復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性的相關(guān)性分析

姜麗麗 羅 慧 胡雅平 李朝彬 李 濤 李 想 馮永琦*

1.陜西省寶雞市婦幼保健院(721000)；2.陜西省榆林市星元醫(yī)院

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)也叫做習(xí)慣性流產(chǎn)，受年齡、環(huán)境、身體素質(zhì)、疾病等多重因素影響，占所有流產(chǎn)因素的20%[1]。病因未完全闡明，目前研究側(cè)重于母體方面，并認(rèn)為50%以上與胚胎染色體異常有關(guān)，但仍有較多復(fù)發(fā)性流產(chǎn)無法找到病因[2]。胚胎由男性提供一半遺傳物質(zhì)，因此精子狀態(tài)也可能是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要影響因素[3]。文獻(xiàn)[4-5]提示精子畸形率和DNA損傷極有可能造成男性不育，且隨著年齡的增大，精子畸形和DNA完整性下降的可能性也越高。本研究對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性的相關(guān)性進(jìn)行分析，為臨床復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的治療和預(yù)防提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月-2019年6月本院治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的配偶男性為流產(chǎn)組。納入標(biāo)準(zhǔn)：與同一配偶發(fā)生≥2次流產(chǎn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①染色體異常、有免疫系統(tǒng)疾病；②配偶妊娠期綜合征及其他疾??；③生殖系統(tǒng)疾病；④心血管疾病或其他重大疾病。同時選取有正常生育史男性為對照組，其女方在一年內(nèi)均有正常生育。本研究獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)，受試者均知情同意。

1.2 實驗方法

精液收集后保存于液氮中待檢，每個樣品共取5000～10000條精子。常規(guī)分析男子精液，檢測儀器為北京偉力科技發(fā)展公司生產(chǎn)的偉力WLJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，通過Kruger標(biāo)準(zhǔn)評定精子畸形率。樣本吖啶橙染色精子DNA染色體檢測選用Calibur公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀，488nm波長測定DNA完整性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組精液常規(guī)參數(shù)比較

流產(chǎn)組150例，年齡(28.9±3.1)歲，女方年齡(22～28)歲；對照組150例，年齡(28.8±3.2)歲，女方年齡(22～28)歲。兩組無差異(P>0.05)。對照組精子活率、A級百分比、精子濃度、前向運動精子均高于流產(chǎn)組(P<0.05)。見表1。

2.2 兩組精子畸形率比較

流產(chǎn)組頭部畸形率、尾部畸形率均高于對照組(P<0.05)，精子頸部和中斷兩組無差異(P>0.05)。見表2。

表1 兩組精液常規(guī)參數(shù)比較

表2 兩組精子畸形率比較

2.3 兩組精子DNA完整性比較

流產(chǎn)組精子碎片率(DFI)值(28.5±2.35%)高于對照組(13.4±1.27%)(t=69.23，P=0.000)。

2.4 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)數(shù)據(jù)分析顯示，精子畸形率(r=-0.347,P=0.026)、精子活動率(r=-0.534,P=0.008)和DFI(r=0.512,P=0.000)與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)。

3 討論

臨床對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因確定者僅占50%，主要包括染色體異常、母體生殖道異常、母體內(nèi)分泌異常、免疫功能異常、生殖道感染、宮頸機(jī)能不全及血栓形成傾向等[6-7]。目前關(guān)于復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因男方因素研究相對較少，精子異常可能影響胚胎繼續(xù)發(fā)育進(jìn)而導(dǎo)致胚胎停育或流產(chǎn)[8-9]。

精液常規(guī)分析是臨床評估男性生育力的基本檢測手段，對男性“少精弱精癥”誘發(fā)的不育具有一定診斷價值[10-11]。 但在女性流產(chǎn)中，精液常規(guī)參數(shù)與胚胎丟失的相關(guān)性尚存在分歧[12]。本研究發(fā)現(xiàn)對照組精子活動、A級百分比、精子濃度和前向運動率均高于流產(chǎn)組。精子載有男性的遺傳信息，無損傷、高質(zhì)量的精子是父系遺傳信息完整傳遞給子代的前提[13-14]。本研究流產(chǎn)組頭部畸形率、尾部畸形率均高于對照組，精子頸部和中斷無差異，精子畸形率略高于對照組，DFI值高于對照組，表明流產(chǎn)組DNA碎片化程度較大。精子DNA損傷即精子DNA發(fā)生單鏈或雙鏈斷裂，主要由精索靜脈曲張、化療、放療、吸煙、氧化應(yīng)激反應(yīng)、電離輻射、魚精蛋白缺乏等原因造成[15]。DNA受損的精子仍可受精，而精卵結(jié)合后卵母細(xì)胞具有修復(fù)精子DNA的功能，如完全修復(fù)，則受精卵繼續(xù)發(fā)育，可正常妊娠分娩[16]。但如果精子DNA損傷嚴(yán)重，或卵母細(xì)胞修復(fù)能力減弱，結(jié)果可能導(dǎo)致流產(chǎn)、胚胎停育或畸形[17-18]。說明健康男性的精子質(zhì)量普遍高于具有復(fù)發(fā)性流產(chǎn)史男性，這也提示精子質(zhì)量對改善復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有潛在作用。

本研究發(fā)現(xiàn)精子畸形率、精子活動率和DFI與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)，提示提高男性精子質(zhì)量可以有效避免復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。為預(yù)防復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，建議孕前檢查精子畸形率和DNA完整性。自然受精和體外受精需要精子識別并穿透包繞卵子的顆粒細(xì)胞和透明帶的黏液基質(zhì)，透明質(zhì)酸是卵子和透明帶黏液基質(zhì)的主要成分，精子與卵子透明質(zhì)酸結(jié)合，繼而實現(xiàn)穿透與受精。但是精子僅在成熟后才能獲得與透明質(zhì)酸結(jié)合的能力，不成熟的精子不具備與透明質(zhì)酸結(jié)合的能力，導(dǎo)致受精失敗，而精子畸形率或DNA完整性較差多會造成患者精子成熟可能性較低，這也可能是導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的原因之一[19-20]。

綜上所述，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性密切相關(guān)，提高男性精子質(zhì)量可以有效避免復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。