不同硒添加量對生茸期梅花鹿生產(chǎn)性能、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及血清生化指標(biāo)的影響

史鴻鵬 陳麗紅 司華哲 劉可園 南韋肖 王金銘 楊乾龍 李光玉 孫偉麗

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，長春 2130112)

硒元素是動(dòng)物生長發(fā)育必需的微量元素之一[1]，硒缺乏將會引起機(jī)體免疫失調(diào)、氧化應(yīng)激、生長遲緩等生理性反應(yīng)[2-5]。有機(jī)硒的安全性比無機(jī)硒高，且容易被動(dòng)物機(jī)體吸收利用[6-7]。研究表明，硒元素作為5′-脫碘酶的輔助因子，參與三碘甲狀腺原氨酸的合成，而三碘甲狀腺原氨酸可以通過控制動(dòng)物機(jī)體能量代謝和蛋白質(zhì)代謝來調(diào)節(jié)機(jī)體生長[8]；硒元素可以通過促進(jìn)瘤胃微生物生長，提高α-淀粉酶和蛋白酶活性，進(jìn)而促進(jìn)有機(jī)物質(zhì)、蛋白質(zhì)的消化吸收[9]；硒元素經(jīng)過小腸被吸收進(jìn)入血液后與硒蛋白P結(jié)合，形成功能性硒蛋白和含硒酶類，進(jìn)而影響動(dòng)物健康和生長發(fā)育[10]。研究發(fā)現(xiàn)，鹿茸頂端出現(xiàn)硒元素富集現(xiàn)象[11-12]，而關(guān)于鹿茸的生長是否受外源硒的影響，還未曾有學(xué)者研究。本試驗(yàn)擬通過探索不同硒(酵母硒形式)添加量對梅花鹿生長性能、產(chǎn)茸性能、血清生化指標(biāo)和營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響，得出生茸期梅花鹿飼糧適宜的硒添加量，旨在為硒元素在生茸期梅花鹿飼糧中合理利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取20頭體況相近、5歲的健康生茸期梅花鹿，隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭梅花鹿。其中，Ⅰ組為對照組，飼喂不額外添加硒的基礎(chǔ)飼糧；Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組為試驗(yàn)組，飼喂在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上添加酵母硒(硒含量為2 000 mg/kg)的飼糧，硒添加量分別為0.3、1.2和4.8 mg/kg。飼養(yǎng)試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所梅花鹿養(yǎng)殖場進(jìn)行。試驗(yàn)從2020年4月23日開始至2020年6月30日結(jié)束，預(yù)試期7 d，正試期60 d。

1.2 基礎(chǔ)飼糧

本試驗(yàn)采用試驗(yàn)基地原有基礎(chǔ)飼糧配方配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。根據(jù)國家農(nóng)業(yè)科學(xué)數(shù)據(jù)共享中心公布的數(shù)據(jù)，查閱基礎(chǔ)飼糧中各個(gè)原料中硒含量，計(jì)算得到基礎(chǔ)飼糧中硒含量為0.04 mg/kg。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content預(yù)混料 Premix1)1.00合計(jì) Total100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)干物質(zhì) DM89.72代謝能 ME/(MJ/kg)10.50粗蛋白質(zhì) CP19.07粗脂肪 EE2.31鈣 Ca0.78磷 P0.58硒Se/(mg/kg)0.04

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)前對所有梅花鹿進(jìn)行耳釘編號，全面清理圈舍并消毒。每天飼喂3次(04：30、10：00和16：00)。正試期以預(yù)試期測定的采食量為基礎(chǔ)，進(jìn)行定量飼喂，每天飼喂前收集剩料，烘干計(jì)算采食量。保證鍋內(nèi)有清潔飲水，自由飲水。每天清晨打掃圈舍，各組梅花鹿飼養(yǎng)方式以及環(huán)境條件一致。

1.4 樣品采集

試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)對所有梅花鹿進(jìn)行稱重，并在試驗(yàn)第30、31和32天連續(xù)3 d于05：00—06：00在鹿圈內(nèi)定點(diǎn)收糞，每個(gè)鹿圈定點(diǎn)5個(gè)，每個(gè)定點(diǎn)采集糞樣200 g左右，去除明顯雜質(zhì)。試驗(yàn)第34天晨飼前麻醉試驗(yàn)鹿，然后由專業(yè)技術(shù)人員通過頸靜脈采血10 mL，4 000 r/min離心10 min，將血清分裝入1.5 mL離心管，置于-80 ℃保存待測。

1.5 指標(biāo)檢測

1.5.1 生長性能

根據(jù)試驗(yàn)前體重和鋸茸時(shí)體重計(jì)算平均日增重，每天記錄梅花鹿的采食量，計(jì)算干物質(zhì)采食量和料重比。

1.5.2 產(chǎn)茸性能

鋸茸前，使用軟尺測量茸尺指標(biāo)；鋸茸后，稱量茸重。所有茸尺指標(biāo)和茸重?cái)?shù)據(jù)均取鹿茸左、右支的平均值。

1.5.3 營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

飼糧和糞樣干物質(zhì)(DM)含量參照GB/T 6435—2006，采用105 ℃烘干法測定；粗蛋白質(zhì)(CP)含量參照GB/T 6432—1994，采用凱氏定氮法的測定；粗脂肪(EE)含量參照GB/T 6433—1994，采用索氏抽提法的測定；鈣(Ca)含量參照GB/T 6436—1992，采用乙二胺四乙酸(EDTA)滴定法測定；磷(P)含量參照GB/T 6437—1992，采用釩鉬酸銨比色法的測定。以鹽酸不溶灰分(AIA)為指示劑，計(jì)算營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率[13]，計(jì)算公式如下：

某營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100-100×[飼糧中
AIA含量(%)/糞樣中AIA含量(%)]×[糞樣中
該營養(yǎng)物質(zhì)含量(%)/飼糧中該營養(yǎng)
物質(zhì)含量(%)]。

1.5.4 飼糧和糞便中硒含量的測定

根據(jù)GB 5009.93—2017的方法處理飼糧和糞便樣品，使用吉天公司的原子熒光光度計(jì)(AFS-9130)，采用原子吸收光譜法測定飼糧和糞便中硒含量，該方法的檢出限為0.002 mg/kg。

1.5.5 血清生化指標(biāo)的測定

血清中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO)、尿素氮(UN)含量與堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性采用中生北控生物科技股份公司提供的試劑盒，按照試劑盒說明書，使用SELECTRA-E全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

獲得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過Excel 2010進(jìn)行整理，然后使用GraphpadPrism8.0的one-way ANOVA程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。統(tǒng)計(jì)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 不同硒添加量對生茸期梅花鹿生長性能的影響

由表2可知，飼糧硒添加量對生茸期梅花鹿的平均日增重和干物質(zhì)采食量無顯著影響(P>0.05)；Ⅲ組料重比低于其他各組，但差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ組硒體沉積量極顯著高于Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.01)。

表2 不同硒添加量對梅花鹿生長性能的影響

2.2 不同硒添加量對梅花鹿產(chǎn)茸性能的影響

由表3可知，飼糧硒添加量對梅花鹿茸重?zé)o顯著影響(P>0.05)，但Ⅲ組茸重相對于Ⅰ組和Ⅱ組提高0.24 kg，相對于Ⅳ組提高0.37 kg。Ⅲ組的各茸尺指標(biāo)也高于其他組，但差異均未達(dá)顯著水平(P>0.05)。

表3 不同硒添加量對梅花鹿產(chǎn)茸性能的影響

2.3 不同硒添加量對梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表4可知，Ⅱ組梅花鹿對干物質(zhì)、鈣、磷的表觀消化率極顯著高于Ⅰ組和Ⅲ組(P<0.01)，同時(shí)干物質(zhì)和磷的表觀消化率顯著高于Ⅳ組(P<0.05)；Ⅱ組梅花鹿對粗蛋白質(zhì)的表觀消化率與Ⅰ組無顯著差異(P>0.05)，但極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)，顯著高于Ⅳ組(P<0.05)；Ⅱ組梅花鹿對硒的表觀消化率極顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組(P<0.01)；各組梅花鹿對粗脂肪的表觀消化率無顯著差異(P>0.05)。

表4 不同硒添加量對梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.4 不同硒添加量對梅花鹿血清生化指標(biāo)的影響

由表5、表6和表7可知，Ⅱ組梅花鹿血清乳酸脫氫酶和堿性磷酸酶活性極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)；Ⅳ組梅花鹿血清總膽固醇和總蛋白含量顯著高于Ⅰ組(P<0.05)；Ⅳ組梅花鹿血清高密度脂蛋白膽固醇含量和乳酸脫氫酶活性極顯著高于Ⅰ組和Ⅲ組(P<0.01)；Ⅲ組梅花鹿血清堿性磷酸酶活性極顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.01)；Ⅲ組梅花鹿血清尿素氮含量顯著高于Ⅱ組(P<0.05)；Ⅲ組梅花鹿血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于Ⅳ組(P<0.05)。

表5 不同硒添加量對梅花鹿血清糖脂代謝指標(biāo)的影響

表6 不同硒添加量對梅花鹿血清蛋白質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

表7 不同硒添加量對梅花鹿血清肝功能指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 不同硒添加量對生茸期梅花鹿生長性能的影響

動(dòng)物對有機(jī)硒的利用率高于無機(jī)硒[14-15]，硒元素可以通過硒蛋白參與動(dòng)物生長發(fā)育的調(diào)節(jié)[16]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在生茸期梅花鹿飼糧中添加酵母硒，硒添加量為1.2 mg/kg時(shí)能降低料重比，平均日增重隨著硒添加的增加出現(xiàn)先增高后下降的趨勢。研究表明，硒可以提高雌性梅花鹿、湖羊和杜寒雜交羊的平均日增重，降低料重比，提高飼料轉(zhuǎn)化率[10，15]。硒對妊娠母豬的生長性能無顯著影響，但可以提高仔豬的平均日增重，降低料重比[17-19]。這可能是因?yàn)槲嘏c脫碘酶作用，參與三碘甲狀腺原氨酸的合成，進(jìn)而影響機(jī)體能量代謝和蛋白質(zhì)代謝，促進(jìn)動(dòng)物的生長發(fā)育[8]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)硒體沉積量隨著飼糧硒添加量的增加而增加，硒添加量為4.8 mg/kg的組梅花鹿硒體沉積量極顯著高于硒添加量為0.3和1.2 mg/kg的組。

3.2 不同硒添加量對梅花鹿產(chǎn)茸性能的影響

硒元素可以調(diào)節(jié)鹿茸生長，生茸期馬鹿血清硒含量顯著高于其他時(shí)期[20]。研究表明，鹿茸頂端出現(xiàn)硒元素富集現(xiàn)象[12]，而鹿茸的生長中心位于鹿茸頂端[21-22]。NRC(2000)認(rèn)為當(dāng)飼糧硒含量超過5 mg/kg時(shí)，反芻動(dòng)物會發(fā)生中毒現(xiàn)象?；诖?，本試驗(yàn)設(shè)置不同硒添加量組，觀察硒元素對梅花鹿鹿茸生長及機(jī)體代謝的影響。研究表明，硒蛋白通過參與調(diào)節(jié)胰島素樣生長因子-1(IGF-1)的分泌[23-24]，進(jìn)而促進(jìn)鹿茸生長[25]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，硒添加量為1.2 mg/kg時(shí)，梅花鹿的茸重有增加趨勢。有研究表明，硒添加量的增加可以提高奶牛的生產(chǎn)性能[26-27]，與本試驗(yàn)結(jié)果相似，這可能是因?yàn)槲卦趧?dòng)物體內(nèi)發(fā)揮抗氧化作用，有效緩解動(dòng)物的氧化應(yīng)激狀態(tài)，進(jìn)而使生產(chǎn)性能得到提高[28]。

3.3 不同硒添加量對梅花鹿?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

生茸期梅花鹿對營養(yǎng)物質(zhì)需求量高，以滿足鹿茸快速生長的需要。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中硒添加量為0.3 mg/kg時(shí)，梅花鹿對干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷和硒的表觀消化率均得到不同程度的提高。Bao等[10]研究發(fā)現(xiàn)，隨著硒添加量從0.2 mg/kg提高到0.3 mg/kg，梅花鹿對粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的表觀消化率顯著提高。這可能是因?yàn)槲乜梢愿淖兞鑫妇航Y(jié)構(gòu)，將不易消化的營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為反芻動(dòng)物容易吸收的狀態(tài)[17，29-30]。硒參與抗氧化酶谷胱甘肽過氧化物酶的生物合成，可以保護(hù)機(jī)體免受活性氧和自由基的侵害[31-33]，對消化器官起到保護(hù)作用，進(jìn)而影響機(jī)體α-淀粉酶和蛋白酶活性，促進(jìn)淀粉和蛋白質(zhì)的消化、吸收和利用[9]。

3.4 不同硒添加量對梅花鹿血清生化指標(biāo)的影響

營養(yǎng)物質(zhì)被動(dòng)物機(jī)體消化吸收后，通過血液運(yùn)輸?shù)竭_(dá)各個(gè)組織器官，用以維持動(dòng)物機(jī)體生長發(fā)育和功能的發(fā)揮。外源飼喂的酵母硒經(jīng)過瘤胃到達(dá)小腸，然后通過主動(dòng)運(yùn)輸方式穿過腸壁進(jìn)入血液。血漿中硒元素的傳輸先經(jīng)過白蛋白，然后經(jīng)過球蛋白運(yùn)輸?shù)礁鱾€(gè)組織。血清中總蛋白含量高是蛋白質(zhì)代謝增強(qiáng)的標(biāo)志[34]；血清中堿性磷酸酶活性是反映細(xì)胞再生能力強(qiáng)弱的指標(biāo)，在發(fā)育迅速的組織中堿性磷酸酶活性高代表細(xì)胞再生能力強(qiáng)[35]；谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是存在于反芻動(dòng)物線粒體中的2種轉(zhuǎn)氨酶，參與動(dòng)物機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝[36]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加4.8 mg/kg硒顯著提高血清中總蛋白、總膽固醇含量，極顯著提高血清乳酸脫氫酶活性，添加1.2 mg/mg硒顯著或極顯著提高血清堿性磷酸酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，而添加0.3 mg/kg則對絕大部分血清生化指標(biāo)沒有顯著影響。Bao等[10]的研究顯示低劑量添加硒對雌性梅花鹿對血清生化指標(biāo)沒有顯著影響，本試驗(yàn)結(jié)果與此一致，王建[26]的研究也得出相似結(jié)果，不同硒添加量對泌乳中期的奶牛血清生化指標(biāo)無顯著影響。

4 結(jié) 論

綜上所述，在以酵母硒為硒源時(shí)，飼糧中硒添加量為0.3 mg/kg時(shí)可不同程度提高生茸期梅花鹿對飼糧中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷和硒的表觀消化率，因此推薦生茸期梅花鹿飼糧適宜的硒添加量為0.3 mg/kg。