2型糖尿病患者并發(fā)缺血性腦卒中危險(xiǎn)因素及與載脂蛋白E基因型相關(guān)性分析

李麗容，盧治蘭，鄧向海，單林玲

(1.安康市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 安康 725000；2.安康市中醫(yī)醫(yī)院影像中心，陜西 安康 725000)

缺血性腦卒中是2型糖尿病(Type 2 diabetes，T2DM)人群常見嚴(yán)重大血管病變之一，致死致殘率較高，嚴(yán)重威脅生命安全；同時(shí)，T2DM亦被證實(shí)是缺血性腦卒中獨(dú)立危險(xiǎn)因素，人群罹患風(fēng)險(xiǎn)為健康人群的2～5倍[1]。國外研究[2]證實(shí)，T2DM患者大血管病變發(fā)生與脂代謝異常密切相關(guān)，而載脂蛋白E(Apolipoprotein E，ApoE)是脂代謝中關(guān)鍵調(diào)控指標(biāo)。ApoE由299個(gè)氨基酸構(gòu)成，具有穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)、運(yùn)轉(zhuǎn)脂類物質(zhì)、調(diào)節(jié)脂類代謝及保護(hù)大腦功能等多種作用[3]。目前研究[4]證實(shí)ApoE基因rs7412(C/T)和rs429358(C/T)單核苷酸多態(tài)性共同決定共顯性等位基因(ε2、ε3及ε4)，同時(shí)形成3個(gè)純合子和3個(gè)雜合子，其中ε3/ε3基因型占比最高，一般在70%以上，又稱為野生型。研究[5]顯示，檢測(cè)ApoE基因型能夠?qū)崿F(xiàn)T2DM患者繼發(fā)大血管病變的早期預(yù)測(cè)及干預(yù)。但對(duì)于ApoE基因型是否會(huì)對(duì)缺血性腦卒中的發(fā)生產(chǎn)生影響，尚無明確定論。本研究探討T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中的危險(xiǎn)因素及與ApoE基因型相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究納入我院2016年1月至2020年9月收治的T2DM患者共490例為研究對(duì)象，根據(jù)是否并發(fā)缺血性腦卒中分為A組(未并發(fā)缺血性腦卒中)與B組(并發(fā)缺血性腦卒中)。T2DM和缺血性腦卒中均符合世界衛(wèi)生組織診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，年齡≥18歲，同時(shí)排除存在重要臟器功能異常、惡性腫瘤、精神系統(tǒng)疾病、妊娠及妊娠糖尿病者。本研究設(shè)計(jì)符合《赫爾辛基宣言》要求，且患者及家屬知情同意。

1.2 研究方法 查閱病例收集患者性別、年齡、身高與體重[計(jì)算體重指數(shù)(BMI)]、T2DM病程、吸煙史、原發(fā)性高血壓、收縮壓、舒張壓、血清實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖、糖化血紅蛋白(HbA1c)]及ApoE基因檢測(cè)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)：入選患者均抽取清晨空腹靜脈血4～5 ml。HbA1c采用東曹HLC-723G8型HbA1c全自動(dòng)分析儀檢測(cè)，其他指標(biāo)均采用貝克曼ISE AU5800型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。ApoE基因檢測(cè)：收集患者肘靜脈血，提取血液基因組DNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)ApoE基因型，通過熒光曲線判讀基因型。陰性對(duì)照品無Ct值或Ct值>29，陽性對(duì)照品Ct值<25。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者一般資料比較 見表1。B組收縮壓和舒張壓高于A組，合并原發(fā)性高血壓比例低于A組(均P<0.05)。兩組其他指標(biāo)比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2 兩組患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 見表2。B組LDL-C水平低于A組(P<0.05)。兩組其他指標(biāo)比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)。

表2 兩組患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.3 兩組患者ApoE基因型頻率及等位基因頻率比較 見表3。χ2檢驗(yàn)證實(shí)研究納入人群ApoE基因分布符合H-W遺傳平衡定律及連鎖平衡，可代表整個(gè)群體。B組ε2/ε3、ε3/ε4基因型頻率顯著高于A組，ε3/ε3基因型頻率顯著低于A組(χ2=8.26、10.71、6.98，均P<0.05)。B組ε4基因頻率顯著高于A組，ε3基因頻率顯著低于A組(χ2=11.65、10.71，均P<0.05)。

表3 兩組患者ApoE基因型頻率及等位基因頻率比較(%)

2.4 T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析 見表4。Logistic回歸模型自變量賦值：T2DM病程和收縮壓為連續(xù)變量，根據(jù)原始數(shù)據(jù)分析；合并原發(fā)性高血壓=1，未合并=0；ε3/ε3作為參考對(duì)照，ε2/ε3和ε3/ε4基因型出現(xiàn)=1，未出現(xiàn)=0。結(jié)果顯示，合并原發(fā)性高血壓、高收縮壓、ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型均是T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(均P<0.05)。

表4 T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析

3 討 論

本次研究結(jié)果顯示，B組ε2/ε3、ε3/ε4基因型頻率及ε4基因頻率顯著高于A組，ε3/ε3基因型頻率和ε3基因頻率顯著低于A組。Logistic回歸模型多因素分析結(jié)果顯示， ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型是T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步證實(shí)ApoE基因型為ε2/ε3和ε3/ε4的T2DM患者更易發(fā)生缺血性腦卒中。國外研究[7-8]證實(shí)，經(jīng)多元回歸分析校正年齡、BMI、血壓、血脂及吸煙情況后，ApoE基因型為ε3/ε3的人群不易發(fā)生缺血性腦卒中。另有研究[9-10]認(rèn)為，ApoE基因型為ε2/ε4和ε3/ε4的缺血性腦卒中患者中可見VLDL-C與TG水平顯著升高。一項(xiàng)Meta分析研究[11]顯示，ApoE ε4等位基因存在可導(dǎo)致缺血性/出血性腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高。此外，ApoE ε4等位基因還被證實(shí)可促進(jìn)頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層增厚，并進(jìn)一步提高缺血性腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[12-13]。上述研究結(jié)果均支持本次研究結(jié)論，據(jù)此筆者推測(cè)ApoE基因型ε2/ε3和ε3/ε4、ApoE ε4等位基因可對(duì)體內(nèi)脂類代謝特別是腦部脂類代謝產(chǎn)生影響，導(dǎo)致腦部動(dòng)脈粥樣硬化病情發(fā)生及發(fā)展，從而引起T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)升高。

本次研究結(jié)果中，兩組合并原發(fā)性高血壓比例、收縮壓、舒張壓及LDL-C水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示并發(fā)缺血性腦卒中患者血壓水平均顯著升高，同時(shí)LDL-C水平更低。繼續(xù)采用Logistic回歸模型分析證實(shí)，合并原發(fā)性高血壓病和高收縮壓與T2DM患者缺血性腦卒中發(fā)生獨(dú)立相關(guān)，但低LDL-C水平并未證實(shí)存在保護(hù)效應(yīng)，與以往報(bào)道結(jié)果不符[14-16]，筆者認(rèn)為這可能與納入樣本量相對(duì)較少、單中心及人種差異有關(guān)。同時(shí)，有報(bào)道[17-18]提示，基因型為ε3/ε4和ε4/ε4的患者體內(nèi)LDL-C水平較低，導(dǎo)致內(nèi)皮依賴性血管舒張受到抑制，從而造成血壓升高，故LDL-C與T2DM患者缺血性腦卒中發(fā)生之間的關(guān)系仍有待后續(xù)研究進(jìn)一步確證。

本研究采用χ2檢驗(yàn)證實(shí)納入人群ApoE基因分布符合H-W遺傳平衡定律及連鎖平衡，可代表整個(gè)群體；同時(shí)，基因型和等位基因分析結(jié)果提示，缺血性腦卒中患者ε2/ε3和ε3/ε4基因型頻率及ε4基因頻率均更高。以上數(shù)據(jù)進(jìn)一步提示，T2DM患者并發(fā)缺血性腦卒中與ApoE基因型間存在密切聯(lián)系。有研究[19-20]證實(shí)，ApoE ε4等位基因可刺激血管收縮，提高血壓水平，導(dǎo)致淀粉樣蛋白Aβ在腦內(nèi)大量沉積，最終誘發(fā)阿爾茲海默癥。亞洲人群中ApoE ε4等位基因和基因型ε3/ε 4、ε4/ε4亦與原發(fā)性高血壓發(fā)生有關(guān)[21]。結(jié)合本次及上述研究結(jié)果，筆者認(rèn)為ApoE ε2和ε4等位基因可能在原發(fā)性高血壓發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，并誘發(fā)多種心腦血管疾病。

綜上所述，合并原發(fā)性高血壓、高收縮壓、ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型及T2DM患者更易并發(fā)缺血性腦卒中。早期評(píng)估ApoE基因型并給予針對(duì)性干預(yù)有助于降低缺血性腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。但本研究屬于單中心回顧性分析，無法完全排除混雜因素影響，仍有待后續(xù)更大樣本量及多中心研究確證。