血清SFRP4、SFRP5與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研究

湯路路 韓秋峪 孟 琳 黃 楊 孫禮強(qiáng)

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)是指妊娠期間首次發(fā)生或發(fā)現(xiàn)的糖代謝異常，是圍生期常見的并發(fā)癥之一。GDM對孕婦、胎兒及新生兒均會造成不良影響，其主要危害包括子癇前期、流產(chǎn)、早產(chǎn)、畸形、巨大兒、胎兒生長發(fā)育受限、新生兒低血糖、新生兒呼吸窘迫綜合征及產(chǎn)后發(fā)展為2型糖尿病風(fēng)險(xiǎn)增加等[1]。妊娠期糖代謝的特點(diǎn)是葡萄糖需求量增加，胰島素抵抗及胰島素相對分泌不足。其發(fā)病機(jī)制與2型糖尿病相似，但具體機(jī)制并不明確[2]。

Wnt信號通路是重要的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，該通路的功能最常見于胚胎發(fā)育和癌癥，在細(xì)胞的生長、分化、代謝、凋亡中起重要作用，亦介入了人類正常生理過程[3]。SFRP4、SFRP5是新型的脂肪因子，負(fù)調(diào)控Wnt信號通路，與肥胖、糖脂代謝、胰島素抵抗等密切相關(guān)。目前，SFRP4、SFRP5在2型糖尿病中的相關(guān)研究較多，與GDM相關(guān)的研究較少。本研究通過觀察孕產(chǎn)婦血清中SFRP4、SFRP5的表達(dá)，分析其與妊娠期糖尿病的相關(guān)性。

資料與方法

1.一般資料:選取2019年10月～2020年6月于筆者醫(yī)院住院分娩的妊娠期糖尿病孕婦40例為GDM組，孕婦年齡20～36歲,平均年齡為27.8±4.1歲，孕周36～40周,平均孕周為38.0±1.1周。同期住院分娩的正常妊娠孕婦40例為對照組，孕婦年齡20～34歲，平均年齡為27.6±4.0歲，孕周37～41周，平均孕周為38.3±1.1周。診斷標(biāo)椎參照第9版《婦產(chǎn)科學(xué)》[4]。妊娠24～28周及28周后行75g口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)：空腹和服糖后1h、2h血糖值分別為5.1mmol/L、10.0mmol/L、8.5mmol/L。任何一點(diǎn)血糖值達(dá)到或超過上述標(biāo)準(zhǔn)即診斷為GDM。排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕前有糖尿病及糖尿病家族史；②不良孕產(chǎn)史；③合并高血壓，肝、腎功能不全、多囊卵巢綜合征、內(nèi)分泌疾病等；④不能配合本次研究樣品采集者。兩組孕婦年齡、孕周等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究通過筆者醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)實(shí)施，研究對象知情且同意。

2.研究方法：采集所有受試者入院第2天(分娩前)清晨空腹肘靜脈10ml血液，應(yīng)用AU680型全自動生化分析儀(貝克曼庫爾特公司生產(chǎn))測定受試者的空腹血糖(FBG),餐后2h血糖(2hPBG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹胰島素(FINS)、C反應(yīng)蛋白(CRP)等指標(biāo)；另抽取5ml靜脈血于溫室下靜置2h后1000g離心15min，分離血清標(biāo)記后儲存在-80℃冰箱中，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)方法(ELISA)測定血清SFRP4、SFRP5及白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)水平，試劑盒為Bioswamp產(chǎn)品，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書；穩(wěn)態(tài)模型法評估胰島素抵抗指數(shù)(insulin resistance index，HOMA-IR)=FBG×FINS/22.5。

結(jié) 果

1.GDM組與對照組間各指標(biāo)的比較:GDM組的孕前BMI、FBG、2hPBG、FINS、HOMA-IR、TG、CRP、IL-1β、SFRP4水平均明顯高于對照組，HDL-C、SFRP5水平均明顯低于對照組(P<0.05)，詳見表1。

表1 GDM組與對照組間各指標(biāo)的比較

2.孕婦血清SFRP4、SFRP5與各指標(biāo)相關(guān)性：血清SFRP4水平與孕前BMI、FBG、2hPBG、FINS、HOMA-IR、TG、CRP、IL-1β呈正相關(guān)(P<0.05)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，詳見表2。SFRP5水平與孕前BMI、FBG、2hPBG、FINS、HOMA-IR、TG、CRP、IL-1β呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與HDL-C呈正相關(guān)(P<0.05)，詳見表2。

表2 血清SFRP4、SFRP5與各指標(biāo)相關(guān)性分析

3.影響妊娠期糖尿病的單因素分析：采用χ2檢驗(yàn)對影響產(chǎn)婦妊娠期糖尿病的相關(guān)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)進(jìn)行單因素分析，BMI、SFRP4、SFRP5、HDL-C、IL-1β、CRP等指標(biāo)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳見表3。

表3 影響妊娠期糖尿病的單因素分析

4.血清SFRP4、SFRP5水平對GDM影響分析：以GDM為因變量(無=0，有=1)，以單因素分析有意義的指標(biāo)為自變量進(jìn)行二元Logistic回歸分析，結(jié)果顯示孕前BMI、SFRP4、SFRP5為GDM的獨(dú)立影響因素，詳見表4。

表4 影響GDM的多因素Logistic回歸分析結(jié)果

討 論

妊娠期糖尿病是妊娠期最常見的代謝紊亂。妊娠期糖尿病對孕產(chǎn)婦及胎兒的影響可分為短期和長期，短期影響包括新生兒低血糖、孕婦羊水過多、產(chǎn)后出血、巨大兒及難產(chǎn)等出現(xiàn)率大幅度升高；長期影響包括GDM患者確診后10年內(nèi)2型糖尿病的發(fā)生率超過50%，子代易出現(xiàn)青春期肥胖、糖耐量受損等，對產(chǎn)婦及子代的健康造成了嚴(yán)重威脅[5]。GDM的病因及發(fā)病機(jī)制并不十分明確，目前認(rèn)為GDM是遺傳因素、胰島素抵抗、炎性因子、脂肪細(xì)胞因子等多種因素共同作用的結(jié)果[6]。

胰島素抵抗是妊娠期糖尿病的病理生理基礎(chǔ)之一，妊娠期體內(nèi)釋放大量雌孕激素、胎盤胰島素酶等拮抗胰島素，機(jī)體對胰島素的敏感度下降，為維持正常糖代謝水平，胰島素的需求量相應(yīng)增加，若這一過程失去平衡，就會出現(xiàn)糖耐量異常，導(dǎo)致GDM[7]。本研究中GDM組與對照組患者HOMA-IR平均值均>1，這也說明了妊娠期會出現(xiàn)生理性胰島素抵抗，而GDM組患者HOMA-IR水平明顯高于對照組，證實(shí)了GDM患者會出現(xiàn)更為顯著的胰島素抵抗。GDM組患者的FBG、2hPBG、TG水平均明顯高于對照組，HDL-C水平低于對照組的正常妊娠產(chǎn)婦，說明GDM患者確實(shí)存在糖代謝脂代謝紊亂的情況。

SFRP4是脂肪因子SFRPs成員之一，其可與炎性因子發(fā)生作用影響胰島β細(xì)胞功能，通過Wnt信號通路抑制第一時相胰島素的分泌，導(dǎo)致胰島組織出現(xiàn)慢性炎癥損害及胰島β細(xì)胞功能紊亂[8]。Nunez Lopez等[9]研究表明SFRP4在調(diào)節(jié)全身胰島素敏感度或抵抗中發(fā)揮作用，可能通過抑制血管形成和促進(jìn)組織炎癥在肥胖和2型糖尿病的病理生理過程中發(fā)揮重要作用。Mahdi等[10]和Bergmann等[11]研究表明，SFRP4的高表達(dá)與炎癥和胰島素分泌減少有關(guān)，可以在2型糖尿病發(fā)病前5年預(yù)測其發(fā)展，因此它可看作為2型糖尿病胰島功能障礙的生物學(xué)標(biāo)志物。Baldane等[12]研究結(jié)果顯示，SFRP4可能被用作妊娠期糖尿病女性發(fā)生糖耐量異常的危險(xiǎn)因素的潛在指標(biāo)。

本研究中GDM組患者FBG、FINS、HOMA-IR均高于對照組，提示GDM患者血糖水平及胰島素抵抗程度較正常妊娠產(chǎn)婦升高。GDM患者血清SFRP4水平也明顯高于對照組，且與FBG、HOMA-IR、IL-1β等指標(biāo)呈正相關(guān)，表明SFRP4水平越高，代謝紊亂、炎性反應(yīng)及胰島素抵抗程度越嚴(yán)重，GDM嚴(yán)重程度越高。回歸分析結(jié)果顯示SFRP4為GDM的獨(dú)立影響因素，SFRP4表達(dá)水平升高是GDM的危險(xiǎn)因素，這更能表明SFRP4在GDM的發(fā)生、發(fā)展過程中有重要作用。

SFRP5是一種新型抗炎脂肪因子，其通過與脂肪組織表達(dá)的Wnt5a結(jié)合，抑制Wnt非典型通路的下游靶點(diǎn)JNK的活化實(shí)現(xiàn)抗炎、改善胰島素抵抗的作用[13]。Ouchi等[14]的動物實(shí)驗(yàn)中，在遺傳性或飲食肥胖的動物中，SFRP5的表達(dá)下降，在肥胖和糖尿病小鼠中，急性給予SFRP5可以通過抑制炎性反應(yīng)和Wnt5a通路來改善代謝功能和胰島素抵抗，表明SFRP5是影響全身新陳代謝的胰島素抵抗和脂肪組織炎癥的重要介質(zhì)。本研究中GDM組患者SFRP5水平顯著低于對照組，與FBG、FINS、HOMA-IR、TG、IL-1β等指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)，表明SFRP5對GDM患者體內(nèi)糖脂代謝紊亂、炎性反應(yīng)及胰島素抵抗程度有一定改善作用，也正說明這一點(diǎn)。Hu等[15]對2型糖尿病人群相關(guān)研究結(jié)果顯示即使在糖耐量改變的早期階段，如糖耐量受損，也存在較低的SFRP5水平，表明SFRP5可能是2型糖尿病代謝紊亂或胰島素抵抗的相關(guān)因素。研究發(fā)現(xiàn)，GDM患者血清SFRP5的表達(dá)水平顯著降低，與GDM風(fēng)險(xiǎn)增加顯著相關(guān)[16]。本研究的回歸分析結(jié)果顯示，SFRP5為GDM獨(dú)立影響因素，SFRP5表達(dá)水平下降是GDM的危險(xiǎn)因素，說明SFRP5與GDM的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

綜上所述，脂肪因子SFRP4、SFRP5與GDM患者的糖脂代謝、胰島素抵抗及炎性反應(yīng)密切相關(guān)，在GDM的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。然而本研究納入的樣本量較小，SFRP4、SFRP5在正常妊娠人群及GDM患者血清中的表達(dá)情況仍需在以后的研究中進(jìn)一步增加樣本量予以證實(shí)，同時其具體表達(dá)及作用機(jī)制仍有待于進(jìn)一步研究。