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      基于UPLC法測定指標成分結合指紋圖譜評價不同產(chǎn)地川赤芍不同部位的質(zhì)量

      2021-04-07 02:04:10鐘海蓉張紹山海來約布曲別軍長李奕松楊正明
      中草藥 2021年7期
      關鍵詞:赤芍芍藥指紋

      鐘海蓉,張紹山,肖 芳,海來約布,曲別軍長,李奕松,楊正明*,劉 圓

      ? 藥材與資源 ?

      基于UPLC法測定指標成分結合指紋圖譜評價不同產(chǎn)地川赤芍不同部位的質(zhì)量

      鐘海蓉1,張紹山2, 4,肖 芳1,海來約布1,曲別軍長1,李奕松1,楊正明2, 4*,劉 圓3, 4*

      1. 西南民族大學藥學院,四川 成都 610041 2. 西南民族大學青藏高原研究院,四川 成都 610041 3. 西南民族大學民族醫(yī)藥研究院,四川 成都 610041 4. 四川省羌彝藥用資源保護與利用技術工程實驗室,四川 成都 610225

      采用超高效液相色譜法(UPLC)分別對18個產(chǎn)地川赤芍的根、莖和葉中的芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖3種成分進行含量測定,并建立其指紋圖譜,基于多元統(tǒng)計法綜合分析川赤芍根、莖和葉中主要化學成分的整體分布以及在不同部位中的差異性,并對川赤芍品質(zhì)進行綜合評價。采用UPLC法,色譜條件:C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脫,柱溫30 ℃,體積流量0.2 mL/min,進樣量1 μL,檢測波長230 nm;采用2012版《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》軟件建立圖譜;并采用差異分析、相似度分析、主成分分析(PCA)、TOPSIS分析和偏最小二乘法判別分析(PLS-DA)對川赤芍品質(zhì)進行綜合評價。根據(jù)含量測定結果,川赤芍中氧化芍藥苷含量大小為根>莖>葉;芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量大小為根>葉>莖。其中,根樣品中的芍藥苷含量均大于1.8%,符合《中國藥典》2020年版規(guī)定;莖、葉中芍藥苷含量與根較為接近。并建立了根、莖、葉的UPLC指紋圖譜,共標定了17個共有峰,并指認出3個共有峰(芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖)。相似度評價結果顯示,不同產(chǎn)地川赤芍根、莖、葉的相似度均較好,質(zhì)量穩(wěn)定。指紋圖譜可有效評價不同產(chǎn)地川赤芍品質(zhì)。川赤芍莖、葉中芍藥苷含量與根中相近,基于《中國藥典》2020年版以芍藥苷為質(zhì)量控制指標,為綜合評價川赤芍的品質(zhì)和開發(fā)新的入藥部位等研究提供相關理論基礎。

      川赤芍;指紋圖譜;芍藥苷;氧化芍藥苷;主成分分析;品質(zhì)評價;資源開發(fā)

      川赤芍Lynch為毛茛科芍藥屬多年生草本植物,以其根入藥,為《中國藥典》2020年版所收載赤芍的來源之一。赤芍為傳統(tǒng)常用中藥材,用途廣泛,具有清熱涼血、散瘀止痛的功效[1]。川赤芍化學成分主要為苷類、酚類、黃酮類化合物,其質(zhì)量評價多以單萜苷類成分芍藥苷為指標,《中國藥典》2020年版規(guī)定芍藥苷不得少于1.8%[2-3]。

      川赤芍主產(chǎn)地為四川西部,集中生長在青藏高原的邊緣地帶。其生長環(huán)境苛刻,通常為海拔2650~3750 m的高原和峽谷地,在生態(tài)脆弱的青藏高原,川赤芍的自我再生非常緩慢,目前人工種植尚未起步;多個主產(chǎn)區(qū)的川赤芍野生資源蘊藏量逐年減少,上市量隨之銳減,野生川赤芍已呈瀕危之勢[4-5]。

      近年來,指紋圖譜法在中藥研究中應用較多[6-7],作為評價藥材質(zhì)量和穩(wěn)定性的最優(yōu)方法,具有綜合、宏觀、模糊等非線性特點[8-11]。有相關文獻報道[12-14],根據(jù)2種基原的赤芍指紋圖譜,可快速、準確地鑒別2種赤芍,綜合評價二基原赤芍藥材的質(zhì)量。目前,前人對以芍藥為基原的赤芍研究較多,但是對于川赤芍的研究較少。本研究采用指紋圖譜、相似度分析、聚類分析等方法從多角度分析,綜合評價不同產(chǎn)地、不同部位的川赤芍質(zhì)量。從中藥資源的綜合利用和藥材質(zhì)量評價角度出發(fā),采用UPLC法對18批不同產(chǎn)地川赤芍的不同植物部位中芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖等3種成分進行含量測定,并建立了根、莖、葉的化學成分指紋圖譜,通過多元統(tǒng)計分析,研究川赤芍根、莖、葉中化學成分的整體分布和含量變化及定量比較,以期最大化的綜合利用野生川赤芍資源,對評價川赤芍品質(zhì)和開發(fā)新的入藥部位等研究具有一定的參考意義。

      1 儀器、試劑與材料

      WatersAcquityUPLC?超高效液相色譜儀(美國Waters公司);ACQUITY UPLC?BEH C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm);BP211D型電子天平(德國Sartorius公司);KQ-5200E型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司);METTLERAE240電子分析天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司)。

      對照品芍藥苷(批號18012305)、氧化芍藥苷(批號18082704)、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖(批號19010904)均購自成都格利普生物科技有限公司,質(zhì)量分數(shù)均≥98.0%;乙腈為色譜純(美國Sigma公司);甲醇為分析純(成都市科隆化工試劑廠);水為屈臣氏蒸餾水;其余試劑為分析純。

      本課題組在全國第四次中藥資源普查工作中,對汶川縣和壤塘縣進行中藥資源調(diào)查,分別于2017—2018年于四川省甘孜藏族自治州各地與阿壩藏族羌族自治州沿途采集川赤芍樣品。經(jīng)西南民族大學青藏高原研究院劉圓教授鑒定為毛茛科芍藥屬植物川赤芍Lynch,川赤芍樣品信息見表1。

      表1 川赤芍樣品來源

      2 方法與結果

      2.1 色譜條件

      Waters Acquity UPLC?超高效液相色譜儀(美國Waters公司);ACQUITY UPLC?BEH C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm);流動相為乙腈(A)- 0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脫程序:0~5 min,5%~8% A;5~8 min,8%~12% A;8~13 min,12%~15% A;13~23 min,15%~20% A;23~27 min,20%~22% A;27~33 min,22%~75% A;33~34 min,75%~100% A;柱溫30 ℃;體積流量0.2 mL/min;進樣量1 μL;檢測波長230 nm。供試品及對照品色譜圖見圖1。

      2.2 混合對照品溶液制備

      分別精密稱取芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖對照品適量,加甲醇制成含芍藥苷1.017 mg/mL、氧化芍藥苷0.200 mg/mL、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖0.296 mg/mL的混合對照品溶液,搖勻,即得。

      1-氧化芍藥苷 2-芍藥苷 3-1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖

      2.3 供試品溶液制備

      稱取藥材粉末(過3號篩)約0.5 g,精密稱定,置于100 mL錐形瓶中,加入甲醇25 mL,搖勻,密封稱定質(zhì)量,超聲75 min后,冷卻,密封稱定質(zhì)量,用甲醇補足減少的質(zhì)量,濾過,續(xù)濾液用0.22 μm微孔濾膜濾過,備用。

      2.4 方法學考察

      2.4.1 專屬性試驗 分別取供試品溶液(根、莖、葉)和混合對照品溶液“2.1”項下色譜條件測定,得到特征峰,供試品溶液與雜質(zhì)分離良好,無干擾。

      2.4.2 線性關系考察 精密吸取混合對照品溶液,稀釋成6個不同濃度,按“2.1”項下色譜條件測定,并記錄峰面積。以對照品濃度為橫坐標(),峰面積為縱坐標(),繪制標準曲線,并進行線性回歸,得3種成分的回歸方程與線性范圍,見表2。

      表2 回歸方程與線性范圍

      2.4.3 精密度試驗 取混合對照品溶液連續(xù)進樣6次,按“2.1”項下色譜條件測定,計算峰面積的RSD值,氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖峰面積RSD值分別為0.71%、0.26%、1.98%。

      2.4.4 重復性試驗 精密稱取同一藥材樣品,共6份,制備供試品溶液,按“2.1”項下色譜條件測定,得氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖質(zhì)量分數(shù)RSD分別是1.45%、1.31%、1.08%。

      2.4.5 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液,分別于6、12、18、24、32、40、48 h進樣,按“2.1”項下色譜條件測定,得氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖峰面積RSD分別是2.75%、0.83%、1.26%。

      2.4.6 加樣回收率試驗 精密稱取已測定的樣品0.25 g,共6份,分別添加一定濃度的芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖對照品溶液,依照“2.3”項方法制備樣品溶液,按“2.1”項下色譜條件測定,芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖加樣回收率在98.72%~101.41%,RSD在1.49%~2.68%。

      2.5 不同產(chǎn)地川赤芍多成分含量測定

      2.5.1 川赤芍不同植物部位含量測定結果及化學成分定量比較 18批川赤芍不同植物部位含量測定結果見表3。由表3可知,川赤芍根樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量分別為0.14%~0.85%、1.79%~4.11%、0.20%~0.80%;莖樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量分別為0.10%~0.32%、1.08%~1.96%、0.09%~0.58%;葉樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖質(zhì)量分數(shù)分別為0.02%~0.18%、1.13%~5.40%、0.11%~0.70%。根中芍藥苷平均含量為3.20%,均大于1.8%,符合藥典規(guī)定;18批次葉樣品的平均含量為2.19%,大部分達到了《中國藥典》2020年版標準,且1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖平均含量與根相近;莖中芍藥苷平均質(zhì)量分數(shù)為1.45%,接近《中國藥典》標準。因此,考慮可將莖葉作為芍藥苷的開發(fā)部位使用。

      2.5.2 差異性分析 川赤芍根、莖、葉樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷和1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量范圍、均值及差異性分析結果見圖2。

      由圖2可知,川赤芍中氧化芍藥苷含量大小為根>莖>葉,芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量大小為根>葉>莖。川赤芍根、莖、葉中氧化芍藥苷和芍藥苷含量差異極顯著,1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量差異顯著。

      2.5.3 TOPSIS分析 根據(jù)氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖權重結果(以變異系數(shù)法計算,表4),以標準化的數(shù)據(jù)采用DPS軟件進行TOPSIS分析[15],得川赤芍根(G1~18)、莖(J1~18)、葉(Y1~18)結果見表5。結果表明,以氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄為評價指標,根據(jù)最優(yōu)值相對接近度(CI)排名,3號川赤芍根樣品質(zhì)量最優(yōu)、6號川赤芍莖樣品質(zhì)量最優(yōu)、6號川赤芍葉樣品質(zhì)量最優(yōu)。

      表3 川赤芍根、莖和葉中3種化學成分的含量測定結果

      A-氧化芍藥苷 B-芍藥苷 C-1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖

      A-oxypaeoniflorin B-paeoniflorin C-1,2,3,4, 6--pentagalloylglucose

      小寫字母表示顯著性α=0.05,大寫字母表示顯著性α=0.01

      2.6 指紋圖譜的建立與分析

      中藥化學成分種類繁多復雜,測定單一成分或幾種成分很難表征其藥材質(zhì)量,因此本研究對18批川赤芍藥材建立指紋圖譜,從整體上分析其化學成分。2.6.1 指紋圖譜的建立 按照“2.1”項下條件依次測定,“2.3”項下條件制備供試品,將18個產(chǎn)地的川赤芍UPLC數(shù)據(jù)以AIA格式導入2012版《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》軟件中,分別以G1、J1和Y1樣品作為參照圖譜,采用中位數(shù)法,時間窗寬度為0.5,經(jīng)過多點校正后,進行色譜峰的匹配,分別生成川赤芍根、莖和葉指紋圖譜疊加圖(圖3)。以5號峰作為對照峰,共確定17個共有峰,用對照品對所得色譜峰進行比對,共指認出3個峰,分別為氧化芍藥苷(3號峰)、芍藥苷(5號峰)、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖(10號峰)。

      表4 3種成分的含量RSD與權重結果

      表5 川赤芍不同部位TOPSIS分析結果

      G-根 J-莖 Y-葉,下同

      G-root J-stem Y-leaves,same as below

      2.6.2 相似度分析 分別對川赤芍根、莖和葉樣品的指紋圖譜與對照指紋圖譜進行相似度評價(表6),結果顯示,18批川赤芍根、莖和葉UPLC指紋圖譜相似度系數(shù)相似度均在0.905之上,說明各產(chǎn)地產(chǎn)地川赤芍質(zhì)量穩(wěn)定。

      2.6.3 主成分分析 采用SPSS 19.0軟件,以17個共有峰(1~17)峰面積為變量,對川赤芍根、莖、葉樣品進行主成分分析。參考文獻報道[16-17],選取每個主成分因子最大荷載值10%范圍內(nèi)和最高Norm值10%范圍內(nèi)的指標進入品質(zhì)指標評價的最小數(shù)據(jù)庫集(minimum data set,MDS)。將18個產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)樣品的共有峰峰面積導入SPSS 19.0軟件,對各共有峰峰面積進行標準化處理,計算主成分特征值、累積貢獻率及主成分綜合得分等[18]。

      川赤芍各樣品主成分因子載荷矩陣、公因子方差和Norm值見表7。川赤芍根樣品各共有峰的公因子方差≥0.518(4的公因子方差最小,為0.518;11的公因子方差最大,為0.965),特征值>1的主成分有3個,且累積貢獻率達84.262%,基本可以客觀反映川赤芍根樣本信息。選取共有峰2、10~17進入MDS,表明這些共有峰可以基本反映川赤芍根的品質(zhì)信息。川赤芍莖樣品各共有峰的公因子方差≥0.539(6的公因子方差最小,為0.539;15的公因子方差最大,為0.986),特征值>1的主成分有4個,且累積貢獻率達88.975%,基本可以客觀反映川赤芍莖樣本信息。選取共有峰2、4、8~17進入MDS,表明這些共有峰可以基本反映川赤芍莖的品質(zhì)信息。川赤芍葉樣品各共有峰的公因子方差≥0.546(7的公因子方差最小,為0.539;11的公因子方差最大,為0.986),特征值>1的主成分有3個,且累積貢獻率達87.922%,基本可以客觀反映川赤芍葉樣本信息。選取共有峰2、4、9~17進入MDS,表明這些共有峰可以基本反映川赤芍葉的品質(zhì)信息。根據(jù)各樣品主成分綜合得分結果(表8),川赤芍根的綜合得分排名為G17>G3>G2>G6>G16……G5>G13>G7,表明崗木達村(G17)、冷冷村(G3)、沙灣村(G2)、學海村(G6)、達日村(G16)這5個產(chǎn)地的川赤芍根樣品質(zhì)量較好。川赤芍莖的綜合得分排名為J12>J6>J16>J8>J3…… J15>J10>J17,表明巴朗山(J12)、學海村(J6)、達日村(J16)、日都村(J8)、冷冷村(J3)這5個產(chǎn)地的川赤芍莖樣品質(zhì)量較好。川赤芍葉的綜合得分排名為Y11>Y15>Y17>Y10>Y7……Y2>Y14>Y4,表明仁達村(Y11)、洞窩村(Y15)、崗木達村(Y17)、塔拖村(Y10)、小同村(Y7)這5個產(chǎn)地的川赤芍葉樣品質(zhì)量較好。

      A-川赤芍根對照圖譜 B-川赤芍根疊加圖 C-川赤芍莖對照圖譜 D-川赤芍莖疊加圖 E-川赤芍葉對照圖譜 F-川赤芍葉疊加圖

      表6 18批川赤芍相似度結果

      2.6.4 TOPSIS分析 根據(jù)川赤芍不同部位共有峰權重結果,將標準化的數(shù)據(jù)采用DPS軟件進行TOPSIS分析[15],以共有峰面積做評價指標,根據(jù)最優(yōu)值相對接近度(CI)排名(表8)。結果表明,14號川赤芍根樣品質(zhì)量最優(yōu)、12號川赤芍莖樣品質(zhì)量最優(yōu)、11號川赤芍葉樣品質(zhì)量最優(yōu)。

      表7 川赤芍各部位樣品主成分因子載荷矩陣、公因子方差和Norm值

      表8 川赤芍不同部位主成分分析與TOPSIS分析結果

      2.6.5 偏最小二乘回歸(PLS-DA)分析 為了進一步篩選引起不同產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)質(zhì)量特征差異的標志性成分,采用SIMCA 13.0軟件對18批不同產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)UPLC指紋圖譜的原始數(shù)據(jù)進行PLS-DA分析,進而提取PLS-DA模型中17個變量的VIP值(圖4),以變量的VIP>1作為評價標準,篩選引起不同產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)質(zhì)量差異的潛在化學成分[19]。篩選結果表明,川赤芍根樣品色譜峰1、15、5、17、4等的VIP值大于1,說明這些峰所代表的成分是造成不同產(chǎn)地川赤芍根樣品差異的主要標志性物質(zhì);川赤芍莖樣品色譜峰12、15、16、17、11、5、13等的VIP值大于1,說明這些峰所代表的成分是造成不同產(chǎn)地川赤芍莖樣品差異的主要標志性物質(zhì);川赤芍葉樣品色譜峰5、7、1、15等的VIP值大于1,說明這些峰所代表的成分是造成不同產(chǎn)地川赤芍葉樣品差異的主要標志性物質(zhì);其中5號峰為芍藥苷,其他幾個還有待鑒別。因此,芍藥苷是影響產(chǎn)地差異的主要評價因素,這與藥典選取芍藥苷為指控標志相一致。

      圖4 川赤芍根(A)、莖(B)、葉(C) 的UPLC指紋圖譜共有色譜峰的PLS-DA VIP值

      3 討論

      本研究為了優(yōu)化供試品制備的提取條件,分別考察了提取溶劑(甲醇、50%甲醇、乙醇、50%乙醇)、提取方法(回流提取法和超聲提取法)、提取時間(30、45、60、75、90、120 min)、料液比(1∶10、1∶25、1∶50、1∶75)對提取效果的影響,確定最佳提取條件為:以甲醇為溶劑,超聲提取75 min。建立的UPLC測定方法操作簡單、準確可靠,精密度、穩(wěn)定性和重復性良好。

      川赤芍主要含有苷類和沒食子酸及其衍生物兩大類成分,具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、擴張血管、抗炎、抗?jié)?、抗癌、抗糖尿病等生物學活性[20-24]。本研究所選芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖為川赤芍的主要活性成分,根據(jù)劉昌孝院士提出的質(zhì)量標志物原則[25],以上3種成分均與川赤芍功能密切相關,同時可以定性鑒別和定量測定。因此,本研究選擇以上3種成分作為質(zhì)量標志物科學而合理,符合中醫(yī)藥研究理論。

      綜合多元統(tǒng)計分析結果,基于不同產(chǎn)地、不同部位川赤芍定量分析和指紋圖譜,本課題組所建立的多元統(tǒng)計分析方法可用于提高川赤芍的質(zhì)量控制和質(zhì)量標準,可作為不同產(chǎn)地、不同部位中藥材間的質(zhì)量評價方法。

      目前,川赤芍主要為生態(tài)脆弱的青藏高原野生資源,且分布范圍廣,尚未有人工栽培。本研究對不同產(chǎn)地川赤芍不同植物部位化學成分進行了比較。UPLC指紋圖譜相似度評價結果顯示,川赤芍各部位的化學成分極為相似,且莖和葉化學成分含量較接近,說明不同產(chǎn)地川赤芍根藥材質(zhì)量存在顯著差異?!吨袊幍洹?020年版規(guī)定川赤芍主要的入藥部位為根,且以芍藥苷含量作為主要質(zhì)控指標。本研究結果表明,川赤芍根中芍藥苷平均含量為3.20%,均符合藥典規(guī)定。川赤芍莖和葉均含有芍藥苷,其中葉中芍藥苷平均含量高達2.19%,大部分達到藥典規(guī)定;莖中芍藥苷含量雖未達藥典標準,但其含量可觀。因此,建議在對川赤芍莖葉做進一步藥效學研究,考慮是否可將川赤芍莖葉與根同等入藥或者川赤芍的莖葉作為新的入藥部位,綜合有效利用已漸瀕危之勢的川赤芍野生資源。

      利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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      Comprehensive evaluation on quality of different habitats and parts ofbased on UPLC fingerprint and multicomponent determination

      ZHONG Hai-rong1, ZHANG Shao-shan2, 4, XIAO Fang1, HAILAI Yue-bu1, QUBIE Jun-zhang1, LI Yi-song1, YANG Zheng-ming2, 4, LIU Yuan3, 4

      1. College of Pharmacy, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China 2. Institute of Qinghai-Tibetan Plateau, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China 3. Ethnic Medicine Institute, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, China 4. Sichuan Provincial Qiang-Yi Medicinal Resources Protection and Utilization Technology and Engineering Laboratory, Chengdu 610225, China

      To determine the content of paeoniflorin, oxypaeoniflorin and 1,2,3,4,6--pentagalloyl glucose in different parts of 18 batches ofand establish an UPLC method for the fingerprint analysis to make a comprehensive analysis on the overall distribution and the differences of the main chemical components in different parts based on the multivariate statistical analysis, which was used to evaluate the medicinal materials quality of.The separation was performed on a chromatographic Diamonsil C18column (100 mm×2.1 mm, 1.8 μm), with acetonitrile-0.1% phosphoric acid as the mobile phase for gradient elution. Column temperature was 30 ℃. Volume flow rate was 0.2 mL/min. Injection was 1 μL and the detection wavelength was 230 nm. The fingerprints were established and evaluated by the Similarity Evaluation System of TCM (version 2012). Difference analysis, similarity analysis (SA), principal component analysis (PCA), TOPSIS analysis, and orthogonal partial least squares-discriminant analysis (OPLS-DA) were used to comprehensively evaluate the quality of.According to the content determination results, the content of oxypaeoniflorin inwas as follows: root>stem>leaf, and the content of paeoniflorin, 1,2,3,4,6--pentagalloyl glucose was as follows: root>leaf>stem. Among them, the content of paeoniflorin in root samples was more than 1.8%, which was in line with the provisions of the 2020 edition of China Pharmacopoeia. The content of paeoniflorin in stems and leaves was close to that of in roots. In this study, the UPLC fingerprint of roots, stems and leaves was established, a total of 17 common peaks were identified, and three common peaks (paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6--pentagalloyl glucose) were identified. The results of similarity evaluation showed that the similarity of roots, stems and leaves offrom different habitats was good and the quality was stable.Fingerprint could effectively evaluate the quality offrom different habitats. Based on the quality control index of paeoniflorin (C23H28O11) in the 2020 edition of the China Pharmacopoeia, the content of paeoniflorin in the stems and leaves ofwas similar to that of in the roots, this study provided relevant theoretical basis for the comprehensive evaluation of the quality ofand the development of new medicinal parts.

      Lynch; fingerprints; oxypaeoniflorin; principal component analysis; quality evaluation; resource development

      R286.2

      A

      0253 - 2670(2021)07 - 2062 - 10

      10.7501/j.issn.0253-2670.2021.07.023

      2020-08-09

      國家重點研發(fā)計劃(2018YFC1708005);四川省科技農(nóng)村領域重點研發(fā)(2019YFN0089);中央高校基本科研業(yè)務費專項資金研究類項目(2020NGD01)

      鐘海蓉(1994—),女,在讀碩士,主要從事民族藥品種、品質(zhì)評價及新藥資源開發(fā)與利用研究。Tel: 18328092180 E-mail: 392009773@qq. com

      楊正明,助理研究員,主要從事民族藥資源品質(zhì)評價及其生理生態(tài)與栽培研究。Tel: (028)85528812 E-mail: 790721918@qq.com

      劉 圓,教授,博士生導師,從事民族藥品種、品質(zhì)評價及新藥資源開發(fā)與利用研究。Tel: (028)85528812 E-mail: 499769896@qq.com

      [責任編輯 時圣明]

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