高效液相色譜法測(cè)定面膜中熒光增白劑CXT

張春芳，李子謙，汪 寧

（黑龍江工業(yè)學(xué)院 資源工程學(xué)院，黑龍江雞西 158100）

熒光增白劑是一種熒光染料，又稱為白色染料，也是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物。它的特性是能激發(fā)入射光線產(chǎn)生熒光，使所染物質(zhì)獲得類似螢石的閃閃發(fā)光的效應(yīng)，即熒光增白劑將不可見的紫外光轉(zhuǎn)換為可見的熒光從而使肉眼看到的物質(zhì)變白[1]。目前有諸多學(xué)者對(duì)于熒光增白劑的危害性毒理性進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，如熒光增白劑致倉鼠卵巢細(xì)胞微核形成與基因突變研究[2]等。熒光增白劑使用較廣，適用在洗滌劑、紡織、紙張、塑料及防偽印刷、熒光探測(cè)等領(lǐng)域。

面膜是護(hù)膚品的一個(gè)類別，常用于皮膚補(bǔ)水，也具有保濕、滋潤(rùn)、營(yíng)養(yǎng)、改善外觀、深層清潔等多種功能。面膜可按其對(duì)面部皮膚的功效、適用面部皮膚類型、面膜的形式等進(jìn)行分類，有些種類面膜有效使用后，可清潔美白提亮面部皮膚顏色，正因?yàn)檫@種清潔美白的功效，使得部分消費(fèi)者對(duì)美白面膜青睞有加，市場(chǎng)需求量大，一些不法商家向面膜中添加熒光增白劑達(dá)到美白效果。

目前，紙張、蘑菇、面粉、洗滌用品等各類樣品中熒光增白劑的檢測(cè)方法有分光光度法、紫外燈照射法、高效液相色譜法等。如高效液相色譜法測(cè)定棉織物中種熒光增白劑[3]、反向毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光快速分析面粉中的熒光增白 劑[4]、微波萃取高效液相色譜法測(cè)定塑料中熒光增白劑[5]。本文通過Agilent 1200液相色譜儀，以面膜中可能違禁添加的熒光增白劑CXT為檢測(cè)對(duì)象，建立分析測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)單，可行性高。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1200液相色譜儀，Agilent Zorbax Eclipse 300SBC18色譜柱，G1321A熒光檢測(cè)器，KQ-700DB型超聲波清洗器，0.22μm濾膜；超純水，乙醇，乙腈；熒光增白劑CXT，化學(xué)式C40H38N12O8S2Na2，使用過程中較少量就可達(dá)到顯著的著色力及增白提亮效果，在產(chǎn)品中不容易遷移穩(wěn)定性高，色調(diào)為微青色；實(shí)驗(yàn)用面膜通過網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)統(tǒng)一采購。

1.2 色譜條件

本實(shí)驗(yàn)需要確定的高效液相色譜條件包括流動(dòng)相種類、流動(dòng)相比例、流速、熒光增白劑CXT激發(fā)波長(zhǎng)與發(fā)射波長(zhǎng)、色譜柱類型、實(shí)驗(yàn)色譜柱溫度等。其中，流動(dòng)相選擇包括水、乙腈、甲醇，實(shí)驗(yàn)確定最佳流動(dòng)相為乙腈/水；乙腈與水的比例滿足100%條件下，調(diào)整乙腈溶液比例由5%至90%過程中，當(dāng)乙腈溶液配比為60%時(shí)目標(biāo)分離效果佳峰形尖銳，流動(dòng)相流速0.8mL/min滿足實(shí)驗(yàn)要求；熒光增白劑CXT用150mm和250mm兩種類型色譜柱進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)，參數(shù)為（150×4.6mm，5μm）柱子溫度設(shè)置為25℃可在1.4min內(nèi)將熒光增白劑CXT很好分離；過程中Em=430nm，Ex=350nm，進(jìn)樣量10μL。

1.3 陽性樣品制備

黑暗條件下，熒光增白劑CXT在紫外光燈照射下會(huì)產(chǎn)生可見熒光，實(shí)驗(yàn)過程中所需要的陽性面膜樣品均參照此方法制得。陽性樣品制備過程中嚴(yán)格控制黑暗條件，確保無光以防影響熒光判斷，保證室內(nèi)溫度和濕度恒定。用于制備陽性面膜樣品的大小統(tǒng)一，每份陽性面膜樣品制備時(shí)，為排除其他實(shí)驗(yàn)干擾因素，均需要同時(shí)制備3份相同樣品。

2 結(jié)果與討論

2.1 熒光增白劑CXT色譜圖

根據(jù)高效液相色譜條件繪制熒光增白劑CXT色譜圖如圖1所示，此圖是被測(cè)面膜樣品中是否含有熒光增白劑CXT定性分析的依據(jù)，應(yīng)用此方法檢測(cè)面膜樣品，若得到的色譜圖中在保留時(shí)間為1.4min處有色譜峰出現(xiàn)，則所檢測(cè)面膜樣品中含有熒光增白劑CXT。配制多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)CXT濃度，確定標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=111.9X-25.8，R2=0.998符合面膜分析實(shí)驗(yàn) 要求。

圖1 熒光增白劑CXT高效液相色譜圖

2.2 固-液比

面膜樣品質(zhì)量與熒光增白劑CXT提取溶劑用量關(guān)系即為本實(shí)驗(yàn)固-液比，固相以1g面膜為標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量，液相乙醇/水（體積比為1∶2）溶液變化由15mL至30mL，固相與液相不同配比下得到的熒光增白劑CXT回收量如圖2所示。圖中A為液相15mL、B為液相20mL、C為液相25mL、D為液相30mL，從圖中可直觀看出當(dāng)液相為25mL和30mL時(shí)，回收率最大，所以固液比為面膜1g-乙醇水溶液25mL。

圖2 提取效果對(duì)比

2.3 超聲溫度

對(duì)于熒光增白劑CXT的分析，既要考慮色譜分離時(shí)的溫度，又要考慮面膜樣品前處理過程時(shí)的溫度，超聲條件下得到回收量如圖3所示，可知溫度的高低對(duì)面膜樣品中CXT的提取影響較大，當(dāng)超聲溫度為30℃時(shí)效果最好。

圖3 不同溫度的提取效果對(duì)比

圖4 不同時(shí)間的提取效果對(duì)比

2.4 超聲時(shí)間

設(shè)置時(shí)間為10～40min，超聲條件下時(shí)間變化量得到回收量如圖4所示，可知時(shí)間也是影響面膜樣品中CXT提取率的重要因素，當(dāng)時(shí)間為20min時(shí)效果最好。

2.5 加標(biāo)回收率及精密度

在0.50～10.0μg/mL濃度范圍內(nèi)按實(shí)驗(yàn)要求選3個(gè)水平進(jìn)行添加熒光增白劑實(shí)驗(yàn)，得加標(biāo)回收率和精密度數(shù)見表1。精密度2.9%～4.3%，回收率81.0%～88.3%，兩相指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均滿足樣品分析要求，該方法有較好的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性。

表1 加標(biāo)回收率及精密度

3 結(jié)論

本方法前處理采用乙醇水溶液為提取劑，超聲提取熒光增白劑，操作簡(jiǎn)單，試劑易得，方法學(xué)數(shù)據(jù)合理，在檢測(cè)面膜樣品中可能添加的熒光增白劑CXT應(yīng)用上有參考性。