凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響原因及處理方法

盛國(guó)玉

（海南省東方市東方醫(yī)院，海南 東方）

0 引言

伴隨醫(yī)療水平的不斷提高，人們對(duì)于醫(yī)療水平的要求也在逐漸的嚴(yán)格，包括各種醫(yī)療器械的要求也在提高。凝血檢驗(yàn)采取半自、自動(dòng)檢測(cè)，我院使用邁瑞C3510自動(dòng)檢測(cè)凝血儀，該儀器存在速度快，效率高，準(zhǔn)確率大的特點(diǎn)[1]。因?yàn)樯锘顒?dòng)大分子檢測(cè)極易失活，影響結(jié)果，該報(bào)告中對(duì)凝血檢查的影響原因與解決方法給予研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取2019年1～5月在我院進(jìn)行凝血檢驗(yàn)300例病人，其中包括男性180例，女性120例，患者年齡17～45歲。通過(guò)隨機(jī)平均分組的形式，將所有患者分為兩組，包括實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。每個(gè)小組150人。將所有患者的常規(guī)信息，包括所有病人的性別、年齡等進(jìn)行對(duì)比，差異不大（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 檢查方法

患者在早晨空腹的情況下進(jìn)行靜脈采血，使用109 mmol/L的枸椽酸鈉1:9抗凝，2500 r/min離心10 min，直接上機(jī)，采取全自動(dòng)血凝儀檢測(cè)。

1.2.2 影響因素

1.2.2.1 樣本采集跟檢驗(yàn)申請(qǐng)

（1）通過(guò)發(fā)送檢驗(yàn)申請(qǐng)單這種“大撒網(wǎng)”的選擇方式，會(huì)浪費(fèi)醫(yī)療資源，降低診斷效率。不規(guī)范的填單會(huì)導(dǎo)致病人的資料不全。錄入困難，產(chǎn)生不正常結(jié)果時(shí)無(wú)法斷定屬于實(shí)驗(yàn)誤差或者疾病導(dǎo)致，誘發(fā)不良后果。

（2）病人準(zhǔn)備：①妊娠，情緒波動(dòng)嚴(yán)重，劇烈活動(dòng)都會(huì)促進(jìn)血液的凝固，用餐后脂血也會(huì)對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果有所影響，因此清晨空腹檢查。②潘生丁、抵克利得、阿司匹林等藥物會(huì)導(dǎo)致血小板聚集降低；口服使用避孕藥提高血小板的聚集情況，顯著增加凝血酶原，纖維蛋白原，凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅻ因子活性[2]。

（3）禁忌事項(xiàng)：在進(jìn)行標(biāo)本的采集時(shí)需要注意[3]：①對(duì)病人的信息進(jìn)行核對(duì)，做好樣本的采樣前期工作；②選擇枸櫞酸鈉抗凝，抗凝劑與血液的比例是1:9；③抽血順序?qū)T以及APTT檢測(cè)結(jié)果存在一定影響[4]，應(yīng)該把止凝血檢驗(yàn)標(biāo)本置于第2個(gè)管采集；④采樣的時(shí)候需要避免在留置的通道內(nèi)進(jìn)行；⑤止血帶捆綁低于1 min，若壓力過(guò)大或時(shí)間太長(zhǎng)；使血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放組織型纖溶酶原激活劑（t-PA），致纖溶活性增強(qiáng)或加速血小板激活并使血小板因子-4分泌增多；⑥避免樣品溶血，防止反復(fù)穿刺造成血小板激活；⑦在進(jìn)行采樣后需要輕柔的顛倒混勻6～8次。

1.2.2.2 標(biāo)本的儲(chǔ)存和運(yùn)輸

標(biāo)本在進(jìn)行儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)臅r(shí)候，一般采用以下方式：①?zèng)]有處理的枸櫞酸鈉抗凝全血；②進(jìn)行離心后血漿不進(jìn)行分離，使用原始管進(jìn)行保存；③離心后進(jìn)行血漿分離。在情況允許的條件下，使用第一種模式進(jìn)行運(yùn)輸，采集點(diǎn)無(wú)須采取使用離心機(jī)等醫(yī)療設(shè)備，檢驗(yàn)工作者可以看到樣本最真實(shí)的情況，便于判斷標(biāo)本分析前的影響因素。運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中需要加蓋，注意運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中保持垂直，防止發(fā)生震蕩，保持室溫18～25 ℃運(yùn)輸[5]。報(bào)道顯示，pH增加0.8個(gè)單位則APTT時(shí)間增加20 s，受到檢測(cè)試劑的緩沖影響[6]。

（1）溫度及時(shí)間的影響：抗凝因子與血液的凝血在體外十分活躍，若經(jīng)過(guò)溫度改變以及儲(chǔ)存后。會(huì)出現(xiàn)激活或降解。比如FⅧ和PS。溫度升高，降解速度增快，凝血因子58 ℃保存后可失活。血小板低溫被激活進(jìn)而出現(xiàn)自發(fā)性聚集。所以，維持在室溫條件下運(yùn)送標(biāo)本。相關(guān)報(bào)道顯示：離心后標(biāo)本對(duì)溫度敏感性更好。專家認(rèn)為FV、FⅧ活性與PS含量測(cè)定，其他的標(biāo)本穩(wěn)定性在室溫能夠維持24～48 h[7]。

（2）樣本的處理：如果樣本無(wú)法是全血，需要采集后1 h內(nèi)進(jìn)行離心且分離血漿放在容器內(nèi)。離心前給予檢查，保證樣本質(zhì)量。分離出來(lái)的血漿應(yīng)進(jìn)行加蓋并且在管上標(biāo)記患者資料與抗凝劑的類型，4 h內(nèi)完成檢測(cè)，如果不能在4 h內(nèi)完成需要置于-70 ℃或-20 ℃的冷凍儲(chǔ)存，防止多次凍融。如果遠(yuǎn)途運(yùn)輸，采取干冰或者另外的形式將分離出來(lái)的標(biāo)本進(jìn)行冷凍狀態(tài)的儲(chǔ)存。FV、FⅧ和PS在進(jìn)行反復(fù)的凍融之后其活性會(huì)受到一定程度的影響。

1.2.3 處理方式

1.2.3.1 溶血

溶血屬于標(biāo)本質(zhì)量不達(dá)標(biāo)的原因。主要發(fā)生在采集環(huán)節(jié)。按照血漿中游離血紅蛋白的濃度分成中度或者以上的溶血極易影響止凝血實(shí)驗(yàn)的最終檢測(cè)的結(jié)果，所以，如果排除由于病理性導(dǎo)致的溶血情況，建議再次采血。若屬于患者病理性的情況出現(xiàn)的溶血或者不能再次進(jìn)行采血，報(bào)告標(biāo)記“標(biāo)本溶血”會(huì)出現(xiàn)的影響，及時(shí)和臨床交流，同時(shí)進(jìn)行記錄。

1.2.3.2 黃疸

黃疸標(biāo)本對(duì)止凝血的實(shí)驗(yàn)探討并不多，所以，采用光譜分析技術(shù)凝血儀650 nm以上波長(zhǎng)給予檢測(cè)，膽紅素的含量少于20 mg/dL的黃疸的標(biāo)本不會(huì)對(duì)凝血實(shí)驗(yàn)的結(jié)果產(chǎn)生影響。

1.2.3.3 脂血

脂血包括生理性與病理性。脂血中脂質(zhì)顆粒經(jīng)過(guò)影響光散射、光反射率或光吸收進(jìn)而影響光學(xué)檢測(cè)法在較小波長(zhǎng)處的測(cè)量，所以，脂血對(duì)光學(xué)法檢測(cè)的影響最嚴(yán)重，對(duì)磁珠法或電流法的影響不大。病人生理性的脂血需要在餐前進(jìn)行再次抽血，病人病理性的脂血，可采?。?50 nm的波長(zhǎng)給予檢測(cè)，或?qū)颖窘o予稀釋或采取有機(jī)溶劑將脂質(zhì)進(jìn)行去除。

1.3 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)照組的診斷準(zhǔn)確率是84.7%，實(shí)驗(yàn)組的診斷準(zhǔn)確率是94.0%，差異較大（P＜0.05），存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見表1。

表1 兩組病人凝血檢驗(yàn)的準(zhǔn)確率對(duì)比表（n, %）

兩組誤診原因?qū)Ρ缺硪姳?，實(shí)驗(yàn)組誤診率明顯小于對(duì)照組，差異較大（P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 兩組誤診原因?qū)Ρ龋╪）

3 討論

3.1 檢驗(yàn)人員的素質(zhì)與責(zé)任

檢驗(yàn)人員不但會(huì)運(yùn)用自動(dòng)化儀器，同時(shí)詳細(xì)的了解儀器作用，影響檢驗(yàn)結(jié)果因素與相關(guān)處理方法的能力。

3.2 標(biāo)本的采集及處理

3.2.1 盛裝血液標(biāo)本的容器規(guī)范化

選擇廠商提供的一次性注射器與定量抗凝劑的真空采血管，防止出現(xiàn)血液滲漏或凝塊、抗凝劑比例不當(dāng)要求等情況，無(wú)法保證檢驗(yàn)結(jié)果。

3.2.2 選擇合適采血部位、正確穿刺方式

輸液側(cè)禁忌采血，采血前空腹?fàn)顟B(tài)。情緒激動(dòng)、劇烈運(yùn)動(dòng)與緊張可導(dǎo)致血小板升高，凝血與纖溶活性提高。采血時(shí)止血帶禁忌過(guò)緊過(guò)久，可使因子Ⅷ和組織纖溶酶源激活劑（t-PA）釋放并活化。操作輕緩，防止血細(xì)胞破碎，激活凝血系統(tǒng)。

3.2.3 適當(dāng)?shù)目鼓齽┡c血液的比例

血液標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦用于凝血檢驗(yàn)的抗凝劑為109 mmol/L枸櫞酸鈉。紅細(xì)胞比容（Hct）為0.25～0.55時(shí)，抗凝劑與血液的比例為1:9，若對(duì)貧血（Hct＜0.20）或紅細(xì)胞增多癥患者（Hct＞0.70），則要根據(jù)公式：抗凝劑量=0.00185×血液量mL×（100-Hct），來(lái)調(diào)節(jié)抗凝劑的用量，若不進(jìn)行調(diào)節(jié)，影響檢驗(yàn)結(jié)果。

總之，從目前的情況來(lái)看，凝血檢驗(yàn)項(xiàng)目會(huì)受到很多因素的影響，因此在應(yīng)用中需要采取有效的措施進(jìn)行控制，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，給臨床醫(yī)生提供對(duì)患者身體狀況更準(zhǔn)確的判斷。