水產(chǎn)品中丁香酚檢測(cè)方法研究進(jìn)展

◎ 王安偉，吳禮麗，劉天密，林 毅，賴(lài)長(zhǎng)勝，李秋月，張 燕

（1.海南省水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，海南 ?？?570100；2. 海南省技師學(xué)院食品系，海南 海口 570100）

隨著人們生活水平的日益提高，消費(fèi)者對(duì)于自身的健康問(wèn)題越來(lái)越重視，對(duì)蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也越來(lái)越關(guān)注，水產(chǎn)品是人類(lèi)重要的蛋白質(zhì)來(lái)源，和畜類(lèi)產(chǎn)品比較具有高蛋白、低脂肪的優(yōu)點(diǎn)。伴隨對(duì)水產(chǎn)品需求的不斷增大，我國(guó)漁業(yè)近年發(fā)展迅速，根據(jù)《2021年全國(guó)漁業(yè)經(jīng)濟(jì)統(tǒng)計(jì)公報(bào)》，漁業(yè)經(jīng)濟(jì)總產(chǎn)值達(dá)到29 689.73 億元，全國(guó)水產(chǎn)品總量達(dá)到6 690.29 萬(wàn)t，全國(guó)水產(chǎn)品人均占有量為47.36 kg[1]。

丁香酚主要用于抗菌、降血壓，鎮(zhèn)痛[2-4]，對(duì)羅非魚(yú)、鱸魚(yú)、虹彩鯊、泛海蝦等[5]鮮活水產(chǎn)品具有良好的麻醉效果，普遍應(yīng)用于水產(chǎn)品運(yùn)輸環(huán)節(jié)中。然而，過(guò)量使用會(huì)對(duì)人類(lèi)有急性毒性、致癌性、致突性等風(fēng)險(xiǎn)，危害人們身體健康,美國(guó)將其列入第3 類(lèi)致癌物[6]。

1 檢測(cè)方法

近年，為了滿(mǎn)足丁香酚藥物殘留的檢測(cè)需要，研究人員研究出多種方法，主要有GC、GC-MS/MS、HPLC[7]、HPLC-MS/MS[8]等。

1.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法具有分析速度快，分離效能高、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)。禤開(kāi)智等[9]建立了以200 nm 和290 nm 雙波長(zhǎng)檢測(cè)水產(chǎn)品中丁香酚的含量，加標(biāo)回收率為75.2%～98.6%，方法定量限為20 μg/kg。該方法操作簡(jiǎn)潔，有較高的靈敏度，對(duì)于水產(chǎn)品中丁香酚含量的檢測(cè)具有較強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值。

1.2 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是一種集高效分離和多組分定性、定量于一體的方法，該方法具有前處理方法相對(duì)簡(jiǎn)單，基質(zhì)干擾小，方法靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。倪崢飛[10]等以正己烷為溶劑，HLB 固相萃取小柱凈化，外標(biāo)法測(cè)定水產(chǎn)品中丁香酚殘留量，結(jié)果表明，該方法定量限為2.5 μg /kg。加標(biāo)回收率在77.6%～111.4%。錢(qián)振杰等以乙腈為提取劑，HLB固相萃取小柱凈化，6 種丁香酚類(lèi)化合物回收率為72.6%～109.2%，方法定量限為0.02 mg/kg。該方法滿(mǎn)足水產(chǎn)品中丁香酚殘留量的定性、定量檢測(cè)要求。

1.3 氣相色譜法

氣相色譜法是利用氣體做流動(dòng)相，各組分從固定相中流出的時(shí)間不同，組分彼此分離，具有高效能、高靈敏度、高選擇性、應(yīng)用廣泛、易操作等優(yōu)點(diǎn)。顧倩[11]等建立了氣相色譜法測(cè)定復(fù)方薄荷柳酯搽劑中麝香草酚和丁香酚的含量，回收率為99.75%，該方法具有良好的準(zhǔn)確度和重復(fù)性，操作簡(jiǎn)單。

1.4 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是以氣相色譜作為試樣分離，將質(zhì)譜作為在線(xiàn)檢測(cè)手段進(jìn)行定性、定量分析的技術(shù)，該技術(shù)具有非常高的靈敏度。翟文靜[12]等以正己烷為提取劑，硅膠柱凈化，內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果表明，檢出限為 2. 0 μg /kg，定量限為 5. 0 μg /kg，具有靈敏度高的特點(diǎn)，能滿(mǎn)足水產(chǎn)品中丁香酚殘留量的檢測(cè)要求。陸添文等建立了養(yǎng)殖水產(chǎn)品中丁香酚的殘留測(cè)定方法。該方法丁香酚檢測(cè)限為 0. 05 μg /L，定量限為 0. 17 μg /L，回收率為98.5% ～101.6%，能夠滿(mǎn)足養(yǎng)殖水產(chǎn)品中丁香酚檢測(cè)的需要。

1.5 化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析法

王強(qiáng)[13]等通過(guò)偶聯(lián)載體蛋白并免疫動(dòng)物后獲取丁香酚多克隆抗體。結(jié)果表明，該方法的半抑制濃度為1. 28 μg/L，檢出限為0.11 μg /L。樣品中丁香酚的加標(biāo)回收率為76.6%～108%，與液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法相比較，結(jié)果基本一致。

1.6 四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法

四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法是近年新興的一種檢測(cè)方法，主要是對(duì)動(dòng)植物、食品、儀器設(shè)備等散發(fā)的揮發(fā)性有機(jī)物進(jìn)行實(shí)時(shí)在線(xiàn)定性和定量分析，王強(qiáng)[14]等采用MSE 模式測(cè)定養(yǎng)殖水產(chǎn)品中丁香酚含量，回收率為83.2%～102%，檢出限為 0.02 μg/L，定量限為 0.05 μg/L。該方法適用于養(yǎng)殖水產(chǎn)品中丁香酚含量的快速測(cè)定。鄧穎等建立了分散固相萃取-氣相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法，測(cè)定鮮魚(yú)中 5 種酚類(lèi)麻醉劑，方法檢出限為 3.58～8.96 μg/kg, 定量限為8.46～19.85 μg/kg。該方法的回收率、靈敏度、重復(fù)性都可以滿(mǎn)足水產(chǎn)品中丁香酚快速測(cè)定的要求。

2 結(jié)語(yǔ)

丁香酚對(duì)人體有急性毒性、致癌性風(fēng)險(xiǎn)，建立快捷、準(zhǔn)確的分析方法測(cè)定水產(chǎn)品中的丁香酚具有十分重要的意義。近年，國(guó)內(nèi)外在丁香酚的檢測(cè)技術(shù)研發(fā)方面不斷進(jìn)步，檢測(cè)方法不斷優(yōu)化，涌現(xiàn)了化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析法、高效液相色譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等技術(shù)。目前，氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是比較成熟的檢測(cè)方法，具有檢測(cè)限低、抗基質(zhì)干擾、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性高的特點(diǎn)，較好地滿(mǎn)足了水產(chǎn)品中丁香酚的檢測(cè)要求。然而，因?yàn)閮x器價(jià)格昂貴，基層的應(yīng)用普及程度不高，不適合在縣、鄉(xiāng)檢測(cè)機(jī)構(gòu)推廣應(yīng)用?；瘜W(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析法因其檢測(cè)速度快、成本低、儀器簡(jiǎn)單易攜、靈敏度高、選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是未來(lái)縣、鄉(xiāng)2 級(jí)實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)方法。四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法操作簡(jiǎn)單、回收率好、靈敏度高、重復(fù)性好，是未來(lái)養(yǎng)殖水產(chǎn)品中丁香酚含量測(cè)定的一個(gè)重要的發(fā)展方向。