龐青松, 都曉春
(長春中醫(yī)藥大學,吉林長春130117)
黃芪多糖(APS)是從中草藥黃芪中提取出來的一種活性多糖,具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎、抗病毒等生物學功能(Zhou,2017)。 近年來,隨著對APS 的深入研究, 其作為一種替代抗生素的產(chǎn)品被越來越多的研究者重視。研究表明,APS 不僅能通過促進動物機體免疫器官的發(fā)育和提高免疫細胞功能來提高動物的細胞免疫和體液免疫水平,還能在一定程度上提高畜禽的生長及生產(chǎn)性能,改善畜產(chǎn)品品質(zhì)(柳序,2016)。APS 作為一種中草藥,其價格低廉且來源廣泛,即使長期使用對動物組織細胞的毒副作用也較小, 畜產(chǎn)品中殘留量很低(楊新宇,2017)。 因此,APS 在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)的應(yīng)用效果較為理想。 APS 作為一種綠色飼料添加劑,大量相關(guān)的研究主要集中在豬、雞等的養(yǎng)殖生產(chǎn)中,在幼兔養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用研究甚少。因此本試驗旨在研究APS 對幼兔生長性能、腹瀉率及免疫功能的影響,并探討黃芪多糖合適的添加劑量,為其在幼兔生產(chǎn)中的科學應(yīng)用提供參考依據(jù)。
1.1 試驗材料 本試驗所用的黃芪多糖購自西安明澤生物科技有限公司,其有效多糖含量為50%。1.2 試驗設(shè)計 試驗采用單因素完全隨機分組設(shè)計,選取100 只28 日齡的健康幼兔,隨機分為5 組,每組20 只兔。 對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗組在基礎(chǔ)日糧中分別添加100、200、400、800 mg/kg APS,預(yù)試期5 d,正式試驗期30 d。所有幼兔統(tǒng)一進行日常管理,常規(guī)驅(qū)蟲免疫。 每日早晨7:00 和晚上18:00 飼喂2 次,自由飲水。 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))
1.3 測定指標及方法
1.3.1 生長性能的測定 在試驗開始和結(jié)束時對幼兔進行空腹稱重,每日記錄采食量。采食量=每日飼料供給量-剩余量;平均日增重=(初重-末重)/試驗天數(shù);料重比=平均日采食量/平均日增重。
1.3.2 腹瀉率、死亡率的測定 整個試驗期內(nèi),每天觀察幼兔的排糞情況, 記錄腹瀉個體和死亡個體數(shù)量。
腹瀉率/%=腹瀉只數(shù)/總只數(shù)×100;
死亡率/%=死亡只數(shù)/總只數(shù)×100。
1.3.3 免疫指標的測定 試驗結(jié)束當天早晨幼兔空腹時頸靜脈采集5 mL 血液, 靜置3 h,3500 r/min 離心10 min,吸取上層血清分裝到離心管中,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?采用間接酶聯(lián)免疫吸附法測定免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)的含量。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析,采用Duncan’s 法進行多重比較,試驗結(jié)果用“平均數(shù)±標準差”表示,用P < 0.05 表示差異顯著性。
2.1 APS 對幼兔生長性能的影響 由表2 可知,與對照組相比,200 mg/kg APS 組幼兔的末重、增重、 平均日增重顯著提高, 分別提高了12.42%、19.95%、20.36%(P <0.05), 料 重 比 顯 著 降 低11.11%(P <0.05);400 mg/kg APS 組 幼 兔 的 末重、 增重、 平均日增重顯著提高, 分別提高了17.73%、28.42%和28.45%(P <0.05),料重比顯著降低13.55%(P <0.05);100 mg/kg 和800 mg/kg APS 組幼兔的末重、增重、平均日增重和料重比與對照組相比均差異不顯著(P >0.05)。
表2 APS 對幼兔生長性能的影響
2.2 APS 對幼兔腹瀉率、死亡率的影響 由表3可知, 與對照組相比,400 mg/kg APS 組幼兔的腹瀉率和死亡率顯著降低, 均降低了50%(P <0.05);800 mg/kg APS 組腹瀉率顯著降低37.5%(P <0.05);100 mg/kg 和200 mg/kg APS 組腹瀉率和死亡率與對照組相比均無顯著差異 (P >0.05)。
表3 APS 對幼兔腹瀉率、死亡率的影響(n=20)
2.3 APS 對幼兔免疫功能的影響 由表4 可知,與對照組相比, 日糧中添加APS 對IgM 含量無顯著影響(P>0.05);400 mg/kg APS 組IgA 的含量顯著提高, 提高了13.04%(P <0.05);200、400 mg/kg APS 組IgG 含量顯著提高, 分別提高了4.98%和6.31%(P <0.05)。
表4 APS 對幼兔免疫功能的影響 g/L
本試驗研究結(jié)果表明,在幼兔基礎(chǔ)日糧中添加200、400 mg/kg APS 能夠顯著提高幼兔的平均日增重,并顯著降低其料重比(P < 0.05)。 趙天章等 (2018) 研究表明, 在獺兔日糧中添加400、1600 mg/kg APS 能夠顯著提高其采食量和平均日增重,與本試驗結(jié)果相似。 而在唐姣玉等(2014)的研究中,幼兔日糧添加200 mg/kg APS表現(xiàn)出最理想的生長性能。 造成以上結(jié)果的差異,可能與APS 的純度有關(guān),本試驗APS 的有效含量為50%, 而唐姣玉試驗中使用的APS 的有效含量為60%。 APS 有提高獺兔對日糧干物質(zhì)、能量、粗蛋白質(zhì)表觀消化率的趨勢,并能顯著提高其對日糧粗纖維的消化吸收利用率(楊新宇,2017),因此,APS 在提高動物對日糧營養(yǎng)成分表觀消化率的基礎(chǔ)上,進而提高其生長性能。 本試驗中添加800 mg/kg APS 并未顯著提高對幼兔的生長性能, 可能是由于APS 與腸道中的水結(jié)合,導(dǎo)致消化道中食糜黏度增加,使幼兔對飼料的利用率不高。
本試驗研究結(jié)果表明,APS 可以降低幼兔的腹瀉率和死亡率, 以400 mg/kg 的添加量為宜,其他添加劑量有降低的趨勢, 但與對照組相比差異不顯著。 本試驗選擇的28 日齡幼兔,其消化系統(tǒng)還未發(fā)育成熟,微生物菌群結(jié)構(gòu)不平衡,各種消化酶活性比較低, 再加上斷奶帶來的應(yīng)激反應(yīng)會使其消化道黏膜組織受損及免疫能力降低,進而比較容易出現(xiàn)腹瀉的現(xiàn)象。 相關(guān)研究表明,APS 可通過調(diào)節(jié)單核巨噬細胞、 自然殺傷細胞、T 細胞、B 細胞、細胞因子及神經(jīng)免疫網(wǎng)絡(luò)的功能來改善動物機體的免疫功能; 提高消化道內(nèi)各種消化酶(如腸道淀粉酶、蛋白酶等)的活性, 增強動物機體對日糧營養(yǎng)成分的消化吸收率, 進而有效地降低由營養(yǎng)物質(zhì)過剩導(dǎo)致的消化不良性腹瀉;再加之APS 能夠抑制動物腸道內(nèi)有害菌如大腸桿菌等的生長繁殖, 可以增加有益菌如乳酸菌的含量,改變腸道菌群結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系的平衡發(fā)展(唐姣玉,2013;岳輝,2011)。
IgG 約占血清總免疫球蛋白的75%,具有抗菌、抗病毒作用,可以中和毒素使其失去毒性,并能調(diào)理凝集和沉淀抗原。IgM 在動物機體抗感染初期起著非常重要的作用, 是動物感染初期就產(chǎn)生的免疫球蛋白,抗體效能比較高,在機體受病原感染后能與機體的補體結(jié)合, 進而將病原體溶解消除(高鳳山,2006)。 IgA 主要對動物機體呼吸道、 消化道等組織的黏膜免疫起 “屏障”作用(吳德峰,2006)。 本研究結(jié)果表明,在幼兔日糧中添加APS 顯著提高了IgA 和IgG 的含量,說明幼兔體液免疫功能顯著提高,與李楠等(2019) 使用APS 在獺兔研究中的結(jié)果相一致??赡苁怯捎贏PS 中葡萄糖、果糖、阿拉伯糖、己糖醛酸、 半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等營養(yǎng)成分可誘導(dǎo)幼兔機體生成大量的干擾素, 進而增強其機體免疫功能。APS 不僅能提高免疫球蛋白的含量,在王鳳霞等(2012)和唐姣玉等(2013)的研究中,APS 對兔的免疫器官也有增重的效果,并能增加T-淋巴細胞的數(shù)量。以上結(jié)果均表明,APS 能提高動物的免疫功能。
在幼兔基礎(chǔ)日糧中添加一定量的APS 可以顯著提高幼兔的生長性能,降低腹瀉率、死亡率,提高幼兔機體免疫力, 綜合本文試驗數(shù)據(jù)結(jié)果,APS 的最適添加量為400 mg/kg。