Nodal在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義

(山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，山東 臨沂 276000)

據(jù)美國癌癥協(xié)會統(tǒng)計(jì)，乳腺癌(Breast cancer)是當(dāng)前女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，占女性全部惡性腫瘤的30%[1]，且年輕化趨勢逐年遞增[2]。近幾年，乳腺癌的綜合治療已取得了突破，但其侵襲性及術(shù)后復(fù)發(fā)率仍然較高。因此，研究乳腺癌的發(fā)病機(jī)制以及可能的治療靶點(diǎn)具有重要意義。

Nodal是轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)超家族成員之一，其作為胚胎形成的重要調(diào)節(jié)因子，參與了中胚層與內(nèi)胚層之間的形成，前-后體軸位置的確定及左-右體軸的特化等一系列關(guān)鍵性事件[3]。在Nodal信號通路中，Nodal被分泌至胞外，與受體結(jié)合形成復(fù)合物，磷酸化后激活細(xì)胞內(nèi)Smad2和Smad3蛋白，Smad2/3復(fù)合物再與Smad4結(jié)合形成具有活性的三聚體轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核內(nèi)，與一些轉(zhuǎn)錄因子、輔激活物或輔阻遏物結(jié)合，來調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄，參與細(xì)胞的生長與分化過程。研究發(fā)現(xiàn)[4]，Nodal在腫瘤細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變過程中發(fā)揮作用，Nodal蛋白在惡性腫瘤如黑色素瘤、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌和前列腺癌中表達(dá)顯著增加，且與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)[5-8]。因此，本研究通過檢測Nodal蛋白在乳腺癌和癌旁組織中的表達(dá)情況，分析它與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系，探討Nodal蛋白在乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展過程中可能的作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者組織95例和癌旁組織40例，均為女性，年齡25～85歲，中位年齡58歲。組織學(xué)分級：Ⅰ級8例，Ⅱ級54例，Ⅲ級33例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移44例，未轉(zhuǎn)移51例。所有病例均為首發(fā)病例，術(shù)前均未行放化療、靶向治療及其他的抗腫瘤治療。

1.2方法

1.2.1免疫組織化學(xué) 將組織的蠟塊制成4μm的連續(xù)性切片，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。具體步驟如下：將待檢組織蠟塊制成石蠟切片，將組織切片置于60℃恒溫箱內(nèi)過夜，脫蠟、水化，滅活，抗原修復(fù)，蒸餾水水洗，滴加一抗工作液，滴加聚合物增強(qiáng)劑(試劑A)，加酶標(biāo)抗鼠/兔聚合物(試劑 B)，DAB顯色-蘇木素復(fù)染，鹽酸分化，氨水返藍(lán)，浸入86%、95%、100%梯度酒精中脫水，二甲苯I、Ⅱ、Ⅲ中各透明，干燥后中性樹膠封片，光學(xué)顯微鏡下觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)用PBS溶液代替一抗做陰性對照，用已知的陽性組織切片做陽性對照。

1.2.2染色結(jié)果判斷 由兩位病理醫(yī)生獨(dú)立判讀Nodal的表達(dá)情況。Nodal蛋白陽性染色定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)中。

2 結(jié)果

82.1%(78/95)的乳腺癌和12.5%(5/40)的癌旁組織中Nodal蛋白陽性表達(dá)。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，Nodal蛋白的表達(dá)與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織學(xué)分級之間顯著相關(guān)。見表1。

表1 Nodal蛋白在乳腺癌中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

腫瘤細(xì)胞在惡性轉(zhuǎn)化的過程中，高侵襲性的腫瘤細(xì)胞和胚胎期的原始細(xì)胞有很多共性。具有胚胎前體細(xì)胞特性的惡性腫瘤細(xì)胞可通過自身的分子標(biāo)志物使其具有去分化、多分化潛能的特性，乳腺癌也不例外。目前，隨著早期診斷、放療與化療、內(nèi)分泌治療和分子靶向治療等手段的應(yīng)用，使乳腺癌患者的死亡率呈現(xiàn)了下降趨勢，但乳腺癌的侵襲性、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及患者術(shù)后復(fù)發(fā)仍是困擾臨床醫(yī)生的難題。

Nodal的表達(dá)僅限于胚胎組織，人類胚胎干細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞，特別是在分化程度較低且惡性程度高的腫瘤細(xì)胞中[9]。這表明Nodal除了在早期祖細(xì)胞和生殖細(xì)胞表達(dá)外，在腫瘤的形成過程中也會表達(dá)。研究表明[5-8]，Nodal在惡性腫瘤如黑色素瘤、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌和前列腺癌中表達(dá)顯著增加，并且與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。周慧俊等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在胃腺癌中Nodal的表達(dá)與血管浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)分析了Nodal的表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系中發(fā)現(xiàn)，Nodal的表達(dá)與ER、PR、HER2的表達(dá)和增殖指數(shù)Ki67之間的比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織學(xué)分級之間的比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。推測Nodal可能在促進(jìn)乳腺癌的惡性發(fā)展過程中發(fā)揮作用。

綜上所述，Nodal蛋白在乳腺癌中的表達(dá)顯著升高，可能在促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展過程中發(fā)揮作用。通過研究Nodal蛋白在乳腺癌發(fā)生與發(fā)展過程中的作用，為乳腺癌的早期診斷、治療提供新的思路和靶點(diǎn)。