慢慢平直推進(jìn),經(jīng)抽送2~3次,直至不能前進(jìn)為止,判斷輸精管已進(jìn)入子宮內(nèi),然后向外拉出一點(diǎn),借助壓力或推力緩慢注入精液,當(dāng)有阻力或精液倒流時(shí)可將輸精管抽送、旋轉(zhuǎn)再注入精液。如果采用自流式輸精則應(yīng)將精液高置于母豬身體,使精液自動(dòng)流入。正常的輸精時(shí)間應(yīng)和自然交配一樣,一般為5~10 min。為了防止精液倒流,輸完精后不要急于拔出輸精管,將精液瓶或袋取下,將輸精管尾部打折,這樣既可防止空氣進(jìn)入,又能防止精液倒流。輸入深度:初產(chǎn)母豬15~20 cm,經(jīng)產(chǎn)母豬20~25 cm。
豬常溫精液的生產(chǎn)與保存技術(shù)在養(yǎng)豬生產(chǎn)過(guò)程中被廣泛應(yīng)用,豬常溫精液產(chǎn)品的生產(chǎn)涉及種公豬精液的采集、稀釋、分裝、保存、檢測(cè)等多個(gè)環(huán)節(jié)[3]。抓好常溫精液產(chǎn)品的生產(chǎn)環(huán)節(jié),必須加強(qiáng)種公豬選擇,做好種公豬飼養(yǎng)管理,建立健全精液生產(chǎn)、保存、發(fā)放等過(guò)程的質(zhì)量監(jiān)管,才能充分發(fā)揮優(yōu)秀種公豬的種用價(jià)值,提高母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù),讓更多的養(yǎng)豬生產(chǎn)者或養(yǎng)殖戶受益,助推養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。