沙棘油中脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)方法

張健雄 閆志強(qiáng) 于 文

（1. 西安開米股份有限公司，陜西西安，710075；2. 上海開米科技有限公司，上海，201808）

沙棘油富含不飽和脂肪酸、維生素、三萜、甾體類化合物及微量元素等多種對(duì)人體有益的活性物質(zhì)，具有抗疲勞、增強(qiáng)機(jī)體活力及抗癌等特殊藥理性能，并有促進(jìn)傷口愈合、緩解冠心病和心絞痛等保健功能[1-3]，其在食品、化妝品中的應(yīng)用也越來越多。市場(chǎng)銷售的沙棘油主要有3種：沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全油，由于提取原料、工藝不同，所生產(chǎn)的沙棘油組分存在差異。研究比較沙棘籽油、果油的主要成分脂肪酸，并將其作為沙棘油的鑒別依據(jù)?，F(xiàn)脂肪酸的分析方法是GB/T 17377－2008《動(dòng)植物油脂脂肪酸甲酯的氣相色譜分析》，該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)樣品的前處理步驟為：皂化，三氟化硼或三甲基氫氧化硫甲酯化，溶劑萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，氣相色譜檢測(cè)。整個(gè)流程最快需要8 h，步驟多，方法的變異系數(shù)大?；诖耍瑓⒖家恍┏墒斓慕?jīng)驗(yàn)[4-10]，對(duì)樣品前處理及色譜條件進(jìn)行了優(yōu)化，以期建立一種便捷準(zhǔn)確、可靠性強(qiáng)、適用性廣的檢測(cè)方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)原理

甘油酯在氫氧化鉀-甲醇溶液中被甲酯化反應(yīng)生成脂肪酸甲酯，且脂肪酸甲酯能被氣相色譜檢測(cè)。

1.2 材料

甲醇，色譜純，德國(guó)默克公司；氫氧化鉀，分析純，天津科密歐試劑；正己烷，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；超純水，自制；10種沙棘油樣品，市售。

1.3 儀器

賽默飛1310-ISQ氣質(zhì)連用儀或等效的氣相色譜；色譜柱：TG-5MSφ30 m×0.25 mm×0.25 μm毛細(xì)柱。

1.4 方法

1.4.1 氣相色譜條件

進(jìn)樣器溫度：270℃；分流比：20；流速：1.0 mL/min；載氣：氦氣；

柱溫采用程序升溫：

1.4.2 質(zhì)譜條件

傳輸線溫度：260℃；離子源：電子轟擊源(EI)溫度 240℃；電子能量70 eV，發(fā)射電流34.6 μA，電子倍增電壓1638 V，質(zhì)量范圍45～450 amu，溶劑延遲 3 min。

1.4.3 樣品配制

稱取10 mg沙棘油樣品于5 mL具塞離心管中，加入2.0 mL正己烷振蕩溶解，再加入1 mL濃度 2 mol/L氫氧化鉀-甲醇快速混勻，以3000 r/min離心10 min，取上清液進(jìn)行氣相色譜分析。

1.5 定性分析

取離心后的上清溶液，用氣相色譜-質(zhì)譜進(jìn)行全掃描分析。用化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)檢索NIST02.2－2014譜圖庫(kù)進(jìn)行譜圖解析，并參考有關(guān)文獻(xiàn)[4-10]，確認(rèn)沙棘油中各脂肪酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

1.6 定量分析

取離心后的上清溶液，用氣相色譜-質(zhì)譜進(jìn)行全掃描分析，用面積百分比法定量計(jì)算沙棘果油、沙棘籽油中各脂肪酸的相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 GC-MS測(cè)定結(jié)果

對(duì)市售10種沙棘油進(jìn)行色譜質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)，10種沙棘油樣品主要成分如圖1所示，其中以沙棘果油-6的色譜圖為代表。

圖1 沙棘果油-6的色譜圖

表1是沙棘果油和籽油中的脂肪酸含量分析。從表1得出：沙棘果油和籽油的區(qū)別很大，果油中棕櫚酸含量（35%）遠(yuǎn)大于籽油（15%）；而不飽和脂肪酸含量籽油遠(yuǎn)超果油。沙棘籽油和沙棘果油中脂肪酸含量配比經(jīng)與文獻(xiàn)資料[4-10]對(duì)比是相符的。

2.2 平行性測(cè)試

以沙棘果油-6為測(cè)試樣本，按1.4.3步驟進(jìn)行樣品前處理，作6個(gè)平行樣，檢測(cè)結(jié)果見表2、表3。

表1 沙棘果油和籽油中得到的脂肪酸及相對(duì)百分比含量 %

表2 沙棘果油中各組分保留時(shí)間

從表2得出：各脂肪酸組分的保留時(shí)間相對(duì)變異系數(shù)在0.06%～0.49%之間；從表3得出：各主要脂肪酸含量（以相對(duì)含量≥1%各組分統(tǒng)計(jì)）相對(duì)變異系數(shù)在0.23%～4.43%之間，表明該方法定性、定量均有良好的重復(fù)性。

表3 沙棘果油6個(gè)平行樣中各組分面積百分比含量

3 結(jié)論

該測(cè)試方法僅需2 h左右，與GB/T 17377－2008相比，可快速鑒別沙棘果油、籽油，可用于原料檢驗(yàn)和市場(chǎng)監(jiān)督。