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      高危型人乳頭狀瘤病毒在子宮頸癌篩查中雜交捕獲定量分型技術(shù)的應(yīng)用

      2021-05-19 03:52:26吳欽生邵貴珠
      實驗與檢驗醫(yī)學(xué) 2021年2期
      關(guān)鍵詞:子宮頸癌危型鱗狀

      吳欽生,邵貴珠

      (江西省婺源縣婦幼保健院檢驗科,江西 婺源 333200)

      宮頸癌屬于現(xiàn)代最常見的婦科惡性腫瘤,人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染是目前公認導(dǎo)致宮頸癌和癌前病變主要因素,大部分宮頸癌細胞都能夠檢測到HPV-DNA。高危型人乳頭狀瘤病毒感染和現(xiàn)代宮頸癌發(fā)病年輕化具有密切關(guān)系,HPV 檢測已經(jīng)成為宮頸癌篩查主要方法。第二代雜交捕獲定量技術(shù)(HC2)能夠?qū)κN高危型人乳頭狀瘤病毒進行檢測,但是其無法分型。第三代雜交捕獲定量分型(DH3)不僅能夠?qū)κ姆N高危型HPV 進行定量的檢測,還能夠?qū)PV16/18 型進行分型檢測[1]。本文對使用雜交捕獲定量分型技術(shù)對高危型人乳頭狀瘤病毒在宮頸癌篩查中的使用進行分析,報告如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 選擇 2018 年 1 月-2019 年 1 月我院門診和住院宮頸病變患者200 例, 排除宮頸癌前病變及宮頸癌史、無子宮全切史及妊娠。患者年齡為18~86 歲,患者就診原因包括陰道分泌物異常與接觸性出血史、要求婦科體檢。使用雙盲法實現(xiàn)HC2 和 DH3 高危型 HPV 的監(jiān)測,TCT 結(jié)果顯示意義不明確非典型鱗狀細胞的患者,對患者進行陰道鏡下宮頸活檢病理檢查。

      1.2 方法 通過培訓(xùn)婦科醫(yī)生進行取樣,使用液基細胞學(xué)取樣器,在宮頸管內(nèi)旋轉(zhuǎn)四圈,放置到液基細胞保存液中,送到病理科檢查。之后使用HPV 采樣器在宮頸管中同個方向旋轉(zhuǎn)三周,每個患者取樣三份,放置到樣品保存液中,保存溫度為4℃。兩份樣品試用DH3 和HC2 試劑盒對人乳頭狀瘤病毒進行檢測,能夠判斷 2 種(HPV、18 型)與 12 種(HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68 型)陽性結(jié)果,并且提示病毒載量。(比值≥1 表示陽性,比值為0.8~2.0 之間樣本為參考值附件樣本,具有波動性,臨界值表示為2)[2]。

      在子宮頸細胞學(xué)檢查過程中,使用英碩力新伯氏科技有限公司,利用TCT 專用的取樣刷,通過棉簽將子宮頸外口的分泌物進行擦拭,放置取樣刷在子宮頸中,順時針旋轉(zhuǎn)四圈,直接使取樣刷放置到Thinprep 保存液小瓶液中進行攪拌、 漂洗和送檢。根據(jù)2001 年TBS 系統(tǒng)實現(xiàn)診斷,主要包括正常、炎癥、無法明確意義的非典型鱗狀上皮細胞(ASC-US)、低度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(LSIL)、不除外高度病變非典型鱗狀上皮細胞(ASC-H)、高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(HSIL)[3]。

      利用Lecai MZ6 型的電子陰道鏡,通過宮頸疾病診療中心??漆t(yī)生實現(xiàn)檢查,實現(xiàn)可疑病灶陰道鏡定位中活檢,如果沒有出現(xiàn)異?;蛘邎D像不滿意,那么使子宮頸多點活檢或者頸管搔刮送檢,利用金科威 HF-120B 型 LEEP 儀器[4]。

      1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 本文數(shù)據(jù)均使用SPSS 20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理,利用表示計量資料,通過t 進行檢驗,使用百分比表示計數(shù)資料,通過χ2進行檢驗,P<0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 DH3 和 HC2 對 HPV 的檢測結(jié)果 在 200 例宮頸脫落細胞樣本檢測過程中, 使用HC2 方法檢測出24 例HPV 陽性,檢出率為12%。使用DH3 方法檢出28 例HPV 陽性,檢出率為14%,其中HPV16、18 型陽性者共有10 例,占據(jù)35.7%,其他 12 型陽性者有18 例,占據(jù)64.2%。

      2.2 兩種檢測結(jié)果的符合率 在200 例樣本中,12例樣本DH3 與HC2 結(jié)果不符合,其中有4 例樣本處于臨界值0.8~2.0 中,負荷量比較低,所以排除4例之后再次統(tǒng)計,符合率為98%(196/200)。

      2.3 兩種檢測結(jié)果不一致的樣本 在8 例樣本中,2 例 HC2 陽性,但是 DH3 陰性;6 例 HC2 陰性,但是DH3 陽性,見表1。

      表1 8 例樣本的檢測不一致樣本結(jié)果

      2.4 TCT 檢查、 病理和 HPV 結(jié)果關(guān)系 在 200 例TCT 檢查過程中, 正常的有 180 例,10 例 ASCU,6例LSIL,4 例 HSIL。20 例細胞學(xué)異常人員進行陰道鏡下宮頸活檢,病理結(jié)果表示10 例宮頸慢性炎癥,4 例 LSIL,4 例 HSIL,2 例宮頸癌。

      3 討論

      高危型HPV 感染為子宮頸癌主要的原因,13種高危型HPV 感染人員中有一部分會發(fā)展成為子宮頸癌前病變, 所以對高危型HPV 感染定期的檢查能夠?qū)ψ訉m頸癌發(fā)病風(fēng)險進行判斷,還是濃縮子宮頸癌高危人群與癌前病變主要的手段。目前,國際中對HPV 檢測的主要方法就是HC2 方法,其為HPV 檢測評價的金指標,但是,此方法能夠為13 種高危HPV 監(jiān)測,不同型別HPV 陽性的意義各不相同,所以臨床就要進行HPV 分型檢查,連續(xù)的檢查會提高患者的經(jīng)濟費用,使患者的確診時間延誤[5]。DH3 檢測不僅能夠?qū)崿F(xiàn)人乳頭狀瘤病毒的定量檢測,還能夠?qū)PV16、18 型實現(xiàn)風(fēng)險分層檢測。通過本文研究結(jié)果表示, 本文使用的HC2 試劑盒與DH3 試劑盒對200 例宮頸脫落細胞HPV DNA 進行檢測,表示兩種方法符合率都為98%,以此說明DH3 和HC2 檢測結(jié)果具有較高的符合率, 能夠為臨床監(jiān)測高危型HPV 提供手段[6]。

      子宮頸癌的病變研究具有一定突破性的進展,HR-HPV 感染為發(fā)生子宮頸癌的主要條件。HR-HPV 感染子宮頸上皮細胞之后,DNA 就會到宿主細胞中整合,HR-HPV 致病基因E6-E7 就會開始表達,產(chǎn)物不僅能夠朝著轉(zhuǎn)化細胞進行轉(zhuǎn)化,并且能夠和細胞調(diào)控蛋白進行作用,對細胞正常周期造成影響,使細胞無限制的生長,導(dǎo)致癌癥的出現(xiàn)。通過HR-HPV 感染子宮頸癌是比較漫長和持續(xù)的過程,可以長達10~15 年,但是有25%患者在五年之內(nèi)就會發(fā)生成為浸潤癌[7]。大部分患者在感染18 個月之后利用自身免疫能夠清除病毒,小部分患者在HR-HPV 持續(xù)感染之后就會出現(xiàn)子宮頸低度鱗狀上皮內(nèi)病變或者高度鱗狀上皮內(nèi)病變,還會朝著子宮頸癌發(fā)展[8]。相關(guān)研究結(jié)果表示,HRHPV 持續(xù)感染和子宮頸癌相對危險度會提高250倍。通過本文研究結(jié)果表示,在TCT 檢測細胞病程不斷加重的過程中,HPV 陽性率也在不斷的提高,滿足持續(xù)HR-HPV 陽性和子宮頸病變演進相關(guān)研究結(jié)論的關(guān)系[9]。

      本文200 例宮頸脫落細胞樣本檢測過程中,使用HC2 方法檢測出24 例HPV 陽性, 檢出率為12%。使用 DH3 方法檢出 28 例 HPV 陽性,檢出率為14%,其中 HPV16、18 型陽性者共有 10 例,占據(jù)35.7%,其他 12 型陽性者有 18 例,占據(jù) 64.2%。陽性預(yù)測值代表了檢出陽性結(jié)果和患病率具有密切關(guān)系,陽性結(jié)果中的患者越多,那么就表示陽性預(yù)測值越高[10-12]。本文使用兩種方法的HPV 檢測陰性預(yù)測值都比較高,也就是HPV 檢測結(jié)果為陰性能夠?qū)⒒甲訉m頸高度上皮內(nèi)瘤病變可能進行排除[13]。

      DH3 在使用過程中的高度宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變的預(yù)測靈敏度比較高,但是準確性、特異度、陽性與陰性的預(yù)測值都比較高,并且價格比較低,一次能夠檢測多型并且實現(xiàn)定量分型檢測,結(jié)果能夠協(xié)助于臨床診斷[14,15]。

      綜上所述,HC2 和DH3 對高危型人乳頭狀瘤病毒檢測過程中具有較高的符合率,能夠?qū)㈦s交捕獲定量分型技術(shù)作為宮頸癌初篩中的有效手段。

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