飲酒口干程度檢測方法的探索性研究

（勁牌研究院，中藥保健食品質(zhì)量與安全湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北大冶 435100）

在酒類消費(fèi)升級的趨勢下，飲健康的酒和如何健康飲酒成為一種時(shí)尚追求[1-7]。其中，飲酒后是否口干及口干程度，逐漸成為人們在日常飲酒中探討的一種健康飲酒感受。研究顯示，在大量急性和慢性飲用酒精后，會(huì)嚴(yán)重影響口腔感知，產(chǎn)生口渴和口干?？诳剩茄獫{滲透壓升高和體液量減少，及影響神經(jīng)、體液的神經(jīng)遞質(zhì)、激素及細(xì)胞因子綜合作用誘導(dǎo)產(chǎn)生?？诟桑强谇桓稍锏囊环N綜合感覺，由唾液分泌減少引起[8]。引起白酒飲后口干的原因包括酒中的乙醛、雜醇油含量過高，酸酯比例不協(xié)調(diào)等因素[9-12]。引起保健酒飲后口干的因素不僅涉及到原酒的使用，還包括各種組方藥材和輔料。另外，飲酒者的飲酒方式、生理?xiàng)l件、心理狀態(tài)等因素對其感受的飲后口干程度也有影響[8]。

目前，臨床前口干研究，多采用實(shí)驗(yàn)小鼠的飲水量變化、唾液分泌量等指標(biāo)來考察其口干程度[12-14]。而臨床研究，主要考察臨床口干患者的唾液分泌情況與其口腔中的靜息唾液流率[15]。從臨床診斷研究角度出發(fā)，唾液在功能上等同于血清[16-17]。本研究從唾液分泌量與血清滲透壓的潛在相關(guān)性出發(fā)，先后采用水、相同度數(shù)的酒精和一種保健酒灌胃，均檢測禁水后不同時(shí)間點(diǎn)的血清滲透壓，初步確定飲后口干程度與血清滲透壓的關(guān)系。將血清滲透壓指標(biāo)的檢測與動(dòng)物醉酒試驗(yàn)結(jié)合，探索性應(yīng)用于白酒、保健酒等酒類飲后口干程度的對比分析。通過檢測飲酒小鼠翻正反射恢復(fù)后血清滲透壓，對比分析小鼠飲酒后的口干程度，以評價(jià)酒體的飲后口干程度。

在白酒、保健酒等產(chǎn)品開發(fā)與優(yōu)化升級過程中，如何使飲酒者在飲后減輕甚至避免口干也成為各種酒類產(chǎn)品研發(fā)的方向與重點(diǎn)。因此，研發(fā)一種客觀而有效的評價(jià)白酒、保健酒等酒類飲后口干程度的檢測方法，具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 酒樣、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和儀器

酒樣：主要包括35%vol酒精，一種保健酒不同生藥濃度酒體1#，2#，3#，4#，5#（表1）。均為實(shí)驗(yàn)室自制樣品。

表1 保健酒不同生藥濃度酒體分組及信息

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性BALB/c小鼠，SPF級，18～22 g，6～8周齡。許可證號碼：SCKXK(湘)2011-0003，購于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。IVC 籠具飼養(yǎng)，5～6 只/籠。飼養(yǎng)溫度20～25 ℃，相對濕度40 %～70 %，自然光照12 h 明暗交替。采用飲水瓶供應(yīng)，自由飲水。灌胃前12 h 禁食不禁水。試驗(yàn)前小鼠適應(yīng)環(huán)境3～5 d。適應(yīng)期主要檢查內(nèi)容：是否與訂購時(shí)要求的質(zhì)量指標(biāo)一致；一般狀態(tài)；體重是否達(dá)到試驗(yàn)要求的體重范圍；不合格的動(dòng)物不納入本試驗(yàn)。本研究所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作均按湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理辦法進(jìn)行。

儀器設(shè)備：冰點(diǎn)滲透壓儀（德國羅澤，OM815）、電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司，ME2002E/02）、低溫冷凍離心機(jī)（sigma，1-14K）等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購入后，適應(yīng)性喂養(yǎng)后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定，35%vol酒體灌胃劑量為0.19 mL/10 g·bw。實(shí)驗(yàn)前12 h 禁食，自由飲水。按體重隨機(jī)分組，每組10～12只，并用苦味酸進(jìn)行標(biāo)記。采用水、35%vol酒精分別灌胃，依次在禁水0 h、灌胃后禁水0.5 h、1 h、2 h、3 h 共5 個(gè)時(shí)間點(diǎn)對各組實(shí)驗(yàn)小鼠取血。采用保健酒不同生藥濃度酒體灌胃后觀察小鼠的醉酒狀況，待翻正反射恢復(fù)后取血（按照灌胃順序）。靜置30 min 后，3500 r/min、15 min 離心，吸取上清液后-20 ℃冰箱保存。將血清樣本室溫解凍30～60 min，采用冰點(diǎn)滲透壓儀進(jìn)行血清滲透壓測量。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用統(tǒng)計(jì)軟件spss19.0進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 灌胃水后禁水不同時(shí)間小鼠血清滲透壓變化與口干程度

考察灌胃水后禁水0 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h 小鼠血清滲透壓的變化。如表2。

表2 禁水后不同時(shí)間血清滲透壓變化

從表2 可以看出，與禁水0 h 比較，實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃水后禁水0.5～3 h 其血清滲透壓顯著升高（p＜0.01）。結(jié)果表明，在禁水后0.5 h 開始，實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓開始顯著升高；且在禁水0.5～3 h 內(nèi)，實(shí)驗(yàn)小鼠的血清滲透壓均保持在一個(gè)較高值。初步分析禁水后0.5 h 實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)口干，且在禁水0.5至3 h內(nèi)均保持明顯的口干程度。

表4 保健酒不同生藥濃度酒體飲后醉酒和血清滲透壓結(jié)果

2.2 灌胃35 %vol 酒精和保健酒后禁水不同時(shí)間小鼠血清滲透壓變化與口干程度

考察灌胃35%vol 酒精和保健酒后禁水0.5 h、1 h、2 h、3 h小鼠血清滲透壓的變化。如表3。

從表3 可以看出，與灌胃前-對照組比較，實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃35 %vol 酒精和保健酒后，禁水0.5～3 h其血清滲透壓均顯著升高（p＜0.01）。與35 %vol酒精灌胃后0.5 h 組比較，35%vol 酒精灌胃后禁水1 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓顯著升高（p＜0.05），灌胃后禁水3 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓顯著降低（p＜0.05），灌胃后禁水2 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與35%vol 保健酒灌胃后0.5 h 組比較，保健酒灌胃后禁水1～3 h 實(shí)驗(yàn)小鼠血清滲透壓均極顯著升高（p＜0.01），呈現(xiàn)一定的下降趨勢。

結(jié)果表明，與灌胃前口干情況比較，35%vol 酒精和保健酒灌胃后禁水0.5 h 實(shí)驗(yàn)小鼠口干程度明顯。且35 %vol 酒精和保健酒在灌胃后禁水0.5 h至3 h 內(nèi)呈現(xiàn)不一樣的口干程度變化，但均在灌胃后禁水1 h 時(shí)出現(xiàn)峰值。其中，35%vol 酒精灌胃后禁水0.5 h 至1 h，其口干程度呈現(xiàn)明顯升高，然后在禁水3 h 其口干程度明顯降低。35 %vol 保健酒灌胃后禁水0.5～3 h 內(nèi)，其口干程度保持明顯升高，但有隨著禁水時(shí)間延長口干程度下降的趨勢。分析35%vol 酒精灌胃后口干程度的變化，主要和機(jī)體中攝入乙醇及其代謝物乙醛等物質(zhì)含量有關(guān)。35 %vol 保健酒飲后口干程度的變化，與同度數(shù)酒精存在差異，可能還與保健酒基酒及其組方藥材所含成分在機(jī)體內(nèi)的代謝情況有關(guān)。

2.3 保健酒不同生藥濃度酒體的飲后血清滲透壓與口干程度

結(jié)合小鼠醉酒試驗(yàn)，以保健酒基酒為對照，記錄分析保健酒不同生藥濃度酒體灌胃后小鼠醉酒試驗(yàn)的潛伏期、沉醉期，并檢測分析翻正反射恢復(fù)后血清滲透壓數(shù)據(jù)。保健酒不同生藥濃度的小鼠醉酒和滲透壓結(jié)果如表4。

從表4 可以看出，保健酒不同生藥濃度酒體灌胃飲后，與對照組-保健酒基酒組比較，保健酒不同生藥濃度組的沉醉期不同程度的縮短，潛伏期均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中，保健酒M 組、H1 組和H2 組沉醉期顯著縮短（p＜0.01，p＜0.05，p＜0.01），保健酒L 組沉醉期較基酒對照組無差異。同時(shí)，保健酒不同生藥濃度組的翻正反射恢復(fù)后血清滲透壓呈現(xiàn)一定差異性。即保健酒L 組、M 組滲透壓較基酒對照組顯著升高（p＜0.01，p＜0.05），保健酒H2 組滲透壓較基酒對照組顯著降低（p＜0.01），保健酒H1組滲透壓較基酒對照組無差異。如圖1。

圖1 保健酒不同生藥濃度酒體飲后血清滲透壓變化

結(jié)果顯示，與保健酒基酒比較，添加不同生藥濃度組方藥材對保健酒飲后醉酒度有不同程度的改善作用；且添加高生藥濃度的組方藥材，對飲后口干程度具有減輕作用。其中，保健酒5～15 倍生藥濃度酒體飲后醉酒度均呈現(xiàn)明顯的改善作用。且保健酒1～5 倍生藥濃度酒體飲后口干程度明顯加重，保健酒10 倍生藥濃度酒體飲后口干程度與其基酒飲后口干程度無差異，保健酒15 倍生藥濃度酒體飲后口干程度明顯減輕，整體呈現(xiàn)保健酒10～15 倍高生藥濃度酒體飲后口干程度明顯減輕的結(jié)果。綜合顯示，在保健酒基酒的基礎(chǔ)上，添加10～15倍生藥濃度的組方藥材，對其飲后醉酒度和口干程度具有顯著的改善作用。

3 結(jié)論

采用藥理動(dòng)物模型開展飲酒口干程度檢測方法的探索性研究與應(yīng)用。通過明確實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在禁水0.5～3 h 內(nèi)血清滲透壓顯著升高，開展相同度數(shù)的酒精和保健酒灌胃飲后血清滲透壓變化對比研究，初步建立并驗(yàn)證動(dòng)物模型口干程度與其血清滲透壓的相關(guān)性。探索性應(yīng)用于不同生藥濃度的組方藥材對保健酒飲后醉酒度和口干程度的影響研究。通過研究發(fā)現(xiàn)，相同度數(shù)的酒精和保健酒飲后口干程度變化呈現(xiàn)一定的差異性；且添加不同生藥濃度的組方藥材對保健酒飲后口干程度也有不同影響。由于口干是一個(gè)復(fù)雜的生理現(xiàn)象，與唾液腺功能、內(nèi)外部刺激、神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控等多因素相關(guān)，因此飲酒后對機(jī)體血清滲透壓影響及導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生口干等作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究明確。