SATB2在前列腺癌組織中的表達及其臨床意義

李璇　馬偉雄　陳文璞　湯金榮　俞國鋒　陳忠

【摘要】 目的：探討SATB2在前列腺癌組織中的表達水平，并分析其臨床意義。方法：收集2015年1月-2019年1月在本院經病理診斷確認為前列腺癌并進行手術切除的40例前列腺癌組織和相應的癌旁組織標本，采用免疫組織化學檢測并比較前列腺癌組織和相應的癌旁組織中SATB2的表達水平;比較不同年齡、Gleason評分、生化復發(fā)者SATB2表達情況;繪制生存曲線圖，比較SATB2不同表達情況者的生存情況。結果：與正常癌旁組織相比，SATB2在前列腺癌組織中呈高表達（P<0.05）。隨訪時間截止2019年12月。SATB2陰性者中位生存時間為94個月[95%CI（90.49，97.51）]，死亡1例;SATB2陽性者中位生存時間為85個月[95%CI（80.46，89.54）]，死亡17例，SATB2不同表達情況者生存情況比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Gleason評分>7分患者中SATB2表達陽性率高于Gleason評分≤7分者（P<0.05）;生化復發(fā)患者SATB2表達陽性率高于無生化復發(fā)者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論：SATB2在前列腺癌組織中表達上調，且其高表達與前列腺癌患者的預后不良相關。SATB2可能是前列腺癌的治療靶點和潛在的診斷標志物。

【關鍵詞】 前列腺癌 SATB2 生化復發(fā)

[Abstract] Objective： To investigate the expression level of SATB2 in prostate cancer tissues and analyze its clinical significance. Method： A total of 40 cases of prostate cancer and corresponding paracancerous tissue samples were collected from our hospital from January 2015 to January 2019. The expression levels of SATB2 in prostate cancer and corresponding paracancerous tissues were detected by immunohistochemistry and compared. The expression of SATB2 in patients with different ages， Gleason score and biochemical relapse were compared. Survival curves were drawn to compare the survival of people with different expressions of SATB2. Result： SATB2 was highly expressed in prostate cancer tissues compared with normal paracancerous tissues （P<0.05）. The follow-up time was up to December 2019. The median survival time of SATB2-negative patients was 94 months [95%CI （90.49， 97.51）]， and 1 case died. The median survival time of SATB2-positive patients was 85 months [95%CI （80.46， 89.54）]， and 17 patients died. There was statistically significant difference in the survival of patients with different levels of SATB2 expression （P<0.05）. The positive rate of SATB2 expression in patients with Gleason score > 7 was higher than that in Gleason score ≤7 （P<0.05）. The positive rate of SATB2 expression in patients with biochemical recurrence was higher than that in patients without biochemical recurrence， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion： SATB2 expression is upregulated in prostate cancer tissues， and its high expression is associated with poor prognosis in prostate cancer patients. SATB2 may be a therapeutic target and a potential diagnostic marker for prostate cancer.

[Key words] Prostate cancer SATB2 Biochemical recurrence

First-authors address： Jinshan Branch of Shanghai Sixth Peoples Hospital， Shanghai 201599， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.006

前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)腫瘤常見的惡性腫瘤，在歐美國家特別是美國發(fā)病率最高[1-2]。在我國，前列腺癌發(fā)病率比較低，但近年來，隨著人口老齡化的加劇，生活水平的提高，飲食結構的改變以及環(huán)境污染的加重等，前列腺癌在我國發(fā)病率有逐年增高的趨勢。流行病學調查顯示，中國前列腺癌發(fā)病率從2005年的7.9人/10萬男性人口增加到2015年的32.3人/10萬男性人口，而且在以每年10%的速度攀升。對于我國城市男性，前列腺癌的發(fā)病率已在所有惡性腫瘤中居前十位[3]。前列腺癌的病因尚未明確，除與年齡，種族和高動物脂肪飲食等因素相關外，還具有遺傳易感性[4]。有數(shù)據(jù)表明前列腺原位癌、局部浸潤癌以及遠處轉移性癌的10年生存率差異明顯，分別為75%、55%和15%[5]。因此，對于前列腺癌患者，早期診斷是至關重要的。

特異AT序列結合蛋白2（SATB2）是一種核基質相關蛋白，對動物正常生長發(fā)育十分重要[6-7]。自從2003年首次發(fā)現(xiàn)SATB2蛋白以來，關于該蛋白在生物體內的生物功能的研究迅速增加[8]。SATB2由11個外顯子組成，分布在2號染色體上，全長191 kb，編碼733個氨基酸，預測分子量為82.5 kDa。該蛋白有兩個剪切結構域（氨基酸352-437）和一個同源結構域（氨基酸614-677）[8]。從斑馬魚到雞再到高等哺乳動物，SATB2序列在脊椎動物中高度保守[9]。SATB2表達具有組織特異性，參與神經元、干細胞和成骨細胞的分化[10-11]。SATB2最早被發(fā)現(xiàn)是在骨發(fā)育和成骨細胞分化中發(fā)揮關鍵作用的轉錄因子，它被認為參與染色質重塑，通過招募組蛋白乙酰轉移酶和去乙酰轉移酶到染色質來調節(jié)基因表達[12-13]。SATB2的異常表達已被發(fā)現(xiàn)與各種癌癥，包括肺癌、結腸癌、乳腺癌、胃癌和肝癌高度相關[14-16]。隨著研究的深入，SATB2有可能會成為新型分子標志物，對許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展都有較大的提示意義。然而，有關SATB2在前列腺癌中的作用尚未有報道。

1 材料與方法

1.1 臨床組織標本 收集2015年1月-2019年1月在本院經病理診斷確認為前列腺癌并進行手術切除的40例前列腺癌組織及相應的癌旁組織標本，所有患者均未接受內分泌和放化療的治療，從手術中所獲得的組織標本存儲于液氮中。患者年齡45～82歲，平均（64.2±4.4）歲。組織學分型：37例根治及穿刺標本組織類型均為經典型前列腺癌，3例組織學類型為前列腺癌伴神經內分泌分化。該研究獲得了上海市第六人民醫(yī)院人體研究倫理委員會的批準。所有患者均獲得書面知情同意書。所有標本均按照倫理和法律標準進行匿名處理。

1.2 試劑及免疫組化染色 對臨床前列腺癌樣本石蠟包埋的組織切片進行免疫組化分析，所有標本均采用10 %中性福爾馬林固定，經脫水、石蠟包埋，石蠟包埋，冰凍切片機切成5 mm厚度的切片，并按照標準免疫組織化學進行染色。SATB2為鼠單克隆抗體，購于Abcam公司，ab92446。使用一抗稀釋液代替SATB2抗體作為空白對照，采用DAB顯色，蘇木精對比染色。

1.3 判定標準 免疫組織化學染色結果判定：（1）按照2019版《中國泌尿外科疾病診斷治療指南》對前列腺癌組織標本進行Gleason分級，①根據(jù)腺體分化程度，按5級評分。1級為一致性規(guī)則的大腺體，背靠背密集，形成小結節(jié);2級為較不規(guī)則的大腺體，背靠背密集，形成小結節(jié)，結節(jié)內腺體不融合;3級為浸潤性生長的小腺體或腺泡，或小型篩狀結構腺體;4級為融合腺體，大型篩狀腺體，或呈腎透明細胞癌樣;5級為實性癌巢（無腺樣結構），單個癌細胞浸潤，或呈粉刺樣癌（癌細胞壞死）;②對于同一腫瘤不同區(qū)域腺癌結構的變異，按其主要和次要分化程度分別評分，以該兩項評分相加的總分作為判斷預后的標準（例如腺癌主要結構評為2分，次要結構評為4分，則積分為2+4=6分;只有1個結構類型，評分為3分，則積分為3+3=6分）。（2）免疫反應性評分（IRS）：通過評估陽性細胞百分比和染色強度綜合評估，陽性細胞百分比評分方法如下，0為0～5%，1為6%～25%，2為26%～50%，3為51%～75%，4為>75%;染色強度評分方法如下，0為陰性，1為微弱，2為中等，3為強。通過將陽性細胞百分比和染色強度評分相乘得到最終IRS，0～2分為陰性，3～6分為弱陽性，7～9分為陽性，10～12分為強陽性。生化復發(fā)：指前列腺癌根治手術或根治性放療達到根治效果后，前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）連續(xù)兩次超過0.2 ng/mL。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，比較采用字2檢驗或者Fisher精確檢驗分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 前列腺癌組織及正常癌旁組織SATB2表達情況 SATB2在正常癌旁組織中染色呈陰性，而在前列腺癌組織中染色呈棕褐色，見圖1。前列腺癌組織的SATB2陽性率為92.5%（37/40）明顯高于正常癌旁組織的35.0%（14/40），差異有統(tǒng)計學意義（字2=28.614，P<0.05）。40例正常癌旁組織中SATB2陰性有26例（65.0%），弱陽性12例（30.0%），陽性2例（5.0%），強陽性0例;40例前列腺癌組織中SATB2陰性有3例（7.5%），弱陽性7例（17.5%），陽性21例（52.5%），強陽性9例（22.5%）。見表1。

2.2 不同臨床特征前列腺癌患者SATB2表達情況 采用電話及門診或住院復查等方式進行隨訪，了解患者生存情況，隨訪時間截止2019年12月。SATB2陰性者中位生存時間為94個月[95%CI（90.49，97.51）]，死亡1例;SATB2陽性者中位生存時間為85個月[95%CI（80.46，89.54）]，死亡17例，SATB2不同表達情況者生存情況比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見圖2。Gleason評分>7分患者中SATB2表達陽性率高于Gleason評分≤7分者（P<0.05）;生化復發(fā)患者SATB2表達陽性率高于無生化復發(fā)者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

見表2。

3 討論

目前，前列腺癌的早期診斷主要是通過直腸指檢（digital rectal examination，DRE）篩查結合前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）。確診主要依靠前列腺穿刺活檢或病理。PSA的發(fā)現(xiàn)對于前列腺癌的早期診斷具有里程碑的意義。測定血液中的血清PSA可反映出前列腺本身的改變。PSA水平高于4 ng/mL的男性被認為有患前列腺癌的風險。PSA篩查的廣泛應用使轉移階段的前列腺癌、早期浸潤前列腺癌得到了診斷，并及時進行治療，降低了疾病的死亡率。但PSA只具有前列腺組織特異性，而不具備前列腺腫瘤特異性。近年來，PSA對前列腺癌診斷的特異性和敏感度受到了越來越多的質疑。因此，尋找更具特異性與敏感度的分子標志物對于前列腺癌的篩查與早期診斷具有非常重要的作用。

本研究探討了SATB2在前列腺癌中表達及分析其臨床意義。SATB2是一種核基質轉錄因子，參與染色質重塑和基因調控，對生長發(fā)育非常重要[17]。SATB2基因的表達具有組織特異性，只有在前列腺的腔細胞表達SATB2[18]。SATB2及其同系物SATB1被認為與各種癌癥有關，它們在這種疾病中的作用是特定于這種類型的癌癥的。SATB2是良惡性間充質腫瘤成骨細胞分化的標志物，并促進骨肉瘤的遷移和侵襲[19]。SATB2在喉鱗狀細胞癌中屬于抑癌基因，其表達缺失與復發(fā)和腫瘤高分級有關，而在頭頸部鱗狀細胞癌中，SATB2的表達不能增加化療患者的益處[20]。SATB1與SATB2的相互拮抗關系究竟如何，需要進一步的分子細胞學實驗加以研究證實。在前列腺癌中，SATB2抑制癌癥進展的獨特能力可能與其組織特異性表達有關，因為表達該蛋白的唯一上皮細胞是位于前列腺腔細胞。有研究表明，SATB2免疫組化染色尤其是血清SATB的ELISA法檢測顯示出很好的特異性和敏感度[21]。因此，探明SATB2在前列腺上皮細胞中的正常功能可能有助于了解其在前列腺癌中的獨特作用機制，還為SATB2作為前列腺癌臨床診斷、預后判斷和潛在的基因靶向治療提供理論依據(jù)。

本研究結果顯示，SATB2在前列腺癌細胞和正常細胞中均主要分布在細胞質和細胞核中，且SATB2在前列腺癌組織中的表達高于正常癌旁組織（P<0.05）。SATB2不同表達情況者生存情況比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Gleason評分>7分患者中SATB2表達陽性率高于Gleason評分≤7分者（P<0.05）;生化復發(fā)患者SATB2表達陽性率高于無生化復發(fā)者（P<0.05）。SATB2在前列腺癌組織中表達上調，且其高表達與前列腺癌患者的預后不良相關。SATB2可能是前列腺癌的治療靶點和潛在的診斷標志物。如果能將SATB2與PSA篩查聯(lián)合應用，勢必能降低不必要的前列腺穿刺活檢數(shù)和減少漏診率，SATB2有可能將成為篩查和診斷前列腺癌新的特異性標記物。

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（收稿日期：2020-09-21） （本文編輯：田婧）