蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測樣品前處理方法研究

果布次仁

(西藏貢覺縣哈加鄉(xiāng)農(nóng)牧綜合服務中心，西藏 昌都 854200)

在一定條件下，有機磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能起到一定的抑制作用，同時抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關。在正常情況下，酶通過催化神經(jīng)傳導代謝產(chǎn)物乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生反應，產(chǎn)生黃色物質，該產(chǎn)物在食品快速檢測儀器中用分光光度針在412 nm 處測定吸光度隨時間的變化值并計算抑制率，通過抑制率的高低可以判斷出蔬菜是否含有高劑量有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留。在蔬菜中高劑量的有機磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留會引發(fā)食物中毒和影響身心健康，快速檢測蔬菜中有機磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留，可及時發(fā)現(xiàn)問題，控制高劑量農(nóng)藥殘留蔬菜上市，杜絕發(fā)生各類食品安全事故。但是，快速檢測結果無法保證不出現(xiàn)假陽性等情況，在我國偏遠地區(qū)和農(nóng)村普遍使用快速檢測來滿足和保障農(nóng)產(chǎn)品使用安全，一旦出現(xiàn)假陽性等情況，無法及時經(jīng)氣相色譜法等實驗技術驗證快速檢測結果，因此規(guī)范的樣品前處理方法對于快速檢測結果的準確性至關重要，以確保減少和避免假陽性等情況頻繁出現(xiàn)。

1 材料及方法

1.1 試劑及設備

試劑配置：量取1 mL緩沖液(100x)，加入100 mL純凈水，搖勻，于常溫保存。

試劑：緩沖液，顯色劑，酶試劑，底物。

設備：食品安全快速檢測儀(深圳市易瑞生物技術股份有限公司，中國)、電子天平、比色皿。漏斗、濾紙、移液槍、槍頭、試管、菜板、試管架、剪刀。

樣品：小白菜、娃娃菜、木耳、西紅柿、胡蘿卜、黃瓜、土豆、香菜、香菇。

1.2 樣品前處理

1.2.1 整珠提取法

選出樣品，擦干表面泥土及灰塵，稱取2 g非剪碎整珠樣品，放入三角瓶或50 mL 離心管中，加入10 mL 緩沖液，輕輕震搖1^2 min，靜置5 min 以上，用濾紙過濾，濾液作為樣品待測液[8]。

1.2.2 整體測定法

選出樣品，擦干表面泥土及灰塵，剪成1 cm 左右見方碎片，稱取2 g 剪碎的樣品，放入三角瓶或50 mL 離心管中，加入10 mL 緩沖液，輕輕震搖1^2 min，靜置5 min 以上，用濾紙過濾，濾液作為樣品待測液。

1.3 對照測試

在比色皿中依次加入3.0 mL 緩沖液，100 μL酶試劑和100 μL 顯色劑，混勻；靜置10 min，加入100 μL 底物，迅速搖勻，立即上機進行對照測試。對照測試△A 值必須大于0.1(1 min 測試)或0.3(3 min測試)。

1.4 樣品測試

在比色皿中依次加入3.0 mL 樣品待測液，100 μL酶試劑和100 μL顯色劑，混勻，靜置10 min，加入100 μL 底物，迅速搖勻，立即上機進行樣品測試。

蔬菜作為日常生活所必須的食品，它的安全性直接關系到人們的身體健康，由于蔬菜生產(chǎn)方式主要以分散種植為主，且大部分種植戶安全生產(chǎn)意識淡薄，農(nóng)藥使用方法和用量上不統(tǒng)一，導致蔬菜上市后農(nóng)藥殘留超標現(xiàn)象相對較多。為避免出現(xiàn)大量的蔬菜農(nóng)藥殘留超標蔬菜上市現(xiàn)象，國家出臺了蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法和檢出限標準(表1)。

表1 部分農(nóng)藥的檢出限表

2 結果與分析

2.1 結果判定

蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測抑制率大于等于50%表示檢測結果不合格，在出現(xiàn)陽性結果時需做2 次以上重復檢測，按照重復檢測結果判定，確保檢測結果準確無誤；蔬菜農(nóng)藥殘留檢測抑制率小于50%表示農(nóng)藥含量符合相關標準要求，即檢測結果合格。

根據(jù)整珠提取法檢測結果表2 顯示，以下9 批次樣品檢測結果均合格，按照檢測結果和葉綠素含量分析，以下樣品中小白菜、西紅柿、胡蘿卜、香菜適合利用整珠提取法進行樣品前處理并檢測有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留。

表2 整株提取法檢測結果表

根據(jù)整體測定法檢測結果表3 顯示，以下9 批次樣品中，西紅柿、黃瓜、胡蘿卜、土豆、香菜的檢測結果明顯高于整珠提取法的檢測結果，如葉綠素含量越高會導致整體測定法的檢測結果越高，西紅柿、黃瓜、胡蘿卜等5 種樣品應按照整珠測定法進行樣品前處理，反之采取整體測定法進行樣品前處理。

2.2 結果分析

按照試劑的加入順序和加入量，加入底物，立刻觀察溶液顏色變化情況。若試管內(nèi)溶液顏色立刻變黃，無逐漸過程，說明底物已經(jīng)分解，不能再用，若試管顏色一直沒變化，表明酶已失效；若試管內(nèi)溶液顏色逐漸變黃，說明試劑基本正常。樣品檢測時，室內(nèi)溫度低于37 ℃時，酶反應速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑后放置反應的時間相對延長，同時確保1 min 的對照測試△A0值在0.1 以上。葉綠素含量較高的蔬菜檢測農(nóng)藥殘留時會對快速檢測結果產(chǎn)生影響，因此按照檢測結果表2、表3及葉綠素含量顯示，西紅柿、黃瓜、胡蘿卜、香菜應用整珠提取法進行樣品前處理，確保檢測結果的規(guī)范和準確性。

表3 整體測定法檢測結果表

2.3 結 論

農(nóng)產(chǎn)品安全是關系民生問題的主要因素之一，蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測對農(nóng)產(chǎn)品安全發(fā)展具有重要意義，通過對10 個品種蔬菜采取不同的樣品前處理方法，分析了2 種樣品前處理方法對不同農(nóng)產(chǎn)品的適應性，從而避免了農(nóng)藥殘留檢測過程中假陽性等現(xiàn)象的出現(xiàn)。