頭孢呋辛酯胃黏附微丸的制備

申麗先，張媛婷，張娟

（1.天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津 301700 ；2.大慶師范學(xué)院生物工程學(xué)院，黑龍江大慶 163712）

頭孢呋辛酯是一種β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素，屬于時(shí)間依賴(lài)型抗菌素，抗菌效果隨著血藥濃度高于最低抑菌濃度的時(shí)間延長(zhǎng)而增加。臨床上廣泛用于治療呼吸道感染、尿路感染、淋球菌型感染等的治療。文獻(xiàn)表明，在胃中滯留時(shí)間延長(zhǎng)，有利于頭孢呋辛酯的溶出[1]。

本文以頭孢呋辛酯為模型藥物，制備1 次/天給藥的胃黏附微丸，增加藥物在胃內(nèi)的滯留時(shí)間，使藥物緩慢到達(dá)最佳吸收位點(diǎn)，保持血藥濃度平穩(wěn)，增加藥物的殺菌效果，提高生物利用度。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

高效液相色譜系統(tǒng)（日本JASCO 公司）；JBZ-300 型多功能微丸包衣造粒機(jī)（遼寧醫(yī)聯(lián)新藥研究所）；BS110S 分析天平（德國(guó)Sartorius 儀器公司）；HL-2 型恒流泵（上海精科實(shí)業(yè)有限公司）；KQ-100型超聲分散機(jī)（昆山市超聲儀器有限公司）；SZ-93自動(dòng)雙重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）；ZRS-8L 多功能溶出儀（天津天大天發(fā)科技有限公司）；UV-2000 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（尤尼柯上海儀器有限公司）

1.2 藥品與試劑

頭孢呋辛酯（聯(lián)邦制藥有限公司，批號(hào)：322112030）；微晶纖維素（江蘇省常熟市藥用輔料有限公司）；卡波姆（型號(hào)934 P，上海申興制藥廠）；聚乙烯吡咯烷酮（型號(hào)K30，天津市博迪化工有限公司）；十八醇（天津博迪化工股份有限公司）；甲醇（色譜純）山東禹王實(shí)業(yè)有限公司；磷酸二氫銨（天津市博迪化工有限公司）；濃鹽酸（沈陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)試劑廠）；無(wú)水乙醇（山東禹王化工有限公司）；試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 微丸質(zhì)量考察指標(biāo)

2.1.1 樣品含量

頭孢呋辛酯有（R，R，R）（R，R，S）兩種非對(duì)映異構(gòu)體。目前銷(xiāo)售的藥品是無(wú)定型（R，R，R）和（R，R，S）兩種非對(duì)映異構(gòu)體的1∶1 等量混合物。液相檢測(cè)時(shí)可以得到頭孢呋辛酯A、B 兩個(gè)異構(gòu)體峰，二者相對(duì)保留時(shí)間分別為1.0、0.9。當(dāng)A 異構(gòu)體峰面積與頭孢呋辛酯A、B 異構(gòu)體峰面積和之比為0.48～0.55 時(shí)，可用兩峰面積之和計(jì)算頭孢呋辛酯濃度，否則需單獨(dú)計(jì)算。

頭孢呋辛酯溶液室溫放置易降解，測(cè)量時(shí)應(yīng)盡快，最好小于3 h，或?qū)⑷芤悍胖糜? ℃冰箱當(dāng)天使用[2]。

2.1.1.1 色譜條件

色 譜 柱：DiamonsilRC18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：0.2 mol/L 磷酸二氫銨溶液-甲醇（55∶45）；檢測(cè)波長(zhǎng)：276 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；進(jìn)樣量：20 μL。

2.1.1.2 微丸含量測(cè)定

取頭孢呋辛酯胃黏附微丸適量，研細(xì)，精密稱(chēng)取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于頭孢呋辛酯125 mg），置100 mL 量瓶中，加甲醇25 mL，超聲溶解，流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。取續(xù)濾液5 mL，置25 mL 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，立即精密量取20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱(chēng)取頭孢呋辛酯對(duì)照品適量，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算樣品含量n，公式如下：

C對(duì)——對(duì)照品濃度，mg/mL；

W稱(chēng)——稱(chēng)樣量，g。

2.1.2 體外釋放度測(cè)定

取頭孢呋辛酯胃黏附緩釋制劑（相當(dāng)于含頭孢呋辛酯250 mg），采用第二法槳法[3]，以0.1 mol/L 鹽酸溶液900 mL 為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，依法操作，在0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h 時(shí)，分別取溶液5 mL，并及時(shí)在操作容器中補(bǔ)充釋放介質(zhì)5 mL。將取出的溶液用0.8 μm 濾膜濾過(guò)，分別精密量取續(xù)濾液適量，用釋放介質(zhì)定量稀釋制成每1 mL 約含15 μg 藥物的溶液，作為供試品溶液，照紫外分光光度法[4]，在280 nm 測(cè)定溶液吸光度，并由隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算不同時(shí)間的累積釋放量。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，整個(gè)溶出裝置和取出的樣品都應(yīng)注意避光。

2.1.3 黏附性能的測(cè)定

SD 大鼠禁食供水飼養(yǎng)24 h 后處死。取胃，沿胃大彎剪開(kāi)，小心除去胃中內(nèi)容物，取1 cm×2 cm 胃組織平鋪于載玻片上。分別在胃粘膜撒上約100 粒微丸，用生理鹽水潤(rùn)濕后，將載玻片置于相對(duì)濕度92.5%的密閉容器內(nèi)保濕30 min。載玻片取出固定在45 °斜面上，用pH 值1.2 稀鹽酸—氯化鈉溶液沖洗胃粘膜表面（22 mL/min）5 min 后，計(jì)數(shù)胃粘膜表面滯留微丸數(shù)，計(jì)算微丸黏附率[5-6]。

2.2 頭孢呋辛酯胃黏附微丸制備

本文以卡波姆為黏附材料、十八醇為緩釋材料、微晶纖維素為填充劑進(jìn)行頭孢呋辛酯胃黏附微丸的制備。經(jīng)過(guò)嘗試，微丸載藥量可達(dá)到50%。

采用擠出滾圓的方式進(jìn)行頭孢呋辛酯胃黏附微丸的制備，按處方量稱(chēng)取頭孢呋辛酯原料藥，加入適量的卡波姆、十八醇、微晶纖維素，過(guò)80 目篩混勻，加入一定比例的乙醇-水（含有適量PVP），捏合至軟材，將軟材置于擠出滾圓機(jī)內(nèi)，經(jīng)擠出機(jī)篩板（孔徑0.9 mm）擠出，條狀物料置滾圓機(jī)內(nèi)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速和滾圓時(shí)間，使條狀物切斷成顆粒并滾圓，取出微丸置于40 ℃烘箱干燥，過(guò)篩得24～30 目的目標(biāo)微丸。

2.2.1 黏附材料用量篩選

采用2.2 工藝參數(shù)制備含有不同含量卡波姆的微丸（固定載藥量50%、十八醇10%，以微晶纖維素為填充劑）?？疾炜ú?%、5%、7.5%、10%、12.5%、15%含量時(shí)對(duì)微丸圓整度、黏附效果的影響。結(jié)果，隨著卡波姆含量增加，軟材的彈性增大，擠出時(shí)物料呈長(zhǎng)條狀不易斷開(kāi)。含量小于12.5%時(shí)，制備的微丸較不加入卡波姆的處方微丸粒徑均勻。12.5%含量時(shí)制備的微丸表面不太光滑，有少量短棒狀出現(xiàn)，15%含量制備的微丸出現(xiàn)大量棒狀、長(zhǎng)條狀。

篩選24～30 目的微丸進(jìn)行黏附率測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖1。隨卡波姆含量的增加，黏附效果增強(qiáng)，10%含量黏附率為96.41%，因此兼顧微丸圓整度，將卡波姆含量確定為10%。

圖1 不同含量卡波姆對(duì)微丸黏附性能的影響Fig.1 Effect of different percent of Carbomer on the adhesion property

2.2.2 緩釋材料用量篩選

采用2.2 工藝參數(shù)制備含有不同含量十八醇的微丸（固定載藥量50%、卡波姆10%，以微晶纖維素為填充劑）。考察不同含量十八醇對(duì)微丸釋放、黏附的影響，結(jié)果見(jiàn)圖2、圖3。

圖3 不同含量十八醇對(duì)微丸黏附性能的影響Fig.3 Effect of the amount of octadecanol on the adhesion behavior

從圖2 可以看出，隨著十八醇量的增加，藥物釋放減慢。不含十八醇的含藥微丸前期釋放太快，4 h 釋放將近60%，后期釋放減慢。含有15%十八醇的含藥微丸體外釋放較慢，10 h 釋放小于80%。十八醇含量為5%或10%時(shí)藥物釋放曲線(xiàn)符合10 h緩釋要求。

圖2 不同含量十八醇對(duì)微丸釋放度的影響Fig.2 Effect of the amount of octadecanol on drug release

從圖3 可知，處方中十八醇的含量對(duì)微丸黏附性能影響不大。

2.3 處方工藝重現(xiàn)性考察

固定處方：50%藥物，10%卡波姆，10%十八醇，30% MCC，采用2.2 工藝參數(shù)制備3 批頭孢呋辛酯胃黏附微丸，并進(jìn)行體外釋放度、體外黏附效果考察，結(jié)果見(jiàn)圖4、圖5。結(jié)果顯示，篩選的處方工藝具有良好的重現(xiàn)性。制備的微丸圓整度好，體外釋放度、黏附率均符合要求。

圖4 三批微丸的體外釋放度結(jié)果Fig.4 The release profiles of three batches of pellets

圖5 三批微丸的體外黏附效果Fig.5 The adhesiveness property of three batches of pellets

3 討論

胃黏附制劑直接借助于某些高分子材料對(duì)生物粘膜產(chǎn)生的粘合力而黏附于胃粘膜上皮部位，從而延長(zhǎng)藥物在胃內(nèi)的滯留時(shí)間和釋放時(shí)間，促進(jìn)藥物吸收，提高生物利用度[7]，同時(shí)具有靶向、避免首過(guò)效應(yīng)、增加依從性等優(yōu)點(diǎn)。

頭孢呋辛酯是一種時(shí)間依賴(lài)型抗菌素，血藥濃度超過(guò)所針對(duì)細(xì)菌的最低抑菌濃度的時(shí)間越長(zhǎng)，殺菌效果越好，并且頭孢呋辛酯在小腸上端部位吸收最佳，所以本文以頭孢呋辛酯為模型藥物進(jìn)行胃黏附微丸的制備。

卡波姆作為一種輔料已被多國(guó)藥典收載，并已廣泛用于制藥工業(yè)，是一種公認(rèn)的無(wú)毒的黏附材料。亦有許多文獻(xiàn)報(bào)道顯示，卡波姆的黏附性能要優(yōu)于其他黏附材料。因此選用卡波姆為胃黏附微丸的黏附材料[8]。

4 結(jié)論

本文采用擠出滾圓的方法，以卡波姆為黏附材料、十八醇為緩釋材料、微晶纖維素為填充劑進(jìn)行了頭孢呋辛酯胃黏附微丸的制備。通過(guò)考察了黏附材料、緩釋材料的用量對(duì)微丸體外黏附效果、體外釋放度的影響，優(yōu)化了微丸處方。確定的處方工藝重現(xiàn)性好，可達(dá)到10 h 的緩釋效果，體外黏附率高。