胸腺五肽聯(lián)合微波療法對尖銳濕疣患者血清GM-CSF、Lpo表達(dá)水平及免疫功能的影響

歐麗娜，岳賽，黎倩

（1.湘南學(xué)院附屬醫(yī)院，湖南郴州423000；2.廣州南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院，廣東廣州510000）

微波療法等物理及化療治療措施在尖銳濕疣（Condyloma acuminatum，CA）中較常用，但治療后復(fù)發(fā)率較高，且疣體清除率較低，治療期間患者多較痛苦，且對疣體面積及部位有高選擇性，治療周期長、易對真皮層造成損傷，加之治療后易發(fā)生瘢痕形成、潰瘍、出血等，故導(dǎo)致其臨床應(yīng)用存在局限性[1-3]。臨床發(fā)現(xiàn)，CA發(fā)病及進(jìn)展與免疫功能缺陷關(guān)系密切，故疾病治療過程中免疫調(diào)節(jié)有重要意義[4-6]。胸腺五肽為臨床常用藥物，可促進(jìn)機(jī)體T細(xì)胞分化成熟，提升其對抗原等相關(guān)刺激反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力[7]。此外，粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子（GM-CSF）、脂質(zhì)過氧化物（Lpo）在 CA 發(fā)生及進(jìn)展中也有所參與，但臨床關(guān)于微波療法及胸腺五肽在CA中聯(lián)合應(yīng)用價值及對血清GM-CSF、Lpo表達(dá)影響的研究較少?；诖耍狙芯砍醮芜x取我院CA患者102例，探討微波療法及胸腺五肽治療效果及機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年10月—2019年1月我院CA患者102例，將符合標(biāo)準(zhǔn)患者按照1∶1分配，依據(jù)就診順序每例患者賦予1位隨機(jī)數(shù)，其中1～51號為研究組，52～102號為對照組。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)通過，且2組性別、年齡、病程、疣體數(shù)目、疣體直徑、疣體位置等基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 2組一般資料比較 例（%）

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合《尖銳濕疣診療指南（2014）》[8]中尖銳濕疣診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡＜60歲；③醋酸白試驗(yàn)結(jié)果呈陽性；④依從性好，可按要求配合試驗(yàn)研究；⑤知曉本研究并簽署同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①合并腎肝等臟器器質(zhì)性病變；②長期采取免疫調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)類固醇激素；③納入研究前2周內(nèi)采取手術(shù)或全身藥物治療；④哺乳期及妊娠期女性；⑤過敏體質(zhì)及對研究藥物有過敏史；⑥合并其他免疫系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)病變；⑦瘢痕體質(zhì)；⑧既往采取心臟起搏器者。

1.3 方法

1.3.1 對照組 采取微波療法，設(shè)備選取上海維世康微波治療儀醫(yī)用電子有限公司MTC-3B型微波治療儀，設(shè)定頻率為（2 450±50）MHz、輸出時間為0～100 s、輸出功率為 0～100 W；皮膚消毒，疣體經(jīng)利多卡因（2%）實(shí)施皮下浸潤麻醉，參照疣體形狀、大小，選取雙極或單極輻射探頭，針形探頭插至疣體中央基底處，腳踏式啟動定時器控制操作時間，維持3 s，疣體發(fā)生收縮、變小、變白、變硬、變暗，探頭拔出，余熱可造成變硬疣體炭化，經(jīng)紗布輕擦祛除疣體，對疣體基底實(shí)施再次炭化，避免復(fù)發(fā)，凝固范圍較疣體大約0.2 cm；涂抹金霉素眼霜，加速創(chuàng)面愈合，避免感染。

1.3.2 研究組 于對照組基礎(chǔ)上采取胸腺五肽（北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20058462），肌肉注射1 mg/d，共治療4周。

1.3.3 檢測方法 抽取空腹靜脈血4mL，3000r/min（離心半徑5 cm）離心10 min，取上清液，以美國Bio-RAD公司Bio-RAD550型酶標(biāo)儀與配套試劑盒經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法測定GM-CSF及Lpo、Th1/Th2 指標(biāo)[白細(xì)胞介素（IL）-10、IL-4、IL-2、干擾素（IFN）-γ]水平；以流式細(xì)胞儀測定T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）水平。

1.4 觀察指標(biāo) ①統(tǒng)計(jì)2組臨床療效，病灶徹底消失，無瘢痕，皮損愈合，治療后3個月無新病損出現(xiàn)為治愈；②病灶數(shù)目顯著減少，疣體面積縮小>70%為顯效；③病灶數(shù)目減少，疣體面積縮小30%～70%為好轉(zhuǎn)；④未至上述標(biāo)準(zhǔn)為無效。

總好轉(zhuǎn)率=（治愈例數(shù)+顯效例數(shù)+好轉(zhuǎn)例數(shù)）/總病例數(shù)×100%[9]。①統(tǒng)計(jì)2組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）水平。②統(tǒng)計(jì)2組治療前后Th1/Th2指標(biāo)水平。③統(tǒng)計(jì)2組治療前后血清GM-CSF及Lpo表達(dá)情況。④統(tǒng)計(jì)2組治療前后性生活質(zhì)量，依據(jù)中文版CA性生活質(zhì)量評定表（CECA10）評估，分值范圍10～50分，分值越高越好。⑤隨訪1～6個月，統(tǒng)計(jì)疾病復(fù)發(fā)率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 通過SPSS 22.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料（±s）表示，t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料例（%）表示，χ2檢驗(yàn)，采用K-M曲線分析治療后6個月內(nèi)復(fù)發(fā)情況，采用Log-Rank檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效 研究組總有效率（94.12%）高于對照組（80.39%，P＜0.05）。見表 2。

表2 2組臨床療效比較 例（%）

2.2 T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo) 治療前2組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后 2 組 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較治療前增高，CD8+水平較治療前降低，且研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平高于對照組，CD8+水平低于對照組（P＜0.05）。見表 3。

表3 2組T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)比較 （±s）

表3 2組T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)比較 （±s）

時間組別nCD3+（%）CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+治療前 研究組 51 55.52±6.63 30.38±4.01 30.14±4.35 1.01±0.23對照組 51 54.61±5.97 29.91±3.98 30.40±4.14 0.98±0.22 t 0.728 0.594 0.309 0.673 P 0.468 0.554 0.758 0.502治療后 研究組 51 62.86±7.01 38.15±3.99 24.71±4.09 1.54±0.51對照組 51 58.92±6.79 34.69±4.20 27.23±3.81 1.27±0.44 t 2.883 4.265 3.220 2.863 P 0.005 ＜0.001 0.002 0.005

2.3 Th1/Th2指標(biāo) 治療前2組血清IL-10、IL-4、IL-2、IFN-γ 水平間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后 2組 IL-10、IL-4水平較治療前降低，IL-2、IFN-γ水平較治療前增高，且研究組IL-10、IL-4水平低于對照組，IL-2、IFN-γ水平高于對照組（P＜0.05）。見表4。

表4 2組Th1/Th2指標(biāo)比較 （pg/mL，±s）

表4 2組Th1/Th2指標(biāo)比較 （pg/mL，±s）

時間 組別 n IL-10 IL-4 IL-2 IFN-γ治療前 研究組 51 17.44±5.03 25.96±5.69 36.79±6.89 1.59±0.66對照組 51 17.91±4.81 26.23±6.01 37.21±7.08 1.63±0.63 t 0.482 0.233 0.304 0.313 P 0.631 0.816 0.762 0.755治療后 研究組 51 11.06±3.23 15.54±4.06 49.02±8.31 3.55±1.02對照組 51 14.78±3.69 20.38±5.11 43.67±7.89 2.01±0.91 t 5.417 5.296 3.334 8.046 P＜0.001 ＜0.001 0.001 ＜0.001

2.4 GM-CSF及Lpo 治療前2組GM-CSF及Lpo血清水平間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后2組GM-CSF及Lpo血清水平較治療前降低，且研究組低于對照組（P＜0.05）。見表5。

表5 2組GM-CSF及Lpo治療前后比較 （±s）

表5 2組GM-CSF及Lpo治療前后比較 （±s）

組別 n GM-CSF（ng/L） Lpo（mg/mL）治療前 治療后 治療前 治療后研究組 51 323.41±101.26 140.24±45.10 27.96±3.39 19.65±3.08對照組 51 319.83±100.79 171.26±51.80 28.13±3.71 23.95±3.52 t 0.179 3.225 0.242 6.565 P 0.858 0.002 0.810 ＜0.001

2.5 性生活質(zhì)量 治療前2組CECA10分值間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后2組CECA10分值較治療前增高，且研究組高于對照組（P＜0.05）。見表6。

表6 2組CECA10分值比較 （分，±s）

表6 2組CECA10分值比較 （分，±s）

組別 n 治療前 治療后 t P研究組 51 24.69±4.91 39.30±5.61 13.995 ＜0.001對照組 51 25.08±5.10 34.68±5.23 9.385 ＜0.001 t 0.393 4.302 P 0.695 ＜0.001

2.6 復(fù)發(fā)率 治療后1個月、3個月研究組疾病復(fù)發(fā)率（1.96%、1.96%）與對照組（5.88%、9.80%）間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后6個月研究組疾病復(fù)發(fā)率（3.92%）低于對照組（15.69%，P＜0.05）。經(jīng)log-Rank檢驗(yàn)，觀察組復(fù)發(fā)率低于對照組（χ2=8.854，P=0.003），見表 7、圖 1。

表7 2組疾病復(fù)發(fā)率比較 例（%）

圖1 K-M曲線

3 討論

CA為臨床多發(fā)性傳播疾病，有反復(fù)發(fā)作特性，如何降低疾病復(fù)發(fā)率、提高整體治療效果仍是研究熱點(diǎn)[10-11]。微波療法為CA重要物理治療措施，其治療作用主要通過熱效應(yīng)與加熱選擇性實(shí)現(xiàn)，臨床常用生物熱效應(yīng)經(jīng)熱傳導(dǎo)形式致熱，屬外部加熱，而微波則是將生物組織自身作熱源進(jìn)行內(nèi)部加熱，組織內(nèi)極性分子隨微波頻率高速轉(zhuǎn)動，極性分子間有磁阻對振蕩造成阻尼作用，以此消耗微波熱量、生熱[12-13]。機(jī)體各個組織介電常數(shù)存在差異性，而微波療法加熱具備選擇性，病變組織較正常組織對微波吸收能力較強(qiáng)，升溫較快，通過這些熱量可使疣體固縮及炭化，從而達(dá)到治療目的。

機(jī)體免疫功能，尤其是細(xì)胞免疫，在CA發(fā)病及進(jìn)展等過程中有重要調(diào)節(jié)作用，其中T淋巴細(xì)胞為細(xì)胞免疫重要效應(yīng)細(xì)胞，其表達(dá)情況可反應(yīng)機(jī)體免疫狀態(tài)穩(wěn)定性[14-15]。正常生理狀態(tài)下，T淋巴細(xì)胞亞群可通過分泌細(xì)胞因子互相作用保持一定穩(wěn)定、平衡狀態(tài)，其失衡則會造成免疫抑制，影響疾病良好轉(zhuǎn)歸。此外，Th1細(xì)胞主要包括IL-2、IFN-γ，可經(jīng)巨噬細(xì)胞依賴性免疫反應(yīng)，提升殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，并介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答；Th2細(xì)胞主要包括IL-4、IL-10，其能促進(jìn)IgE介導(dǎo)的體液免疫反應(yīng)，機(jī)體中抗病毒感染主要以Th1細(xì)胞所介導(dǎo)細(xì)胞免疫為主，而Th1/Th2間平衡對機(jī)體免疫應(yīng)答有重要調(diào)節(jié)作用[16-18]。因此推測，通過調(diào)節(jié)CA患者免疫功能狀態(tài)，利于提升疾病治療效果、減少復(fù)發(fā)。胸腺五肽是胸腺生成素重要成分，可有效模擬胸腺生成素Ⅱ生理功能。胸腺五肽為雙向調(diào)節(jié)免疫制劑，可使過強(qiáng)或遭受抑制免疫反應(yīng)趨向正常，能通過結(jié)合于外周血T細(xì)胞特異受體，增高胞內(nèi)cAMP水平，促使和誘導(dǎo)T細(xì)胞分化及成熟，改善細(xì)胞免疫功能。楊憲魯?shù)萚19]研究結(jié)果顯示，復(fù)發(fā)性CA患者在5-氨基酮戊酸光動力療法基礎(chǔ)上采取胸腺五肽治療后，IL-23及IL-17明顯降低。而本研究初次聯(lián)合微波療法與胸腺五肽對CA患者實(shí)施干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)研究組總有效率高于對照組，T淋巴細(xì)胞指標(biāo)及Th1/Th2指標(biāo)水平優(yōu)于對照組，且CECA10分值高于對照組，而治療后6個月疾病復(fù)發(fā)率低于對照組。分析其原因主要在于：微波治療可通過一定頻率電磁波照射皮損部位，對組織細(xì)胞活性予以抑制，炭化病變部位，損壞結(jié)構(gòu)組織，而聯(lián)合胸腺五肽可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài)，二者發(fā)揮協(xié)同作用，進(jìn)一步提升疾病治療效果與預(yù)后。

此外，本研究還對CA患者經(jīng)微波療法及胸腺五肽治療前后GM-CSF及Lpo血清表達(dá)情況進(jìn)行初次探究，結(jié)果顯示，治療后研究組GM-CSF及Lpo血清水平低于對照組。GM-CSF屬炎性反應(yīng)敏感標(biāo)志物，于炎性反應(yīng)過程中由受損內(nèi)皮細(xì)胞所生成，為多肽類激素樣造血生長因子，具備促使造血祖細(xì)胞分化為單核巨噬細(xì)胞能力[20]。賀迎霞等[21]研究指出，作為一種炎性反應(yīng)重要標(biāo)志物，GM-CSF在CA發(fā)病及進(jìn)展中有重要作用。而Lpo為不飽和脂肪酸在自由基作用后生成的過氧化物，Lpo和氧自由基可損壞細(xì)胞功能及生物膜，抑制免疫。同時，Lpo可損壞DNA及RNA，和多種疾病發(fā)生及進(jìn)展均有密切關(guān)聯(lián)性，可將其用于CA的診斷及療效、預(yù)后評估[22]。因此上述結(jié)果可表明，微波療法及胸腺五肽聯(lián)合干預(yù)方案，在降低CA患者GM-CSF及Lpo血清含量方面有顯著優(yōu)勢，利于減輕炎性反應(yīng)及損傷，對保證預(yù)后有積極作用。

綜上所述，聯(lián)合采取微波療法及胸腺五肽治療CA，可有效提高疾病治療效果及性生活質(zhì)量，降低疾病復(fù)發(fā)率，可能是因該方案可有效調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡及血清GM-CSF及Lpo表達(dá)情況、改善機(jī)體免疫功能。但本研究屬單中心樣本研究，且樣本較少，因此研究結(jié)果是否具備廣泛效力仍需進(jìn)一步探究證實(shí)。