飼糧蘇氨酸水平對1～21日齡黃羽肉雞生長性能、胴體品質(zhì)、脂肪代謝和免疫功能的影響

林廈菁 席鵬彬 王一冰 范秋麗 程忠剛 丁發(fā)源 鄭春田 蔣守群

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所，畜禽育種國家重點(diǎn)實驗室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實驗室，廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點(diǎn)實驗室，廣州 2510640)

近些年，優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)飼料匱乏日益嚴(yán)重，價格居高不下。為了節(jié)約蛋白質(zhì)飼料資源、降低飼料成本、減少畜禽養(yǎng)殖業(yè)對環(huán)境的污染，合成氨基酸強(qiáng)化的低蛋白質(zhì)飼糧配制技術(shù)的研究及應(yīng)用日益受到重視，特別是合成賴氨酸、蛋氨酸已普遍用于肉雞配合飼料中，這使得蘇氨酸作為肉雞第三限制性氨基酸[1]，在飼糧中的重要性更為突出。蘇氨酸參與機(jī)體蛋白質(zhì)的合成[2]、免疫應(yīng)答[3]，還具有提高動物生長性能[4]、改善胴體品質(zhì)的作用[5]。當(dāng)前，有關(guān)快大型黃羽肉雞蘇氨酸需要量的研究甚少，而近3年來快大型黃羽肉雞的市場占有率接近50%。因此，本試驗以快大型嶺南黃羽肉雞為研究對象，研究了飼糧蘇氨酸水平對1～21日齡黃羽肉雞生長性能、胴體品質(zhì)、脂肪代謝和免疫功能的影響，并確定不同性別黃羽肉雞的蘇氨酸需要量，為科學(xué)配制黃羽肉雞飼料提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物和分組處理

選用2 000只1日齡健康、發(fā)育良好的快大型嶺南黃羽肉雞雛雞，采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計，根據(jù)體重一致原則將試驗雞分為5個組，每個組8個重復(fù)(公、母各4個重復(fù))，每個重復(fù)50只雞。

1.2 試驗飼糧

試驗采用玉米-花生粕基礎(chǔ)飼糧，營養(yǎng)水平參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)[6]與本單位建立的黃羽肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，參照《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表》(2018年第29版)[7]和實測值設(shè)計飼糧配方。除蘇氨酸外，各組飼糧營養(yǎng)水平均一致，試驗各組飼糧蘇氨酸水平分別為0.60%(基礎(chǔ)飼糧)、0.67%、0.74%、0.81%和0.88%?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

續(xù)表1項目 Items飼糧蘇氨酸水平 Dietary threonine levels/%0.600.670.740.810.88色氨酸 Trp0.190.190.190.190.19異亮氨酸 Ile0.750.750.750.750.75纈氨酸 Val0.850.850.850.850.85精氨酸 Arg1.801.801.801.801.80

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗于廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物科學(xué)研究所試驗場雛雞舍進(jìn)行，采用地面平養(yǎng)，地面鋪放干燥木屑，每個重復(fù)試驗雞飼養(yǎng)于一欄(長3.8 m×寬1.3 m)，欄間用不銹鋼框架和塑料網(wǎng)分隔，各組的飼養(yǎng)環(huán)境條件一致。試驗雞自由采食、飲水，每欄用保溫?zé)艟S持舍溫在32 ℃左右，自然光照并適量限制通風(fēng)。其他按常規(guī)飼養(yǎng)操作規(guī)程飼養(yǎng)，并按常規(guī)免疫程序免疫。試驗期為21 d。

1.4 測定指標(biāo)

1.4.1 生長性能

試驗開始和結(jié)束前1天22：00斷料供水，次日08：00，以重復(fù)為單位準(zhǔn)確稱重，統(tǒng)計耗料量，計算平均日增重、平均日采食量和料重比，試驗過程中每日觀察記錄雞只的健康狀況、采食與排泄物情況。

1.4.2 胴體品質(zhì)和免疫器官指數(shù)

試驗結(jié)束當(dāng)天，每個重復(fù)選接近平均體重試驗雞2只，稱重。去羽毛、腳皮、趾殼、喙殼后稱重，得到屠體重。半凈膛：屠體重去氣管、食道、嗉囊、腸、脾臟、胰臟、膽和生殖器官的重量。全凈膛：半凈膛重去心臟、肝臟、腺胃、肌胃、脂肪及頭、腳的重量。保留心臟、肝臟、腎臟、腺胃、肌胃(去角質(zhì)膜和內(nèi)容物)、腹部脂肪、肌胃周圍的脂肪和肺臟、腎臟的重量。然后再分割胸肌、腿肌和腹脂(含肌胃周圍脂肪)，并稱重，計算以屠體重為基礎(chǔ)的胸肌率、腿肌率和腹脂率。計算以屠體重為基礎(chǔ)的脾臟、胸腺和法氏囊的器官指數(shù)。

1.4.3 血清生化指標(biāo)

試驗結(jié)束時，每個重復(fù)選取接近平均體重的試驗雞2只，使用不含抗凝劑的采血管翅靜脈采血2 mL，3 000 r/min離心15 min，分離血清。試驗雞血清中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和尿酸(UA)含量均使用多功能酶標(biāo)儀(Spectra Max M-5，Molecular Devices公司，美國)測定，相關(guān)試劑盒由南京建成生物工程研究所提供；血清中胰島素(INS)、生長激素(GH)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、胰島素樣生長因子-1(IGF-1)含量測定采用GC-2016γ計數(shù)儀，相關(guān)試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供；血清中免疫球蛋白G(IgG)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量測定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法使用多功能酶標(biāo)儀(Spectra Max M-5，Molecular Devices公司，美國)，相關(guān)試劑盒由江蘇麥莎實業(yè)有限公司提供。

1.4.4 血液細(xì)胞免疫指標(biāo)

每個重復(fù)選取接近平均體重的試驗雞2只，使用含有抗凝劑的采血管翅靜脈采血3 mL常規(guī)分離淋巴細(xì)胞[8]，按照試劑盒說明書加入CD4+和CD8+單克隆抗體(Southern Biotechnology Associates，美國)采用流式細(xì)胞儀(BD Accuri C6 Plus，Becton，Dickinson and Company公司，美國)測定，通過計算得到CD4+/CD8+值。血液中T淋巴細(xì)胞增殖率采用四甲基偶氮苯唑鹽(MTT)法[9]使用多功能酶標(biāo)儀(Spectra Max M-5，Molecular Devices公司，美國)測定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SAS V8.0軟件的GLM程序進(jìn)行方差分析，統(tǒng)計顯著水平為P<0.05，在差異顯著的基礎(chǔ)上采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。對差異顯著的關(guān)鍵評價指標(biāo)采用二次曲線模型[10][Y=aX2+bX+c，Y代表對應(yīng)指標(biāo)測定值，X代表飼糧蘇氨酸水平，a和b分別為回歸方程二次項和一次項的系數(shù)，c為方程的常數(shù)項，X0=-b/(2×a)為飼糧蘇氨酸最適水平]進(jìn)行回歸分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞生長性能的影響

由表2可知，飼糧蘇氨酸水平顯著影響黃羽肉雞公雞、母雞的末重、平均日增重、平均日采食量和料重比(P<0.05)。對于母雞而言，0.88%蘇氨酸水平組試驗雞平均日增重最高，較0.60%、0.67%、0.74%和0.81%蘇氨酸水平組分別提高了41.09%(P<0.05)、12.86%(P<0.05)、2.98%(P>0.05)和4.17%(P>0.05)；0.88%蘇氨酸水平組試驗雞平均日采食量最高，較0.60%、0.67%、0.74%和0.81%蘇氨酸水平組分別提高了22.50%(P<0.05)、7.39%(P<0.05)、2.76%(P>0.05)和3.64%(P>0.05)。對于公雞而言，0.74%蘇氨酸水平組試驗雞平均日增重最高，較0.60%、0.67%、0.81%和0.88%蘇氨酸水平組分別提高了58.05%(P<0.05)、14.27%(P<0.05)、4.69%(P>0.05)和8.11%(P>0.05)；0.74%蘇氨酸水平組試驗雞平均日采食量最高，較0.60%、0.67%、0.81%和0.88%蘇氨酸水平組分別提高了34.94%(P<0.05)、5.83%(P>0.05)、2.83%(P>0.05)和3.56%(P>0.05)?；貧w分析結(jié)果(表3)顯示，飼糧蘇氨酸水平與黃羽肉雞母雞和公雞的平均日增重呈顯著的二次相關(guān)(P<0.05)，根據(jù)平均日增重和平均日采食量回歸方程計算得出黃羽肉雞母雞和公雞飼糧蘇氨酸最適水平均為0.83%和0.79%，根據(jù)料重比回歸方程計算得出黃羽肉雞母雞和公雞飼糧蘇氨酸最適水平分別為0.81%和0.79%。因此，根據(jù)生長性能指標(biāo)，確定黃羽肉雞母雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.81%，黃羽肉雞公雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.79%。

表2 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞生長性能的影響

表3 飼糧蘇氨酸水平與黃羽肉雞生長性能回歸分析

2.2 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞胴體品質(zhì)的影響

由表4可知，飼糧蘇氨酸水平顯著影響黃羽肉雞公雞、母雞的全凈膛率、半凈膛率和腿肌率(P<0.05)。對于母雞而言，0.88%蘇氨酸水平組試驗雞半凈膛率和全凈膛率最高，半凈膛率較0.60%、0.67%、0.74%和0.81%蘇氨酸水平組分別提高了6.82%、3.77%、4.53%和3.69%(P<0.05)，全凈膛率較0.60%、0.67%、0.74%和0.81%蘇氨酸水平組分別提高了10.12%、5.43%、6.50%和5.63%(P<0.05)；0.74%蘇氨酸水平組試驗雞腿肌率最高，較0.60%、0.67%、0.81%和0.88%蘇氨酸水平組分別提高了3.78%(P>0.05)、3.88%(P>0.05)、1.33%(P>0.05)和8.25%(P<0.05)。對于公雞而言，0.81%蘇氨酸水平組試驗雞半凈膛率最高，較0.60%、0.67%、0.74%和0.88%蘇氨酸水平組分別提高了4.86%(P<0.05)、1.97%(P>0.05)、0.39%(P>0.05)和2.64%(P<0.05)；0.74%蘇氨酸水平組試驗雞全凈膛率最高，較0.60%、0.67%、0.71%和0.88%蘇氨酸水平組分別提高了7.77%(P<0.05)、2.76%(P>0.05)、0.72%(P>0.05)和1.01%(P>0.05)；0.74%蘇氨酸水平組試驗雞腿肌率最高，較0.60%、0.67%、0.71%和0.88%蘇氨酸水平組分別提高了2.60%(P>0.05)、2.65%(P>0.05)、5.75%(P<0.05)和4.28%(P>0.05)。飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞母雞和公雞的屠宰率、腹脂率和胸肌率的影響無顯著差異(P>0.05)?；貧w分析結(jié)果(表5)顯示，飼糧蘇氨酸水平與公雞的半凈膛率、全凈膛率呈顯著的二次相關(guān)(P<0.05)，根據(jù)半凈膛率、全凈膛率回歸方程計算得出公雞飼糧蘇氨酸最適水平分別為0.77%和0.79%，飼糧蘇氨酸水平與母雞胴體品質(zhì)各項指標(biāo)均無顯著的二次相關(guān)(P>0.05)。因此，根據(jù)胴體品質(zhì)指標(biāo)，確定黃羽肉雞公雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.77%，黃羽肉雞母雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.88%。

表4 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞胴體品質(zhì)的影響

表5 飼糧蘇氨酸水平與黃羽肉雞酮體品質(zhì)回歸分析

2.3 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表6可知，飼糧蘇氨酸水平顯著影響黃羽肉雞公雞、母雞的胸腺指數(shù)(P<0.05)，對法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)無顯著影響(P>0.05)，其中0.88%蘇氨酸水平組(公雞和母雞)胸腺指數(shù)最高。以免疫器官指數(shù)為判定指標(biāo)，確定黃羽肉雞公雞、母雞飼糧蘇氨酸最適水平均為0.88%。

表6 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.4 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表7可知，飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞血清中UA、T3、T4和IGF-1含量均無顯著影響(P>0.05)，對黃羽肉雞母雞血清中TG、IgG、IL-6和INS含量有顯著影響(P<0.05)，其中0.88%蘇氨酸水平組血清中TG和INS含量最低，0.88%蘇氨酸水平組血清中IL-6和IgG含量最高；飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞公雞血清中LDL、INS、IL-6和IgG含量有顯著影響(P<0.05)，其中0.88%蘇氨酸水平組血清中INS和LDL含量最低，0.88%蘇氨酸水平組血清中IL-6和IgG含量最高。根據(jù)血清生化指標(biāo)確定黃羽肉雞公雞、母雞飼糧蘇氨酸最適水平均為0.88%。

表7 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

2.5 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞血液淋巴細(xì)胞亞群比率和T淋巴細(xì)胞增殖率的影響

由表8可見，飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞外周血T淋巴細(xì)胞CD4+、CD8+和CD4+/CD8+無顯著影響(P>0.05)，但顯著影響血液中T淋巴細(xì)胞增殖率(P<0.05)，且黃羽肉雞母雞和公雞均是0.81%蘇氨酸水平組血液中T淋巴細(xì)胞增殖率最高。因此，以血液T淋巴細(xì)胞增值率為判定指標(biāo)，確定黃羽肉雞公雞、母雞飼糧蘇氨酸最適水平均為0.81%。

表8 飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞血液淋巴細(xì)胞亞群比率和T淋巴細(xì)胞增殖率的影響

3 討 論

3.1 飼糧蘇氨酸水平對1～21日齡快大型黃羽肉雞生長性能的影響

蘇氨酸其代謝產(chǎn)物如丁酰輔酶A、絲氨酸和甘氨酸等能夠促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)的合成并有效沉積[11]。國內(nèi)外均有研究表明，提高飼糧中蘇氨酸水平可以顯著提高1～21日齡肉仔雞的平均日采食量和平均日增重，并顯著降低料重比[12-15]。而當(dāng)飼糧中的蘇氨酸水平不足時會影響肉雞的生長性能，表現(xiàn)為平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率降低[16-17]。本試驗的結(jié)果顯示，當(dāng)蘇氨酸水平低于國標(biāo)(0.76%)20%以上時，會顯著降低黃羽肉雞公雞和母雞的生長性能，而超過0.76%時，黃羽肉雞母雞則表現(xiàn)為生長性能顯著提高，黃羽肉雞公雞則無顯著影響。結(jié)合回歸分析結(jié)果，以生長性能為判定指標(biāo)，黃羽肉雞母雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.81%，黃羽肉雞公雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.79%。研究表明，蘇氨酸可以影響血清中生長激素的合成和分泌從而影響動物的生長性能[18-19]。本試驗的血清生長激素的結(jié)果顯示，各組間無顯著差異，但是黃羽肉雞公雞和母雞之前有較大差異，可能是因為體內(nèi)生長激素水平不同從而導(dǎo)致黃羽肉雞公雞和母雞對于蘇氨酸需求量不同。

3.2 飼糧蘇氨酸水平對1～21日齡快大型黃羽肉雞胴體品質(zhì)的影響

一般認(rèn)為半凈膛率和全凈膛率是衡量雞只產(chǎn)肉性能的主要指標(biāo)，半凈膛率和全凈膛率越高則認(rèn)為產(chǎn)肉性能越好[20]。胸肌和腿肌是肉雞食用的主要部位，胸肌率和腿肌率高表明肉雞胴體品質(zhì)好[21]。飼糧蘇氨酸水平從0.71%升高至0.84%可以顯著提高肉雞的腿肌率[15]。?iftci等[22]研究表明，飼糧中的蘇氨酸水平與腿肌中的粗蛋白質(zhì)含量呈線性正相關(guān)，具有促進(jìn)肉雞肌肉生長的作用。Zhang等[23]研究表明，當(dāng)飼糧蘇氨酸水平由0.60%升高至0.95%時，可以顯著提高1～14日齡北京鴨的胸肌率。本試驗結(jié)果顯示，黃羽肉雞母雞的半凈膛率和全凈膛率均隨著飼糧蘇氨酸水平的升高呈線性升高，且均是0.88%蘇氨酸水平組為最大值，但腿肌率是0.74%蘇氨酸水平組為最大值。黃羽肉雞公雞的半凈膛率和全凈膛率呈顯著的二次相關(guān)，根據(jù)半凈膛率、全凈膛率回歸方程計算得出黃羽肉雞公雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.77%～0.79%，腿肌率的最大值與母雞一致均為0.74%蘇氨酸水平組。由此可見，適宜的飼糧蘇氨酸水平可以加快黃羽肉雞機(jī)體蛋白質(zhì)合成，改善胴體品質(zhì)，黃羽肉雞母雞對于蘇氨酸的需求量要高于公雞。

3.3 飼糧蘇氨酸水平對1～21日齡快大型黃羽肉雞免疫功能的影響

蘇氨酸參與構(gòu)成免疫系統(tǒng)，對機(jī)體免疫器官的發(fā)育有著極為密切的關(guān)系，并且蘇氨酸還是肉雞機(jī)體IgG的主要成分[24]。王紅梅等[25]研究表明，飼糧添加蘇氨酸可以顯著提高1～21日齡肉仔雞免疫器官指數(shù)，并且免疫器官指數(shù)的最大值的蘇氨酸需要量高于最佳生長性能的需要量。侯永清等[26]研究表明，飼糧添加不同水平蘇氨酸能夠顯著影響斷奶仔豬血清中IgG的含量。T淋巴細(xì)胞增殖率是反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加0.54%～0.57%的蘇氨酸能夠顯著提高蛋雞血液中T淋巴細(xì)胞增殖率[27]。IL-6由多種細(xì)胞合成，能夠促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的增殖分化并產(chǎn)生抗體，也能刺激T淋巴細(xì)胞生產(chǎn)，與機(jī)體免疫密切相關(guān)[28]。本試驗結(jié)果顯示，飼糧蘇氨酸水平對黃羽肉雞的胸腺指數(shù)、血清中IL-6和IgG含量以及血液中T淋巴細(xì)胞增殖率有顯著影響，母雞和公雞均是0.88%蘇氨酸水平組胸腺指數(shù)和血清中IL-6和IgG含量最高；0.81%蘇氨酸水平組血液中T淋巴細(xì)胞增殖率最高。以上結(jié)果說明，蘇氨酸對于1～21日齡黃羽肉雞公雞和母雞的免疫功能有提高的作用，并且提高黃羽肉雞公雞的免疫功能的蘇氨酸需要量要高于生長性能，這一點(diǎn)與前人研究結(jié)果吻合。

3.4 飼糧蘇氨酸水平對1～21日齡快大型黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清中TG和LDL等脂類物質(zhì)是衡量機(jī)體脂肪代謝健康水平的重要指標(biāo)[29]，TG含量過高易導(dǎo)致脂肪肝和肥胖等相關(guān)并發(fā)癥[30]，LDL是血液中膽固醇的主要載體，能夠調(diào)節(jié)膽固醇的合成，促進(jìn)脂肪的沉積。INS在機(jī)體糖脂代謝過程具有重要調(diào)節(jié)作用，機(jī)體INS含量提高有利于體脂的儲存，降低體脂的分解[31]。Kobayashi等[32]研究表明，給生長肥育豬飼喂低水平蘇氨酸飼糧會減少其背最長肌的形成以及肌內(nèi)脂肪的沉積。在低蛋白質(zhì)飼糧中添加蘇氨酸能夠降低北京鴨血漿中TG和LDL的含量[33]。其他研究也發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加蘇氨酸可以顯著降低動物血清中TG和LDL含量[34-35]。本試驗的研究結(jié)果顯示，高水平的蘇氨酸(0.81%～0.88%)能夠顯著降低黃羽肉雞血清中TG、LDL和INS的含量，說明蘇氨酸能夠影響黃羽肉雞脂肪代謝，主要表現(xiàn)為促進(jìn)脂肪的分解，但具體調(diào)節(jié)機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究。

4 結(jié) 論

① 在本試驗條件下，飼糧補(bǔ)充適宜水平的蘇氨酸可提高1～21日齡快大型黃羽肉雞公雞和母雞的生長性能、胴體品質(zhì)和免疫功能，對機(jī)體的脂肪代謝有顯著影響。

② 以生長性能為主要判定指標(biāo)，確定1～21日齡黃羽肉雞母雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.81%，黃羽肉雞公雞飼糧蘇氨酸最適水平為0.79%。