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    基于模糊數(shù)學(xué)綜合評價的水蛭掩味方法△

    2021-06-11 06:58:06楊梅李蔚群張微高艷紅關(guān)永霞張貴民
    中國現(xiàn)代中藥 2021年4期
    關(guān)鍵詞:己醛原粉水蛭

    楊梅,李蔚群,張微,高艷紅,關(guān)永霞*,張貴民*

    1.魯南厚普制藥有限公司,山東 臨沂 276006;2.魯南制藥集團(tuán)股份有限公司/中藥制藥共性技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 臨沂 276006

    動物藥因其藥理活性強(qiáng)、療效顯著,被廣泛應(yīng)用于中藥制劑中。《中華人民共和國藥典》2015年版共收載動物藥46種,如水蛭、蜈蚣、地龍、僵蠶等,其中含水蛭的中成藥近20種,如脈絡(luò)舒通丸、脈絡(luò)舒通顆粒、腦心通膠囊、血栓心脈寧片等[1]。通常水蛭等動物藥在制劑過程中易產(chǎn)生不良?xì)馕?,特別是其特異性腥臭味易致患者服藥后產(chǎn)生惡心、嘔吐等不適反應(yīng),影響用藥依從性。因此,基于臨床用藥實(shí)際應(yīng)對其進(jìn)行掩味工藝研究。

    常規(guī)中藥掩味方法主要有添加矯味劑、包衣法、包裹法等[2-4],但此類方法多側(cè)重于改善異味入口后的不良感受,大多患者在服用含腥臭異味動物藥后仍存在噯氣、惡心、嘔吐等不適反應(yīng)[5],且掩味研究對象以制劑居多,鮮有針對原粉入藥動物藥的專項(xiàng)研究。模糊綜合評價法應(yīng)用于中藥制劑口感評價已有報道[6-7],但針對原粉入藥的動物藥掩味效果評價少有提及。本研究在前期對水蛭原粉掩味前后腥臭異味物質(zhì)變化分析的基礎(chǔ)上[8],利用β-環(huán)糊精研磨包合技術(shù)開展腥臭異味動物藥水蛭掩味工藝研究,基于模糊綜合評價法對該工藝進(jìn)行綜合分析評價,佐以掩味前后腥臭味物質(zhì)變化分析對其優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,優(yōu)選能改善腥臭異味動物藥水蛭口感及服藥后胃腸道不適反應(yīng)的掩味方案,為其感官評價提供一種客觀的、可量化的評價參考。

    1 材料

    1.1 儀器

    GC-2010型氣相色譜儀、HS-20型頂空進(jìn)樣器(日本 Shimadzu公司);PM180R型高速冷凍離心機(jī)(意大利ALC公司);LRVM-MSH-GN型龍脈精研機(jī)(山東龍脈科技發(fā)展有限公司);LD-400A型高速多功能搖擺式粉碎機(jī)(浙江永康市紅太陽機(jī)電有限公司);FA1004型電子分析天平(上海精密儀器儀表有限公司);AG285型電子天平(瑞士Mettler-Toledo 公司);GZX-9140MBE型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司);78HW-1型恒溫磁力攪拌器(杭州儀表電機(jī)有限公司)。

    1.2 試藥

    β-環(huán)糊精(批號:180623)、羥丙基β-環(huán)糊精(批號:180607)均購自淄博千匯生物科技有限公司;糊精(批號:180305,鄭州銀鶴糊精有限公司);阿斯巴甜(批號:180817,天新食品股份有限公司);正己醛(美國Sigma公司,批號:S88145,純度≥98%);三甲胺水溶液(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司,批號:201501,純度:30%)。

    水蛭、蜈蚣、全蝎3種動物藥取樣于魯南厚普制藥有限公司中藥材陰涼庫,經(jīng)魯南制藥關(guān)永霞高級工程師鑒定分別為水蛭科動物水蛭HirudonipponicaWhitman、蜈蚣科動物少棘巨蜈蚣ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch和鉗蝎科動物東亞鉗蝎ButhusmartensiiKarsch的干燥體。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 藥材原粉的制備

    分別將水蛭、蜈蚣、全蝎3種動物藥低溫干燥至手折易斷為度,依次用搖擺式粉碎機(jī)進(jìn)行機(jī)械粉碎,過80目篩,即得,備用。

    2.2 掩味劑的選擇

    相關(guān)資料表明,在黃柏、小檗堿等苦味藥物中添加適量β-環(huán)糊精、甜味劑等輔料可較好改善相應(yīng)藥物的口感[4,9]。據(jù)此,選擇β-環(huán)糊精、阿斯巴甜、糊精為待選掩味劑進(jìn)行初選。分別稱取2.1項(xiàng)下水蛭等藥材原粉各適量,置于龍脈精研機(jī)中,按表1制備方案依次進(jìn)行研磨作業(yè),得各預(yù)試樣品。

    表1 預(yù)試樣品制備方案

    分別取上述各預(yù)試樣品5 g,以100 mL溫水(40~50 ℃)攪拌分散,得各預(yù)試樣品混懸液。參照文獻(xiàn)[10],隨機(jī)選取20名健康志愿者,依次對各預(yù)試樣品混懸液逐一品嘗并記錄真實(shí)感受,并在品嘗1個樣品后用清水漱口以確保不影響下一個樣品的品嘗效果。結(jié)果18名志愿者認(rèn)為添加β-環(huán)糊精的樣品口感較好,11名志愿者認(rèn)為添加糊精的樣品較好,17名志愿者認(rèn)為添加阿斯巴甜(用淀粉補(bǔ)齊質(zhì)量至100%)的樣品無掩味效果。表明β-倍他環(huán)糊精的掩味效果最好,而阿斯巴甜幾乎無掩味作用。此外,掩味劑的加入量、研磨時間對掩味效果亦有較大影響。

    2.3 掩味樣品的制備

    結(jié)合2.2項(xiàng)下預(yù)試結(jié)果,參照相關(guān)文獻(xiàn),以水蛭原粉為考察對象,選擇掩味劑種類(A)、加入量(B)及研磨時間(C)為考察因素,采用三因素三水平L9(34)正交試驗(yàn)對掩味方案進(jìn)行考察[9,11]。掩味劑選擇藥劑學(xué)上具分散或包合作用的糊精、β-環(huán)糊精、羥丙基β-環(huán)糊精,其加入量分別為原粉質(zhì)量的50%、100%和150%,研磨時間分別為5、10、15 min,依2.2項(xiàng)下研磨方法制備各掩味樣品,見表2~3。

    表2 水蛭掩味正交試驗(yàn)因素水平

    表3 水蛭掩味正交試驗(yàn)方案

    2.4 模糊數(shù)學(xué)綜合評價法進(jìn)行口感評價

    2.4.1因素集和評語集的確定 結(jié)合文獻(xiàn)[10,12-14],選擇腥臭異味、反胃程度、整體口感作為評價指標(biāo),即為因素集打分標(biāo)準(zhǔn)為很好(95分)、好(80分)、一般(70分)、差(60分)、很差(40分)。根據(jù)感官評價統(tǒng)計(jì)結(jié)果,建立矩陣,采用模糊數(shù)學(xué)評價模型[6-7,15]進(jìn)行分析。

    2.4.2感官評價結(jié)果統(tǒng)計(jì) 稱取2.3項(xiàng)下各掩味樣品5.0 g,分別溶于200 mL熱水,由50名健康志愿者對樣品逐一進(jìn)行感官評價,并在品嘗1個樣品后用清水漱口以確保不影響下一個樣品的品嘗效果,并根據(jù)口感調(diào)查表打分標(biāo)準(zhǔn)對所嘗溶液進(jìn)行打分,結(jié)果見表4。

    表4 水蛭掩味正交試驗(yàn)感官評價結(jié)果

    2.4.3權(quán)重向量的確定 根據(jù)各指標(biāo)對水蛭原粉掩味效果的影響程度,采用強(qiáng)制決定法,確定權(quán)重分別為腥臭異味30分,反胃程度40分,總體口感30分,總計(jì)100分。

    2.4.4建立模糊矩陣 將感官指標(biāo)綜合評價結(jié)果用Y表示。模糊關(guān)系綜合評價集Y=H×M,其中權(quán)重集為H,模糊矩陣為M。將表中腥臭異味、反胃程度、總體口感評價結(jié)果除以總評價人數(shù),可得各試驗(yàn)的模糊矩陣。

    M1=

    M2=

    M3=

    M4=

    M5=

    M6=

    M7=

    M8=

    M9=

    2.4.5綜合隸屬制度的建立 根據(jù)模糊變換原理,采用普通矩陣乘法對各類因素的綜合評價結(jié)果進(jìn)行計(jì)算,即Y=H×M。如:

    同理可得

    2.4.6綜合評分 將各評語集對應(yīng)的分值(很好、好、一般、差、很差)與模糊綜合評價的結(jié)果相乘、加和,得到各配方的綜合評分結(jié)果。

    Q1=0.058×95+0.070×80+0.127×70+0.200×60+0.495×40=51.808

    Q2=0.080×95+0.117×80+0.182×70+0.267×60+0.350×40=59.650

    Q3=0.090×95+0.133×80+0.235×70+0.277×60+0.265×40=62.867

    Q4=0.408×95+0.342×80+0.153×70+0.072×60+0.025×40=82.158

    Q5=0.493×95+0.362×80+0.090×70+0.040×60+0.015×40=85.100

    Q6=0.308×95+0.332×80+0.143×70+0.112×60+0.105×40=76.758

    Q7=0.370×95+0.215×80+0.192×70+0.138×60+0.085×40=77.467

    Q8=0.220×95+0.282×80+0.293×70+0.082×60+0.123×40=73.800

    Q9=0.302×95+0.308×80+0.197×70+0.110×60+0.083×40=77.025

    各配方綜合評分排序?yàn)榕浞?>配方4>配方7>配方9>配方6>配方8>配方3>配方2>配方1。配方5和配方4的得分均大于80分。

    對綜合評分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行直觀分析和方差分析,結(jié)果見表5~6。方差分析結(jié)果表明,各因素各水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,根據(jù)直觀分析結(jié)果,掩味效果的影響因素順序?yàn)锳>C>B。最佳掩味方案為A2B2C3,即向水蛭粉末中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%的β-環(huán)糊精,密閉研磨15 min。

    表5 水蛭掩味正交試驗(yàn)方案及直觀分析結(jié)果

    表6 水蛭掩味正交試驗(yàn)方差分析

    2.5 最佳掩味方案驗(yàn)證

    2.5.1模糊數(shù)學(xué)綜合評價法驗(yàn)證 稱取2.1項(xiàng)下水蛭粉末3份,每份100 g,分別加入β-環(huán)糊精100 g,密閉研磨15 min,即得驗(yàn)證樣品1~3。由50名健康志愿者對3份驗(yàn)證樣品逐一進(jìn)行感官評價,按照2.4項(xiàng)下的模糊數(shù)學(xué)綜合評價法,進(jìn)行感官評價,最終計(jì)算出驗(yàn)證樣品1~3的綜合評分結(jié)果分別為85.009、85.732、84.997。驗(yàn)證結(jié)果表明,本研究的掩味方法能有效改善水蛭粉末入口后的不良口感,并減輕服用后的惡心、反胃等胃腸反應(yīng)。

    2.5.2掩味前后腥臭異味成分變化 參照本團(tuán)隊(duì)前期研究結(jié)果[8],以未掩味的水蛭原粉為對照,對2.5.1項(xiàng)下驗(yàn)證樣品1~3中正己醛進(jìn)行測定,以驗(yàn)證該方法的掩味效果,具體為以腥臭味指標(biāo)成分正己醛為對照品,取水蛭原粉10 g和驗(yàn)證樣品20 g,分別置于250 mL燒杯中,各加水100 mL,以封口膜密封杯口,攪拌60 min,靜置,5000 r·min-1(離心半徑為12.97 cm)離心5 min,分別得到原粉固形物、原粉水液、混合粉固形物和混合粉水液共4種樣品。將上述4種樣品共12份依次置于揮發(fā)油提取裝置中,各加水至總液量約200 mL,各加入乙酸乙酯2 mL,按《中華人民共和國藥典》2015年版(四部)通則2204“揮發(fā)油測定法”操作,提取3 h,收集乙酸乙酯液,依次作為水蛭供試品溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,對上述樣品進(jìn)行氣相檢測。檢測結(jié)果表明,驗(yàn)證樣品的離心水液中未檢測到正己醛,說明該掩味方法可有效抑制水蛭原粉中腥臭味成分溶出。各樣品測得的色譜圖見圖1。

    注:A.正己醛對照品;B.水蛭供試品Ⅰ;C.水蛭供試品Ⅱ;D.水蛭供試品Ⅲ;E.水蛭供試品Ⅳ;1.正己醛。圖1 正己醛對照品及各供試品的氣相色譜圖

    3 結(jié)論與討論

    本研究借助于β-環(huán)糊精研磨包合技術(shù)對腥臭異味突出的水蛭藥材掩味方法展開研究,采用模糊綜合評價法對各方案的掩味效果進(jìn)行評定,結(jié)合正交試驗(yàn)分析方法,優(yōu)選出效果最佳掩味方案,即向水蛭粉末中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為100%的β-環(huán)糊精密閉研磨15 min。該方案可有效掩蓋水蛭的腥臭異味,患者服用后惡心、反胃等胃腸反應(yīng)弱,整體口感評價好。該方法可改善常規(guī)動物藥掩味方法中的局限和不足,處理方法易于操作,便于推廣應(yīng)用。

    本研究采用模糊數(shù)學(xué)綜合評價法對腥臭異味突出的中藥水蛭掩味方案進(jìn)行評定,使感官定性評價定量化,可作為掩味方案篩選的重要依據(jù)。對掩味前后腥臭異味指標(biāo)成分正己醛變化的氣相檢測結(jié)果表明,模糊數(shù)學(xué)綜合評價法篩選出的掩味方案可有效減少藥材原粉中正己醛的溶出,證實(shí)該方法應(yīng)用于口感評價準(zhǔn)確有效。模糊數(shù)學(xué)綜合評價法簡便可靠,現(xiàn)已廣泛用于中醫(yī)藥行業(yè),把中醫(yī)藥的模糊概念具體化,使中醫(yī)藥學(xué)在保留原有精華的基礎(chǔ)上,向著合理化、現(xiàn)代化和科學(xué)化方向發(fā)展。

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