豬腦心肌炎病毒診斷方法及應(yīng)用

何爭(zhēng)福

（福建省平和縣安厚鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站363707）

1 腦心肌炎的臨床癥狀和病理變化

腦心肌炎是一種人畜共患的傳染類疾病，腦心肌炎病毒會(huì)導(dǎo)致豬和一些嚙齒類動(dòng)物的心肌炎或腦炎。 此病毒能夠經(jīng)由口腔感染，如果仔豬不幸感染上此種病毒，會(huì)因?yàn)樾募∈軗p死亡。仔豬的易感性特別強(qiáng)， 出生不足20d 的仔豬容易出現(xiàn)致死性感染。成年豬通常是隱匿感染。引發(fā)感染的原因可能是為豬提供與病鼠接觸過(guò)的水和飼料。 病死豬的檢驗(yàn)結(jié)果表明，心肌中病毒的水平最高，然后是肝臟和脾臟，心肌炎病毒還有可能經(jīng)由胎盤感染。

若豬感染腦心肌炎病毒，病豬的精神比較萎靡，食欲不佳，共濟(jì)失調(diào)，一些豬還會(huì)伴有尖叫和全身震顫，體溫在41℃～42℃之間，痢疾、嘔吐、呼吸障礙，通常會(huì)在吃食或被驅(qū)趕后因?yàn)檫^(guò)度興奮而心力衰竭出現(xiàn)突發(fā)性死亡。

對(duì)病死豬進(jìn)行剖檢，可發(fā)現(xiàn)仔豬的胃里面有凝乳塊，腹腔和胸腔里面有深黃色樣的液體，肺部水腫，被膜處可以觀察到出血點(diǎn)，脾臟與肝臟發(fā)生萎縮，豬膀胱、胃黏膜和腎淋巴結(jié)充血，心臟體積變大，發(fā)白，具有黃白色的壞死病灶。

2 豬腦心肌炎病毒診斷方法和應(yīng)用

2.1 RT-PCR 診斷方法

國(guó)外的學(xué)者研發(fā)出RT-PCR 診斷方法，將其應(yīng)用在病豬的臨床檢測(cè)工作中，應(yīng)用效果良好。 豬腦心肌炎是國(guó)內(nèi)外一種比較普遍的流行性疾病，會(huì)嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬行業(yè)的平穩(wěn)發(fā)展，所以，需要建立起特異性強(qiáng)、 敏感度高且快速的病毒診斷方法。 常規(guī)的RT-PCR 診斷方法主要可以分成兩步，一個(gè)是反轉(zhuǎn)錄，另一個(gè)是擴(kuò)增CDNA，此種操作比較繁瑣，會(huì)增大污染的幾率[1]。 一步法RT-PCR 診斷是以常規(guī)的RT-PCR 診斷方法為基礎(chǔ)發(fā)展而來(lái)的，可以有效節(jié)省病毒診斷的時(shí)間，簡(jiǎn)化操作步驟，從RNA 的提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR 擴(kuò)增一直到電泳觀察，耗費(fèi)的總時(shí)間不超過(guò)4h，能夠在短時(shí)間里迅速實(shí)現(xiàn)目的片段的擴(kuò)增， 適合大范圍的推廣與應(yīng)用。

在臨床上， 和EMCV 同屬的FMDV 誘發(fā)的仔豬心肌炎，很容易和EMCV 導(dǎo)致的心肌炎混淆，不僅如此，因?yàn)镻RV、PRRSV、PPV 以及CDFV 引起的母豬繁殖障礙， 也容易和EMCV 引起的繁殖障礙混淆。 一步法RT-PCR 診斷方法的應(yīng)用，可以將EMCV與其他病毒進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒別，能夠?qū)p失降到最低，是疫情監(jiān)測(cè)中的重要方法之一。

2.2 RT-LAMP 診斷方法

豬腦心肌炎在國(guó)內(nèi)外的發(fā)病率都比較高， 造成的經(jīng)濟(jì)損失數(shù)不勝數(shù)，國(guó)內(nèi)關(guān)于EMCV 的研究并不多，但是此類疾病嚴(yán)重威脅著養(yǎng)豬業(yè)的平穩(wěn)發(fā)展， 仔豬的急性心肌炎和口蹄疫疾病間有很多相似之處。 目前，臨床上主要采取RT-PCR 的診斷方法，但是此種方式對(duì)試驗(yàn)的要求非常高， 不適合在臨床大規(guī)模檢測(cè)樣本。近幾年，MALP 技術(shù)得到了迅速發(fā)展，在各種傳染性疾病中都得到了廣泛的應(yīng)用。

在EMCV 診斷中使用RT-LAMP 診斷方法， 只需要在溫度是63℃的水浴鍋里面保溫50min，就可以技術(shù)反轉(zhuǎn)錄與擴(kuò)增的過(guò)程，在合成核酸的同時(shí)，焦磷酸根離子能夠與鎂離子相互結(jié)合，生成白色的焦磷酸鎂沉淀物， 通過(guò)肉眼觀察就可以判定檢測(cè)的結(jié)果，不用再開展電泳檢測(cè)，所以，此種診斷方法在疾病的早期診斷中發(fā)揮著十分重要的作用。

3 豬腦心肌炎病的預(yù)防和治療

3.1 豬腦心肌炎的預(yù)防

此病是傳染類疾病的一種，而且是一種人畜共患病，現(xiàn)階段還沒(méi)能研發(fā)出針對(duì)性的預(yù)防疫苗，因此，此病的預(yù)防主要是遠(yuǎn)離野生動(dòng)物，尤其是老鼠等嚙齒類動(dòng)物，不要讓豬食用被這類動(dòng)物污染過(guò)的飼料，也不可讓豬飲用污染后的水源。

3.2 豬腦心肌炎的治療

首先，需要減少應(yīng)激。 如果發(fā)現(xiàn)豬出現(xiàn)疑似腦心肌炎，需要將其隔離同時(shí)結(jié)合消毒，對(duì)豬的癥狀進(jìn)行及時(shí)診斷；減少平時(shí)的應(yīng)激，不可以驚嚇、捕捉和驅(qū)趕病豬，為減少豬的應(yīng)激反應(yīng)，可以用氯丙嗪，每千克體重1～2mL，肌肉注射[2]。 與此同時(shí)，還可以結(jié)合鹽酸苯海拉明、安定以及巴比妥鈉等藥物。

其次，對(duì)癥治療。 應(yīng)用口蹄保心散，采取喂食或自由飲水的使用方法，按照2∶5 的原則確定藥物和水或拌料的用量，以此來(lái)預(yù)防并治療心肌炎，避免病毒入侵心肌。 還可以給豬使用復(fù)方聚肌胞注射液，按照每千克體重0.05～0.10mL 劑量，采用肌肉注射的方法，每天使用1 次，連續(xù)使用3～5d。 此種藥物屬于一種干擾素誘導(dǎo)劑，可以和豬體內(nèi)抑制干擾素基因的物質(zhì)相互結(jié)合，令機(jī)體在短時(shí)間里生成大量的干擾素，抑制病毒的復(fù)制，提高豬的免疫力，應(yīng)用此種方法治療豬腦心肌炎效果比較理想。