乳腺癌血清TPS、CA153、VEGF水平及意義

劉瑞杰 程樹(shù)杰 魏淑強(qiáng) 朱月明 王作醒

在我國(guó)高居女性惡性腫瘤發(fā)病率首位的是女性乳腺癌，同時(shí)是女性因癌癥而導(dǎo)致死亡的最常見(jiàn)原因之一[1]。提高女性乳腺癌的早預(yù)防、早診斷及早治療是目前腫瘤學(xué)專(zhuān)業(yè)關(guān)注的重點(diǎn)[2]。早期乳腺癌患者不具備典型的臨床表現(xiàn)和體征，不易早期發(fā)現(xiàn)，難以引起重視，常通過(guò)體檢或乳腺癌篩查發(fā)現(xiàn)。實(shí)踐證明，能夠有效提高乳腺癌患者生存率和降低死亡率因素不完全在于治療方式。如何提高乳腺癌危險(xiǎn)預(yù)測(cè)及更多地發(fā)現(xiàn)早期乳腺癌患者，是乳腺癌防治的關(guān)鍵問(wèn)題。雖然目前乳腺癌患者主要通過(guò)影像學(xué)檢查，但是影像學(xué)診斷方法各有優(yōu)勢(shì)，卻因各種因素的干擾而存在一定的局限性。眾所周知，血清腫瘤標(biāo)志物具有檢測(cè)快捷、簡(jiǎn)單易行、無(wú)創(chuàng)、而且能夠持續(xù)監(jiān)測(cè)變化情況[3,4]。已被美國(guó)臨床生化科學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)踐指南推薦的在臨床上用于乳腺癌診斷的血清腫瘤標(biāo)志物包括:特異性組織多肽抗原(tissue polypeptide specific antigen,TPS)、糖類(lèi)抗原153(carbohydrate antigen 153,CA153)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen CEA)、組織多肽抗原(tissue polypeptide antigen ，TPA)等。有報(bào)道特異性TPS、CA153和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等多種標(biāo)志物在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后中扮演重要角色[5-7]。為探討血清TPS、CA153、VEGF水平變化在乳腺癌患者中的檢測(cè)價(jià)值及預(yù)測(cè)情況，本研究通過(guò)對(duì)43例乳腺癌患者和同期43例健康體檢者檢測(cè)血清中TPS、CA153、VEGF水平變化，探討其臨床意義，以期為乳腺癌的早期篩查及診斷提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取保定市第四中心醫(yī)院2018年2月至2019年2月收治并接受輔助化療治療的43例乳腺癌患者作為研究對(duì)象，乳腺癌患者均經(jīng)過(guò)病理學(xué)診斷并確診。乳腺癌組中，年齡28～65歲，平均年齡(49.7±5.3)歲；病程1～3年。同時(shí)，取同期于體檢中心經(jīng)健康體檢合格的43例健康女性為健康對(duì)照組，年齡29～66歲，平均年齡(50.3±4.4)歲。2組性別比、年齡等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 乳腺癌納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡>18歲，女性，民族不限；②細(xì)胞學(xué)或病理診斷確診為乳腺癌(術(shù)前或術(shù)后)；③具備完整的臨床資料；④患者無(wú)妊娠、感染、糖尿病、肝腎功能不全、充血性心力衰竭等疾?。虎轂槌踔蔚娜橄侔└问中g(shù)或術(shù)后接受化療患者且未進(jìn)行放療及免疫治療等；⑥病情長(zhǎng)短不限，分期不限；⑦既往無(wú)其他惡性腫瘤病史；⑧患者知情同意接受入組試驗(yàn)且均簽署知情同意書(shū)。

1.2.2 對(duì)照組入組標(biāo)準(zhǔn)：①年齡>18歲，女性，民族不限；②同時(shí)期在我院體檢的健康女性，具備完整的臨床資料；③無(wú)妊娠、感染、糖尿病、肝腎功能不全、充血性心力衰竭等疾??；④既往無(wú)其他惡性腫瘤病史；⑤知情同意。

1.2.3 排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者同時(shí)患有其他惡性腫瘤；②患者存在精神異常者或有嚴(yán)重的糖尿病、心臟病等基礎(chǔ)疾病影響治療效果；③患者不配合治療或者不愿入組參加研究。

1.3 血清TPS、CA153、VEGF測(cè)定 抽取乳腺癌患者化療前和化療1年后的空腹靜脈血3～5 ml，室溫自然凝固10～20 min后常規(guī)離心處理，保存?zhèn)溆茫灰酝瑯拥姆绞匠槿〗】祵?duì)照組清晨空腹靜脈血3 ml，離心處理，備用。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒檢測(cè)血清TPS和VEGF及CAl53水平，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明步驟進(jìn)行操作，每次重復(fù)測(cè)定3次，并取平均值，檢測(cè)試劑盒由RayBiotech公司提供。

2 結(jié)果

2.1 2組乳腺癌患者血清TPS、CA153、VEGF表達(dá)水平比較 與健康對(duì)照組相比，乳腺癌患者血清中TPS、CA153及VEGF水平明顯增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1 2組乳腺癌患者血清TPS、CA153及VEGF水平比較

2.2 血清TPS、CA153、VEGF檢測(cè)對(duì)乳腺癌診斷價(jià)值 血清TPS+CA153+VEGF的敏感性為96.8%，特異性為91.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為98.7%，陰性預(yù)測(cè)值為84.5%，三者聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值均明顯高于任一單項(xiàng)檢測(cè)和兩兩聯(lián)合檢測(cè)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 血清TPS、CA153、VEGF聯(lián)合檢測(cè)對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值 %

2.3 乳腺癌患者化療1年后復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)血清TPS、CA153、VEGF比較 通過(guò)來(lái)院復(fù)查和電話隨訪的方式對(duì)化療1年的患者進(jìn)行隨訪調(diào)查，出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)情況12例，未復(fù)發(fā)31例；復(fù)發(fā)乳腺癌患者血清TPS、CA153、VEGF水平顯著高于未復(fù)發(fā)患者(P=0.0025，P=0.0011，P<0.001)。見(jiàn)表3。

表3 乳腺癌患者術(shù)后1年復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)血清TPS、CA153、VEGF比較

2.4 相關(guān)性分析 將乳腺癌組患者化療前血清TPS水平和CA153水平、VEGF水平進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清TPS水平與CA153、VEGF呈正相關(guān)(r=0.626，r=0.472，P<0.05)。

3 討論

早期篩查并對(duì)可疑者或無(wú)癥狀患者及時(shí)診斷，可以提高腫瘤患者的生存率，延長(zhǎng)生存時(shí)間，對(duì)乳腺癌的診斷和治療具有積極意義，尋找最佳的乳腺癌的早期診斷標(biāo)志物和提高乳腺癌血清學(xué)檢測(cè)指標(biāo)的檢出率迫在眉睫[8-10]。本研究結(jié)果顯示，血清TPS、CA153、VEGF聯(lián)合檢測(cè)有助于提高乳腺癌診斷的靈敏度和特異度，聯(lián)合檢測(cè)彌補(bǔ)了單一指標(biāo)檢測(cè)的不足，對(duì)乳腺癌早期篩查和診斷具有重要意義。

研究發(fā)現(xiàn)，TPS是由細(xì)胞角蛋白8、18和19的多肽組成的復(fù)合物[11]。TPS在正常人肝臟肝細(xì)胞中以及腺體的導(dǎo)管中呈較低表達(dá)，而在肝衰竭、腎功能衰竭、糖尿病和妊娠等良性疾病中中度升高，但在乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤及高轉(zhuǎn)移潛能的癌組織中顯著高表達(dá)[12]。因此，血清TPS水平可作為一項(xiàng)早期診斷和預(yù)后標(biāo)志物，并可用于監(jiān)測(cè)不同腫瘤患者的治療情況[13]。由于TPS主要用于監(jiān)測(cè)治療和評(píng)估治療反應(yīng)的腫瘤標(biāo)志物之一，由于其存在自身特異性不高的缺陷，因此，常常和多種血清腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)以提高診斷率[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清中TPS水平較健康對(duì)照組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，且乳腺癌患者化療1年后復(fù)發(fā)的TPS水平較未復(fù)發(fā)的患者明顯增高，表明血清TPS水平升高能夠提示乳腺癌的發(fā)生，對(duì)乳腺癌的診斷具有積極意義，其升高機(jī)制可能是由于腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖，細(xì)胞周期縮短，抑制細(xì)胞凋亡，促使腫瘤細(xì)胞內(nèi)TPS水平急劇升高。

CA153作為一種較為敏感的、快速有效的、簡(jiǎn)便定量的乳腺癌腫瘤標(biāo)記物，在乳腺癌的早期診斷、術(shù)后監(jiān)測(cè)以及轉(zhuǎn)移患者化療反應(yīng)監(jiān)測(cè)等方面仍被廣泛應(yīng)用[15]。早期乳腺癌患者能檢測(cè)到CA153水平升高，其在乳腺癌各亞型之間表達(dá)存在差異，在乳腺癌中的診斷中由于敏感性和特異性較差而引起較多爭(zhēng)議[16]。研究表明，血清CA153在三陰性乳腺癌和luminal型乳腺癌患者中水平明顯升高，而Park等[17]研究發(fā)現(xiàn)，雖然CA153在luminal型乳腺癌患者的表達(dá)水平比三陰性乳腺癌高(45.6% vs 37.3%)，但二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。因此，CA153多用于乳腺癌的聯(lián)合檢測(cè)，我們研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清中CA153水平較健康對(duì)照組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，且乳腺癌患者化療1年后復(fù)發(fā)的CA153水平較未復(fù)發(fā)的患者明顯增高，血清中CA153升高機(jī)制可能是由于乳腺癌細(xì)胞增殖加速，促進(jìn)細(xì)胞間的黏附及基質(zhì)相關(guān)作用，從而促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移[18]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，TPS+ CA153聯(lián)合檢測(cè)在維持較高的靈敏度，可提高檢測(cè)特異性。

腫瘤生長(zhǎng)依賴(lài)新生雜亂的血管形成，需要血管中血液提供氧氣和所需養(yǎng)分，VEGF是一種具有高度生物活性的功能性糖蛋白，作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞參與腫瘤內(nèi)的血管生成，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤急劇生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[19]。VEGF被認(rèn)為是最有意義的血液腫瘤篩查的標(biāo)記物。研究發(fā)現(xiàn)VEGF在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮極為重要的作用[20]。我們研究發(fā)現(xiàn)，與正常人相比，乳腺癌患者在化療前血清VEGF水平顯著升高(P<0.001)，且化療1年后復(fù)發(fā)的VEGF水平較未復(fù)發(fā)的患者同樣增高。

通過(guò)對(duì)乳腺癌患者血清TPS、CA153、VEGF水平檢測(cè)以評(píng)估乳腺癌診斷價(jià)值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清TPS+CA153+VEGF的敏感性為96.8%，特異性為91.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為98.7%，陰性預(yù)測(cè)值為84.5%，三者聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值均明顯高于任一單項(xiàng)檢測(cè)和兩兩聯(lián)合檢測(cè)(P<0.05)，提示三者聯(lián)合在保證乳腺癌檢測(cè)靈敏度的同時(shí)，特異性也較好。最后，我們對(duì)乳腺癌組患者化療前血清TPS、CA153、VEGF水平進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清TPS水平與CA153、VEGF呈正相關(guān)(r=0.626，r=0.472，P<0.05)。國(guó)內(nèi)大部分研究都發(fā)現(xiàn)，單一的血清腫瘤標(biāo)志物診斷乳腺癌均有一定的局限性，其敏感度及特異度均不理想，但多種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在提高敏感度的同時(shí)還有較高的特異度。 因此，對(duì)正常女性體檢者或疑似乳腺癌患者添加血清學(xué)TPS、CA153、VEGF水平檢測(cè)對(duì)乳腺癌的早期診斷具有積極意義，可以提高乳腺癌患者的生存率，改善預(yù)后。

本研究表明，TPS、CA153、VEGF這三項(xiàng)血清腫瘤標(biāo)志物在乳腺癌的診斷方面具有一定的臨床意義；單一的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)時(shí),CA153較其他兩項(xiàng)價(jià)值更大；TPS、CA153、VEGF三者進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)能夠提高乳腺癌早期檢出率。但是本研究也存在許多不足之處：作為單中心回顧性研究，樣本量較少，并且隨訪時(shí)間較短，不可避免地帶來(lái)了選擇偏倚、信息偏倚。因此，研究結(jié)論仍有待進(jìn)一步納入多中心數(shù)據(jù)或通過(guò)前瞻性研究進(jìn)行驗(yàn)證。

綜上所述，血清學(xué)聯(lián)合檢測(cè)提供了一個(gè)簡(jiǎn)單的、非侵入性的、廉價(jià)的、可靠的檢測(cè)手段，血清TPS、CA153、VEGF聯(lián)合檢測(cè)可有效提高診斷乳腺癌的敏感性和特異性，對(duì)于乳腺癌的早期篩查和診斷具有重要意義。