選擇性溶劑提取—旋光法測定薄荷油-β-環(huán)糊精包合物油利用率*

陳愷悅 閆福鵬 王家雯 邵欣怡 李 菲

山東第一醫(yī)科大學(xué)(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院)，山東 泰安 271016

薄荷油系從唇形科植物薄荷Mentha haplocalyx Briq.的新鮮莖、葉中提取的揮發(fā)油，具有清涼止癢、抗炎鎮(zhèn)痛、抗真菌、抗病毒、祛痰等多種藥理作用[1-3]。薄荷油等揮發(fā)油在中成藥制劑中應(yīng)用廣泛，采用傳統(tǒng)噴加方式易于揮發(fā)，在制劑儲存期間含量明顯降低[4-5]。為了減少薄荷油的揮發(fā)，并有利于與固體物料的混合，通常將薄荷油制成薄荷油-β-環(huán)糊精包合物，然后制成固體制劑[6-8]。在制備過程中，一般采用水蒸氣蒸餾法進行提取，測定包合物的油利用率[9-10]。水蒸氣蒸餾法是一種提取薄荷油等揮發(fā)油的有效方法，但該法所需時間長[11]。本研究利用薄荷油的旋光性和溶劑對薄荷油的選擇性溶解，建立了準確、快速的選擇性溶劑提取旋光法測定薄荷油-β-環(huán)糊精包合物中油利用率的方法。

1 材料

LXT-IIB高速離心機(天津市泰斯特儀器有限公司)；KQ-600VDB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；WZZ-2B型自動旋光儀(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；薄荷油(安徽太和縣藥用薄荷總廠)；薄荷油-β-環(huán)糊精包合物(自制)；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制

2.1.1對照品溶液的制備[12]取薄荷油適量，精密稱定，加無水乙醇制成質(zhì)量濃度為640 mg·ml-1的對照品溶液。

2.1.2供試品溶液的制備 取薄荷油-β-環(huán)糊精包合物2 g置于離心管中，加入10 ml無水乙醇，超聲10 min，5000 r·min-1離心5 min。取上清液6 ml，加無水乙醇至10 ml，即得。

2.2 實驗方法

2.2.1標準曲線的制備 取對照品儲備液適量，加無水乙醇分別制得質(zhì)量濃度為20、40、80、160、320、640 mg·ml-1的標準溶液，按照《中國藥典》2015年版[7]旋光度測定法，用長度1 dm旋光管，以無水乙醇為對照，于(20±0.5)℃測其在589.3 nm下的旋光度。將旋光度(ψ)對質(zhì)量濃度(C)進行回歸，線性方程為=-0.017 C+0.201(r=0.9997)，表明薄荷油質(zhì)量濃度在20～640 mg·ml-1內(nèi)與旋光度二者線性關(guān)系良好。

2.2.2精密度實驗 取質(zhì)量濃度為20.0、160.0、640.0 μg·ml-1對照品溶液，分別連續(xù)測定旋光度5次，低、中、高三個濃度的溶液日內(nèi)RSD分別為0.39%、0.31%、0.72%，表明精密度良好。

2.2.3穩(wěn)定性實驗 取質(zhì)量濃度為20.0、160.0、640.0 μg·ml-1對照品溶液，室溫放置0、2、4、8、12、24 h測定旋光度，計算低、中、高三個濃度的溶液旋光度的RSD分別為0.91%、1.19%、1.76%，RSD均小于2%，表明供試品溶液在室溫放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.4重復(fù)性實驗 精密稱取薄荷油-β-環(huán)糊精包合物樣品5份，每份2 g，按照“2.1.2”項方法操作制成供試液，測定旋光度，計算油利用率的RSD為0.89%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.2.5加樣回收率實驗 取已知含量的薄荷油-β-環(huán)糊精包合物9份，每份2 g，3份為一組，分別精密加入一定量的薄荷油對照品，按照“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，測定旋光度并計算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率測定結(jié)果(n=3)

由表1可見，該法加樣回收率95%～105%，RSD均小于2%，符合測定要求。

2.3 樣品測定

精密稱取薄荷油-β-環(huán)糊精包合物適量，按照“2.1.2”項方法制備供試品溶液，按照“2.2.1”項方法測定其旋光度，根據(jù)標準曲線計算薄荷油的濃度。另取樣品采用水蒸氣蒸餾法進行測定，與選擇性溶劑提取旋光法進行比較。按照《中國藥典》2015年版四部通則中揮發(fā)油測定法甲法[13]，精密稱取薄荷油-β-環(huán)糊精包合物適量，置于1000 ml圓底燒瓶中，加入300 ml蒸餾水，連接揮發(fā)油提取器，加熱回流5 h，提取薄荷油。根據(jù)如下公式計算油利用率和包合物收率，見表2。

表2 樣品測定結(jié)果(n=3)

由表2可見，與水蒸氣蒸餾法相比，本法測定薄荷油-β-環(huán)糊精包合物收率和油利用率的RSD小，測定結(jié)果準確，且測定快速。

3 討 論

環(huán)糊精分子的空腔外部親水，內(nèi)部疏水，且乙醇分子尺寸遠小于β-環(huán)糊精的空腔尺寸，乙醇分子可進入空腔。因此，乙醇可作為競爭劑，將客分子從β-環(huán)糊精的空腔中全部置換出來[14-15]。薄荷油-β-環(huán)糊精包合物中加入無水乙醇，可將包合物中的薄荷油競爭性置換出來并在無水乙醇中完全溶解。β-環(huán)糊精不溶于無水乙醇[16]，因此，可利用無水乙醇對薄荷油的選擇性溶解，采用高速離心法分離薄荷油和β-環(huán)糊精。薄荷油為旋光性物質(zhì)，比旋光度為-19.05°，可采用旋光法測定薄荷油的含量[17]。實驗結(jié)果表明，選擇性溶劑提取—旋光法與常用的水蒸氣蒸餾法相比，雖然測定結(jié)果相差不大，但是水蒸氣蒸餾法耗時長，且樣品量的要求較大(相當(dāng)于含有薄荷油0.5～1.0 ml以上)。實驗測得水蒸氣蒸餾法的回收率為90%，而選擇性溶劑提取—旋光法的回收率大于95%，測定結(jié)果更準確。因此，本實驗建立的選擇性溶劑提取—旋光法測定薄荷油包合物油利用率的方法效率高，對樣品量的要求低，且定量方法簡便、準確。