循環(huán)腫瘤細(xì)胞、癌胚抗原及影像學(xué)對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷價(jià)值

曹達(dá)魁 王海琴

[摘要] 目的 探討循環(huán)腫瘤細(xì)胞、癌胚抗原及影像學(xué)對(duì)非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）診斷價(jià)值分析。 方法 選擇2018年9月至2019年8月我院病理確診的43例NSCLC患者、同期入院的43例良性肺部疾病患者及43例健康者為研究對(duì)象，檢測(cè)并分析三組CTC、CEA及胸部CT在診斷NSCLC中的價(jià)值。 結(jié)果 肺癌組CTC陽(yáng)性率為79.07%，良性肺部疾病組CTC陽(yáng)性率為4.65%。健康組CTC陽(yáng)性率0%。肺癌組與良性肺部疾病組、健康組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肺癌患者吸煙患者CTC陽(yáng)性率為95.00%，二手煙吸入者陽(yáng)性率為77.78%，無(wú)吸煙史CTC陽(yáng)性率則為20.00%，三組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Ⅰ～Ⅱ期患者CTC無(wú)檢出，Ⅲ期CTC陽(yáng)性率為68.75%，Ⅳ期CTC陽(yáng)性率為92.00%，各亞組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者CTC陽(yáng)性率為95.83%，無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者CTC陽(yáng)性率為57.89%。CEA≤5 ng/mL患者中CTC陽(yáng)性率為46.67%，CEA>5 ng/mL患者中CTC陽(yáng)性率為96.43%。而CTC陽(yáng)性率與性別、年齡、PS評(píng)分、病理學(xué)類型及CT位置表現(xiàn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。CEA臨界值為6.55 ng/mL時(shí)，敏感性為62.8%，特異性83.7%;CTC臨界值為1.03時(shí)，敏感性79.1%，特異性98.8%。CTC的敏感性及特異性均要高于CEA，但三者聯(lián)合則具有更高的診斷效率。 結(jié)論 在NSCLC診斷中CTC敏感性及特異性比CEA及胸部CT高，CTC與NSCLC患者吸煙情況、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，CTC與CEA及胸部CT結(jié)合可顯著提高NSCLC的診斷率。

[關(guān)鍵詞] 循環(huán)腫瘤細(xì)胞;癌胚抗原;胸部CT;非小細(xì)胞肺癌

[中圖分類號(hào)] R734.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2021）08-0046-04

The diagnostic value of circulating tumor cells， CEA and imaging for non-small cell carcinoma

CAO Dakui? ?WANG Haiqin

Department of Respiratory Medicine， Jiaxing Second Hospital in Zhejiang Province， Jiaxing? ?314000， China

[Abstract] Objective To discuss and analyze the diagnostic value of circulating tumor cells， CEA and imaging for non-small cell carcinoma. Methods A total of 43 patients with NSCLC confirmed by pathology in our hospital from September 2018 to August 2019， 43 patients with benign pulmonary disease admitted in the same period， and 43 healthy patients were selected as the study subjects. The values of CTC， CEA and chest CT in the diagnosis of NSCLC in three groups were detected and analyzed. Results The CTC positive rate was 79.07% in the lung cancer group， 4.65% in the benign lung disease group， and 0% in the healthy group. Significant differences were observed among the lung cancer group， the benign lung disease group， and the healthy group（P<0.05）. The positive rate of CTC was 95.00% in lung cancer patients who smoked， 77.78% in those who inhaled second-hand smoke， and 20.00% in those who had no smoking history， with significant differences among the three groups（P<0.05）. No CTC was detected in stage Ⅰ-Ⅱ patients; the positive rate of CTC in stage Ⅲ was 68.75%; the positive rate of CTC in stage Ⅳ was 92.00%; statistically significant differences were observed among the subgroups（P<0.05）. The CTC positive rate was 95.83% in those with distant metastasis and 57.89% in those without distant metastasis. The CTC positive rate was 46.67% in patients with CEA≤5 ng/mL and 96.43% in patients with CEA>5 ng/mL. No statistical significances were observed in the CTC positive rate with gender， age， PS score， pathological type and CT location（P>0.05）. When CEA threshold was 6.55 ng/mL， the sensitivity and the specificity were 62.8% and 83.7%. When the CTC threshold was 1.03， the sensitivity and specificity were 79.1% and 98.8%. The sensitivity and specificity of CTC were higher than those of CEA， but the combination of the three had a higher diagnostic efficiency. Conclusion In the diagnosis of NSCLC， the sensitivity and specificity of CTC are higher than those of CEA and chest CT. CTC is related to the smoking status， clinical stage and distant metastasis of NSCLC patients. The combination of CTC， CEA and chest CT can significantly improve the diagnostic rate of NSCLC.

[Key words] Circulating tumor cells; CEA; Chest CT; Non-small cell lung cancer

目前我國(guó)發(fā)病率及病死率最高的惡性腫瘤是肺癌[1]，非小細(xì)胞肺癌占其中的 80%～85%，大多數(shù)肺癌患者的預(yù)后較差，總體5年生存率約為18.1%，大多數(shù)患者就診時(shí)已處于晚期[2]。作為肺癌早期篩查手段，以癌胚抗原為代表的血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)和胸部CT檢查已被廣泛應(yīng)用。肺癌主要死因多為遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，血行播散是轉(zhuǎn)移的重要途徑。循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating tumor cells，CTC）是指原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移病灶內(nèi)的腫瘤細(xì)胞通過(guò)主動(dòng)遷移、侵襲或者外在因素干擾導(dǎo)致其被動(dòng)脫落，從而進(jìn)入循環(huán)血液所形成。CTC成為血行轉(zhuǎn)移的重要前提。近年來(lái)CTC成為一種用于腫瘤的早期診斷[3，4]、療效評(píng)估、復(fù)發(fā)評(píng)估和預(yù)后預(yù)測(cè)[5]的液體活檢方法。本研究擬探討循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）與非小細(xì)胞肺癌（Non-small cell lung cancer，NSCLC）患者病理特征，并進(jìn)一步研究其與癌胚抗原及影像學(xué)在NSCLC中的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究病例選自我院2018年9月至2019年8月我院病理確診的NSCLC、良性肺部疾病患者及健康體檢者，分為肺癌組、良性肺部疾病組及健康組，每組43例。入選者共129例，其中男66例，女63例。肺癌患者43例，其中男22例，女21例，平均年齡（62.35±16.39）歲。肺癌組患者納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)組織病理診斷為肺癌患者;年齡18～80歲;入組前未接受任何抗腫瘤治療;預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月[5]。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠;年齡<18歲或>80歲;KPS評(píng)分<70;預(yù)計(jì)生存期<3個(gè)月;機(jī)體有其他原發(fā)惡性腫瘤;需要治療的嚴(yán)重的肝、腎、心、肺等疾病[5]。同期納入本院確診肺部良性疾病43例，男18例，女25例，平均年齡（61.24±14.88）歲。其中肺炎25例，支氣管哮喘8例，慢性阻塞性肺疾病5例，支氣管擴(kuò)張5例。健康組43例，其中男26例，女17例，平均年齡（60.34±15.81）歲。三組性別分布、年齡等進(jìn)行比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批后，所有參與該實(shí)驗(yàn)的患者及家屬均需簽署研究知情同意書(shū)。

1.2方法

CTC分型檢測(cè)采用CanpatrolR CTC檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)，通過(guò)采取入組患者5 mL外周靜脈血，隨后通過(guò)8 μm納米膜進(jìn)行過(guò)濾富集CTC，再通過(guò)多重mRNA原位雜交技術(shù)鑒定CTC，最后通過(guò)全自動(dòng)熒光顯微鏡鏡檢進(jìn)行判讀。CT檢查運(yùn)用 Siemens SOMATOM Perspective32排CT儀行胸部CT平掃，對(duì)其病灶形態(tài)及結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察并測(cè)量大小。檢測(cè)CEA需所有受檢者在清晨取空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血3 mL，采用RXLmax全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑。參考值范圍：CEA：0～5 ng/mL。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2或Fisher精確檢驗(yàn)，等級(jí)資料相關(guān)分析采用秩和檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組CTC檢測(cè)陽(yáng)性率比較

肺癌組34例患者檢測(cè)CTC陽(yáng)性（79.07%），良性肺部疾病患者中有2例檢測(cè)出CTC陽(yáng)性（4.65%）。健康組無(wú)人檢測(cè)出CTC陽(yáng)性。肺癌組分別與良性肺部疾病組、健康組CTC檢測(cè)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。良性肺部疾病組與健康組CTC檢測(cè)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 肺癌患者CTC與臨床病例特征的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示，肺癌患者吸煙患者CTC陽(yáng)性率為95.00%，被動(dòng)吸煙者陽(yáng)性率為77.78%，無(wú)吸煙史CTC陽(yáng)性率則為20.00%，三組之間CTC陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Ⅰ～Ⅱ期患者CTC無(wú)檢出，Ⅲ期CTC陽(yáng)性率為68.75%，Ⅳ期CTC陽(yáng)性率為92.00%，各亞組CTC陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者CTC陽(yáng)性率為95.83%，無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者CTC陽(yáng)性率為57.89%。CEA≤5 ng/mL患者中CTC陽(yáng)性率為46.67%，CEA>5 ng/mL患者中CTC陽(yáng)性率為96.43%。而CTC陽(yáng)性率與患者性別、年齡、PS評(píng)分、病理學(xué)類型及CT位置表現(xiàn)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.3 肺癌患者CTC數(shù)量、CEA水平及影像學(xué)的ROC分析結(jié)果

本研究結(jié)果顯示，CEA臨界值為6.55 ng/mL時(shí)約登指數(shù)為0.465，AUC為0.780，95%置信區(qū)間為0.818～0.967，其敏感性為62.8%，特異性83.7%;CTC臨界值為1.03時(shí)約登指數(shù)為0.779，AUC為0.892，95%置信區(qū)間為0.688～0.872，敏感性為79.1%，特異性為98.8%。CTC的敏感性及特異性均要高于CEA，但三者聯(lián)合應(yīng)用，AUC為0.939，95%置信區(qū)間為0.897～0.980。

3討論

臨床上腫瘤的診斷仍以固體活檢作為確診及分期的金標(biāo)準(zhǔn)，但隨著目前對(duì)惡性腫瘤精確診治的要求不斷提高，在日益精準(zhǔn)、靈敏的醫(yī)學(xué)檢測(cè)技術(shù)支持下，液體活檢在臨床中逐漸發(fā)揮出重要作用。循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating tumor cell，CTC）不僅能實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤進(jìn)展的實(shí)時(shí)跟蹤，及時(shí)、有效地捕獲治療過(guò)程中腫瘤的動(dòng)態(tài)變化情況，而且操作過(guò)程簡(jiǎn)單，可重復(fù)多次采樣，可對(duì)腫瘤情況進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)[6-7]，為腫瘤的早期檢測(cè)提供了可行的方法[8]。越來(lái)越多研究表明CTC在肺癌的早期診斷、疾病監(jiān)測(cè)及預(yù)后中起到重要作用[9]。有研究發(fā)現(xiàn)，肺癌患者治療期間CTC水平無(wú)法檢測(cè)的患者與CTC水平可持久檢測(cè)的患者相比，無(wú)進(jìn)展生存期比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[10-11]。

本研究檢測(cè)三組研究對(duì)象外周血中的CTC計(jì)數(shù)、CEA水平及胸部影像學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)肺癌組與良性肺部疾病組、健康組CTC比較，肺癌組患者CTC陽(yáng)性率為79.07%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究還發(fā)現(xiàn)CTC陽(yáng)性率與吸煙、腫瘤分期及CEA水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與Ried等[12]研究結(jié)果一致。CTC升高原因考慮循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平和患者體內(nèi)腫瘤負(fù)荷相關(guān)，從而使CTC檢測(cè)更有利于精確地評(píng)估病情。吸煙患者CTC陽(yáng)性率高，考慮長(zhǎng)期大量吸煙是肺癌最常見(jiàn)的誘因。本研究顯示CTC陽(yáng)性率與患者性別、年齡、PS評(píng)分、病理學(xué)類型及CT位置表現(xiàn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），與Yasumoto K等[13]研究一致。Wang等[14]研究也表明，CTC水平與腫瘤的組織學(xué)亞型沒(méi)有顯著差異，與本研究結(jié)果一致。但由于樣本量限制，具體各亞型腫瘤與CTC關(guān)系，仍需進(jìn)一步大量臨床試驗(yàn)證實(shí)。

腫瘤標(biāo)志物是由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生并釋放到血液、細(xì)胞、體液中的一種物質(zhì)，它可反映出腫瘤的發(fā)生、存在與生長(zhǎng)。癌胚抗原（Carcinoembryonic antigen，CEA）為目前臨床上常用且較為敏感的腫瘤標(biāo)志物之一，在腫瘤的診斷、治療及監(jiān)測(cè)預(yù)后中發(fā)揮較大作用。影像學(xué)作為肺癌診斷必不可少的方法，已較為成熟應(yīng)用，如中央型肺癌在CT中最重要且最直接的征象是支氣管的管壁截?cái)?，或者增厚狹窄及出現(xiàn)肺門腫塊。而周圍型的肺癌患者在胸部CT的主要征象則是分葉征及毛刺征等[15]。

該研究顯示，在肺癌的診斷中CEA（臨界值6.55 ng/mL）的敏感性為62.8%，特異性為83.7%，而CTC（臨界值1.03）的敏感性為79.1%，特異性為98.8%。CTC（AUC 0.892;95%CI 0.688～0.872）和Youden指數(shù)值（0.779）比CEA（AUC 0.780;95%CI 0.818～0.967）高，表明CTC敏感性和特異性要高于CEA及胸部CT影像學(xué)表現(xiàn)，與Chen等[16]結(jié)果一致，說(shuō)明CTC與傳統(tǒng)血清腫瘤標(biāo)志物及影像學(xué)相比，具有更高的特異性和靈敏度。但對(duì)于可疑惡性肺部病變的診斷患者而言，CTC的檢測(cè)不能代替CT成像或組織活檢[17]。本研究還表明，如將CTC、 CEA和影像學(xué)表現(xiàn)結(jié)合，AUC為0.939， 95%可信區(qū)間為0.897～0.980，可顯著提高診斷的敏感性和特異性，更能反映患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的真實(shí)情況[18]。

總之，CTC在肺癌患者中具有較強(qiáng)的臨床應(yīng)用價(jià)值，為早期發(fā)現(xiàn)癌癥提供一條新捷徑，可作為患者監(jiān)測(cè)治療反應(yīng)和疾病進(jìn)展的手段[19-20]。因本研究病例數(shù)相對(duì)較少，還需通過(guò)進(jìn)一步的大規(guī)模、多中心的隨訪研究，去進(jìn)行深入探討分析其在肺癌早期診斷、評(píng)估患者療效、預(yù)后和監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等方面的應(yīng)用價(jià)值，為臨床肺癌的診治提供新的方法。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Chen W，Zheng R，Baade PD，et al. Cancer statistics in China，2015[J].CA Cancer J Clin，2016，66（2）：115-132.

[2] Inage T，Nakajima T，Yoshino I，et al. Early lung cancer detection[J].Clin Chest Med，2018，39（1）：45-55.

[3] Hanssen A，Wagner J，Gorges TM，et al.Characterization of different CTC subpopulations in non-small cell lung cancer[J].Sci Rep，2016，6（2）：28 010.

[4] Lorente D，Olmos D，Mateo J，et al.Circulating tumor cell increase as a biomarker of disease progression in metastatic castration-resistant prostate cancer patients with low baseline CTC counts[J].Ann Oncol，2019，29（7）：1554-1560.

[5] 韓寶惠，高樹(shù)根.中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南2018版[J].中華腫瘤雜志，2018，40（12）：944-951.

[6] Messaritakis I，Politaki E，Plataki M，et al.Heterogeneity of circulating tumor cells（CTCs） in patients with recurrent small cell lung cancer（SCLC）treated with pazopanib[J].Lung Cancer，2017，104（1）：16-23.

[7] Esposito A，Criscitiello C，Trapani D，et al.The emerging role of " liquid biopsies，" circulating tumor cells，and circulating cell-free tumor DNA in lung cancer diagnosis and identification of resistance mutations[J].Curr Oncol Rep，2017，19（1）：1.

[8] 李研，張繁霜，郭蕾，等.基于二代測(cè)序技術(shù)的循環(huán)腫瘤檢測(cè)在表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑耐藥肺癌患者耐藥基因檢測(cè)中的應(yīng)用[J].中華病理學(xué)雜志，2018，47（12）：904-909.

[9] Tartarone A，Rossi E，Lerose R，et al.Possible applications of circulating tumor cells in patients with non small cell lung cancer[J].Lung Cancer，2017，107（2）：59-64.

[10] Lee JY，Qing X，Xiumin W，et al.Longitudinal monitoring of EGFR mutations in plasma predicts outcomes of NSCLC patients treated with EGFR TKIs：Korean Lung Cancer Consortium （KLCC-12-02）[J].Oncotarget，2016， 7（6）：6984-6993.

[11] Pecuchet N，Zonta E，Didelot A，et al.Base-position error rate analysis of next-generation sequencing applied to circulating tumor DNA in non-small cell lung cancer：a prospective study[J].PLoS Medicine，2016，13（12）：e1002199.

[12] Ried K，Eng P，Sali A.Screening for circulating tumour cells allows early detection of cancer and monitoring of treatment effectiveness：an observational study[J].Adv Cancer Prev，2017，2（2）：1-11.

[13] Yasumoto K，Osaki T，Watanabe Y，et al.Prognostic value of cytokeratin-positive cells in bone marrow and lymph nodes of patients with resected non-small lung cancer：A multicenter prospective study[J].Ann Thorac Surg，2003， 76（1）：194.

[14] Wang L，Wu C，Qiao L，et al.Clinical significance of folate receptor-positive circulating tumor cells detected by ligand-targeted polymerase chain reaction in lung cancer[J].J Cancer，2017，8（1）：104-110.

[15] 努爾蘭，余瑩瑩，韓文廣，等.中央型肺鱗癌、小細(xì)胞肺癌CT征象與血清腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系及聯(lián)合診斷的價(jià)值[J].中國(guó)CT和MRI雜志，2015，14（9）：57-61.

[16] Chen K，Zhang J，Guan T，et al.Comparison of plasma to tissue DNA mutations in surgical patients with non-small cell lung cancer[J].J Thorac Cardiovasc Surg，2017，154（3）：1123.

[17] Mascalchi M，Maddau C，Sali L，et al.Circulating tumor cells and microemboli can differentiate malignant and benign pulmonary lesions[J].J Cancer，2017，8（12）：2223-2230.

[18] 萬(wàn)佳蔚，韓志君，嚴(yán)子禾，等.非小細(xì)胞肺癌患者血漿循環(huán)腫瘤細(xì)胞對(duì)預(yù)后評(píng)估的意義[J].中華腫瘤防治雜志，2016，23（S2）：37-38.

[19] Kulasinghe A，Kapeleris J，Kimberley R，et al.The prognostic significance of circulating tumor cells in head and neck and non-small-cell lung cancer[J].Cancer Med，2018， 7（12）：5910-5919.

[20] Kapeleris J，Kulasinghe A，Warkiani ME，et al.The prognostic role of circulating tumor cells （CTCs）in lung cancer[J].Front Oncol，2018，8（1）：311.

（收稿日期：2020-07-09）