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    電針足三里對腹瀉型腸易激綜合征大鼠內(nèi)臟敏感性及腹瀉情況的影響

    2021-05-23 12:20:27陳苑平陳柯許金森鄭淑霞
    關(guān)鍵詞:電針

    陳苑平 陳柯 許金森 鄭淑霞

    【摘 要】 目的:觀察電針足三里對腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)大鼠內(nèi)臟敏感性及腹瀉情況的影響。方法:將30只SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組及電針組,每組10只。模型組和電針組均采用慢性束縛應(yīng)激聯(lián)合番瀉葉煎劑灌胃的方法建立IBS-D模型,造模2w。造模成功后,電針組采用電針足三里穴干預(yù)。觀察各組大鼠的的精神狀態(tài)、活動(dòng)情況、毛發(fā)光澤度以及體重增長等情況,測算腹瀉指數(shù),并評估所有大鼠的內(nèi)臟敏感性情況。結(jié)果:與空白組相比較,模型組及電針組干預(yù)前體重增長幅度較?。≒<0.01),干預(yù)期之后電針組大鼠體重增長情況得到一定改善(P<0.01)。與空白組相比,模型組大鼠的結(jié)直腸擴(kuò)張的容量閾值顯著降低(P<0.01),與模型組相比,電針組大鼠的結(jié)直腸擴(kuò)張容量閾值在電針干預(yù)后有所提高(P<0.05),且電針組大鼠的腹瀉情況也有所好轉(zhuǎn)(P<0.01)。結(jié)論:電針足三里穴能夠改善IBS-D大鼠的易激惹、倦怠、體重增長緩慢的情況,改善大鼠的腹瀉情況,降低內(nèi)臟高敏感性。

    【關(guān)鍵詞】 電針;足三里;腹瀉型腸易激綜合征;內(nèi)臟敏感性;腹瀉指數(shù)

    【中圖分類號】R246?? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號】1007-8517(2021)05-0013-04

    Effects of Electroacupuncture Zusanli on Visceral Sensitivity and Diarrhea in Rats with Diarrhea-type Irritable Bowel Syndrome

    CHEN Yuanping1 CHEN Ke1 XU Jinsen2 ZHENG Shuxia2*

    1. Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350108, China;

    2. Fujian Academy of Chinese Medical Sciences, Fuzhou 350003, China

    Abstract:Objective To observe the effect of electroacupuncture zusanli on visceral sensitivity and diarrhea in diarrhea-type irritable bowel syndrome (IBS-D) rats. Methods 30 SD rats were randomly divided into blank group, model group and electroacupuncture group, with 10 rats in each group. Both the model group and the electroacupuncture group adopted the method of chronic binding stress combined with senna lesf decoction is given orally to establish the IBS-D model, and the model was constructed for 2 weeks. After successful modeling, electroacupuncture group adopted electroacupuncture zusanli point intervention. The mental state, activity, hair gloss and weight gain of each group were observed, the diarrhea index was measured, and the visceral sensitivity of all rats was evaluated. Results Compared with the blank group, the body weight increase of the model group and the electroacupuncture group was smaller before intervention (P<0.01), and the body weight increase of the electroacupuncture group was improved to some extent after intervention (P<0.01). Compared with the blank group, the volume threshold of colorectal dilatation in the model group was significantly reduced (P<0.01). Compared with the model group, the volume threshold of colorectal dilatation in the electroacupuncture group was improved after the electroacupuncture intervention (P<0.05), and the diarrhea of the electroacupuncture group was also improved (P<0.01). Conclusion Electroacupuncture at Zusanli point can improve the irritability, tiredness and slow weight gain in IBS-D rats, improve the diarrhea in rats, and reduce the visceral hypersensitivity.

    Keywords:Electroacupuncture; Zusanli; Diarrhea-type Irritable Bowel Syndrome;Visceral Sensitivity;Diarrhea Index

    腸易激綜合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是常見的消化系疾病,表現(xiàn)為腹痛或腹部不適,且伴隨排便情況改變的功能性腸病,多為慢性、間歇性發(fā)作。IBS的發(fā)病率逐年增高,在IBS的亞型中又以腹瀉型(IBS-D)最為常見,約占IBS發(fā)病率的3/4,因IBS-D容易反復(fù)發(fā)作,給患者生活及心理造成一定的影響[1]。研究認(rèn)為,IBS的發(fā)病機(jī)制與胃腸道動(dòng)力異常以及內(nèi)臟高敏感性存在聯(lián)系[2]。研究調(diào)查表明,目前西藥對該疾病的治療存在一定的局限性,而針灸對該病的治療則有一定的優(yōu)勢[3]。本實(shí)驗(yàn)通過電針大鼠足三里,觀察電針足三里對IBS-D模型大鼠的內(nèi)臟敏感性以及大鼠腹瀉情況的影響,初步探討電針足三里對于IBS-D的療效及其效應(yīng)機(jī)制。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康的雄性SD大鼠30只,體重(200~230)g,動(dòng)物許可證號: SCXK(滬)2018-0006(上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司),實(shí)驗(yàn)前先適應(yīng)性飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥科學(xué)院動(dòng)物房(普通級)7 d,控制室內(nèi)溫度為 23~26 ℃,相對濕度為50%~70%。在本次實(shí)驗(yàn)過程中,按照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》等相關(guān)文件標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行飼養(yǎng)與處置。

    1.2 試劑 番瀉葉生藥(亳州市華鑫中藥飲片科技有限公司),液體石蠟(運(yùn)加牌,黑龍江省運(yùn)加醫(yī)療科技有限公司),0.9%氯化鈉注射液(江西科倫藥業(yè)有限公司),8FR導(dǎo)尿管(事達(dá)牌,湛江市事達(dá)實(shí)業(yè)有限公司),2 mL注射器(康友牌,江蘇康友醫(yī)用器械有限公司)。

    1.3 儀器 電子秤(福建福日電子股份有限公司),R407小動(dòng)物呼吸麻醉系統(tǒng)(瑞沃德生命科技有限公司),異氟烷(瑞沃德生命科技有限公司),200 mm×80 mm×80 mm自制亞克力盒,自制大鼠固定器,SDZ-Ⅱ型電針儀(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司),0.25 mm×13 mm無菌針灸針(蘇州東邦醫(yī)療器械有限公司)。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 分組與造模 實(shí)驗(yàn)開始前先將30只大鼠隨機(jī)分成空白組、模型組及電針組,空白組大鼠正常喂養(yǎng),余下兩組則需進(jìn)行2w的IBS-D造模處理。參照Williams等[4]的方法進(jìn)行改進(jìn),采用慢性束縛應(yīng)激聯(lián)合番瀉葉灌胃的方法建立IBS-D大鼠模型,并參照趙妍等[5]的方法制備0.3 g/mL的番瀉葉煎劑。造模的具體操作:造模時(shí)先給予番瀉葉煎劑(0.3 g/mL),并按照10 mL/kg的給藥劑量灌胃。灌服番瀉葉煎劑后,將大鼠裝進(jìn)自制的固定器中,限制其無法進(jìn)行自如活動(dòng),持續(xù)時(shí)長為1 h,每日1次,持續(xù)2周。

    2.2 干預(yù)方法 電針組在造模成功后對大鼠的足三里穴進(jìn)行電針干預(yù),參照實(shí)驗(yàn)針灸研究會(huì)制定的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位圖譜》,選取大鼠的足三里穴,其位置在大鼠的膝關(guān)節(jié)后外側(cè)。操作時(shí)先觸及大鼠的腓骨小頭,再往下約5 mm即為該穴,再選用規(guī)格為0.25 mm×13 mm的毫針直刺,深度約為5 mm,并接上電針儀。具體方法:首先將大鼠固定在自制固定器內(nèi),使其不亂跑亂動(dòng),定穴后直刺,進(jìn)針后不做手法刺激,連接SDZ-II電針儀進(jìn)行干預(yù),選用波形為疏密波,頻率調(diào)至2 Hz,強(qiáng)度約為1~2 mA,以大鼠下肢出現(xiàn)輕微抖動(dòng)且不嘶叫為度,留針20 min,每日1次,持續(xù)7 d。

    2.3 觀察指標(biāo)

    2.3.1 一般情況 觀察大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中的精神狀態(tài)、活動(dòng)情況、毛發(fā)光澤度以及體重增長等情況。

    2.3.2 腹瀉情況 在大鼠造模前后以及干預(yù)后,對所有大鼠進(jìn)行腹瀉指數(shù)的測算。腹瀉指數(shù)測定時(shí)在鼠籠內(nèi)墊上濾紙,定時(shí)觀察大鼠排便情況,如有稀便污跡沾染濾紙則需更換濾紙,并及時(shí)記錄濾紙的污跡面積。持續(xù)觀察5 h后,統(tǒng)計(jì)大鼠排稀便的數(shù)量及腹瀉情況,再根據(jù)公式計(jì)算每只大鼠的腹瀉指數(shù)。

    公式[6]:腹瀉指數(shù)=稀便率(每只大鼠的稀便數(shù)/總便數(shù))×稀便級(每只大鼠的稀便級數(shù)總和/稀便數(shù))。

    稀便級數(shù)分級[7]:以稀便污染濾紙形成污跡面積的大小定級, 分為4級:1級為污染直徑<1 cm,2級污染直徑1.0~1.9 cm,3級污染直徑2~3 cm,4級污染直徑>3 cm。測量操作:先統(tǒng)計(jì)每個(gè)大鼠排便的總數(shù),再統(tǒng)計(jì)大鼠排稀便的總數(shù),并逐一測定每堆稀便的級數(shù),然后參照公式算出腹瀉率、稀便級以及腹瀉指數(shù)。測量污染直徑時(shí),如果糞便形狀大致為圓形,則可以直接量直徑;若糞便形狀為橢圓形或較不規(guī)則時(shí),則測量其最長距離和近似圓的直徑,并將二者相加除以2。

    2.3.3 內(nèi)臟敏感性評價(jià) 在造模前、造模后及干預(yù)后,先將大鼠禁食12 h,將所有大鼠逐個(gè)放入小動(dòng)物呼吸麻醉誘導(dǎo)盒內(nèi),使其吸入異氟烷麻醉。待其麻醉后將帶有球囊的8FR導(dǎo)尿管插入大鼠肛門內(nèi),導(dǎo)尿管插入深度為4.5 cm,隨后用膠帶將其纏在大鼠尾巴上固定。將大鼠放入規(guī)格為200 mm×80 mm×80 mm的透明固定盒中,并將含有溫生理鹽水的2 mL注射器接入導(dǎo)尿管尾部,待大鼠完全清醒后盡快檢測大鼠的內(nèi)臟敏感性。測量結(jié)直腸擴(kuò)張(CRD)時(shí),緩慢向球囊內(nèi)注溫生理鹽水,使球囊內(nèi)的壓力逐漸增高,記錄大鼠出現(xiàn)腹壁收縮反應(yīng)及腹部、臀部抬高并抬離地面時(shí)的容量閾值,需重復(fù)3次該操作,并取平均值。

    2.4 統(tǒng)計(jì)方法 運(yùn)用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x?±s)表示,符合正態(tài)分布以及方差齊的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(ANOVA)的LSD 法(最小顯著性法),不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用非參數(shù)檢驗(yàn),以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    3 結(jié)果

    3.1 各組大鼠一般情況比較 空白組在全程實(shí)驗(yàn)中大鼠精神良好、活動(dòng)自如、毛色潤澤,大便正常未見有腹瀉的情況。模型組及電針組的大鼠在進(jìn)行造模后逐漸出現(xiàn)精神狀態(tài)差、活動(dòng)減少、蜷縮、易激惹、毛發(fā)干枯無澤、肛周有稀便污跡附著。電針組在電針干預(yù)后精神狀態(tài)、活動(dòng)情況以及毛色得到一定程度的好轉(zhuǎn)。如圖1所示,在造模期結(jié)束后,與空白組相比較,模型組及電針組體重增長幅度較小,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。干預(yù)期結(jié)束后,電針組大鼠體重增長情況得到一定改善,且與模型組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    3.2 內(nèi)臟敏感性評價(jià) 大鼠CRD容量閾值比較,如圖2所示,模型組大鼠的腹部收縮、腹部抬起及臀部抬起的容量閾值,與空白組相比均顯著降低,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。電針組大鼠的腹部收縮、腹部抬起及臀部抬起的容量閾值與模型組相比,在電針干預(yù)后得到了提高(P<0.05)。

    3.3 腹瀉情況 空白組在實(shí)驗(yàn)期間未出現(xiàn)腹瀉情況,則只對模型組及電針組大鼠的腹瀉指數(shù)進(jìn)行比較。如圖3所示,模型組及電針組在造模后檢測發(fā)現(xiàn)均出現(xiàn)了腹瀉(P>0.05),但是在干預(yù)之后電針組大鼠的腹瀉情況得到了好轉(zhuǎn),且與模型組對比具有差異(P<0.01)。

    4 分析與討論

    中醫(yī)角度來看,可根據(jù)IBS-D的主要臨床表現(xiàn),將其劃入“泄瀉”“腹痛”范疇,其病位在腸,與脾胃密切相關(guān)。目前,IBS的發(fā)病機(jī)制尚未有定論,但是隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,近年來IBS發(fā)病機(jī)制被研究者們不斷深入挖掘。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為IBS的發(fā)病機(jī)制可能主要與機(jī)體的內(nèi)臟高敏感性、腸動(dòng)力異常等聯(lián)系密切[8]。Bouin等[9]研究發(fā)現(xiàn),患有IBS的人群的腸道疼痛閾值普遍低于正常人群,此后內(nèi)臟高敏感性逐漸成為研究IBS的發(fā)病機(jī)制的一個(gè)新的切入點(diǎn)。降低內(nèi)臟高敏感性,可以改善IBS患者的癥狀。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,電針足三里穴能夠改善IBS-D大鼠的易激惹、倦怠、體重增長緩慢的情況,并且有效緩解IBS-D大鼠的腹瀉情況。目前,CRD閾值是評價(jià)IBS-D大鼠模型內(nèi)臟敏感性的方法之一,即通過對大鼠結(jié)腸刺激所產(chǎn)生的反應(yīng)。與空白組相比,模型組大鼠的CRD閾值偏低,說明模型組存在內(nèi)臟高敏感,電針組在干預(yù)之后,其內(nèi)臟敏感程度也得到了一定的改善。

    針灸是治療IBS的常用補(bǔ)充療法和替代療法之一,針灸的干預(yù)方式對機(jī)體的調(diào)節(jié)具有整體性,并且對IBS的改善機(jī)制可能涉及道多環(huán)節(jié)、多層次。研究[10-11]表明,采用包括電針、艾灸等在內(nèi)的針灸方式治療IBS-D,均可改善內(nèi)臟高敏感性、胃腸道炎癥,并且能調(diào)節(jié)胃腸蠕動(dòng)。此外,有研究[12]發(fā)現(xiàn),電針治療IBS-D的療效甚至略優(yōu)于藥物,且電針副作用少,所以在臨床上越來越受到患者們的認(rèn)可。

    《四總穴歌》有云:“肚腹三里留”,足三里是臨床針灸治療胃腸疾病的常用穴,其具有和胃健脾、補(bǔ)中益氣、通調(diào)腑氣等功能?!夺樉拇蟪伞芬蔡岬剑骸靶篂a肚腹諸般疾,三里、內(nèi)庭功無比”。《靈樞·五亂》言:“氣在于腸胃者,取之足太陰、陽明;不下者,取之三里”,說明該穴不僅可以固護(hù)后天正氣以調(diào)胃腸,又能調(diào)暢氣機(jī)以和肝脾[13]。

    梳理總結(jié)近10年針灸臨床治療IBS-D選穴規(guī)律,通過計(jì)算、歸納出腧穴、歸經(jīng)及選穴部位的頻次,發(fā)現(xiàn)在IBS-D的針灸治療中足三里穴出現(xiàn)的頻次居于前列[14]。臨床經(jīng)驗(yàn)證明,在足三里穴位上施以針刺或艾灸等干預(yù),可以改善IBS-D患者的腹痛、腹瀉等不適癥狀,足三里治療IBS-D的療效確切,且未見有不良反應(yīng)[15-16]。雖然足三里在治療IBS-D的臨床療效得到了認(rèn)可,但是其起效的作用機(jī)制卻未有確切闡述。有研究[17]認(rèn)為,在足三里穴在上施以電針可以調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白的表達(dá)、降低結(jié)腸黏膜組織中的炎性因子含量,從而減輕IBS-D大鼠的腸道炎性損傷,達(dá)到治療疾病的作用;還有的研究[13]發(fā)現(xiàn),電針足三里可以下調(diào)與胃腸動(dòng)力相關(guān)的結(jié)腸波形蛋白的表達(dá),從而糾正IBS-D大鼠的胃腸功能。

    綜上所述,電針足三里穴能夠改善IBS-D大鼠的易激惹、倦怠、體重增長緩慢的情況,改善大鼠的腹瀉情況,降低內(nèi)臟高敏感性。電針足三里治療IBS-D的療效確切,但是其可能存在的作用機(jī)制仍然需要本課題組進(jìn)一步去探索。

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    (收稿日期:2020-09-04 編輯:劉斌)

    基金項(xiàng)目:福建省衛(wèi)生健康中青年骨干人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2019-ZQN-82);福建省經(jīng)絡(luò)感傳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

    作者簡介:陳苑平(1995-),女,漢族,碩士研究生在讀,研究方向?yàn)榻?jīng)絡(luò)感傳和針灸作用機(jī)制。E-mail:437674559@qq.com

    通信作者:鄭淑霞(1978-),女,漢族,碩士,副研究員,研究方向?yàn)榻?jīng)絡(luò)感傳和針灸作用機(jī)制。E-mail:zsx7896@163.com

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