不規(guī)則抗體篩查及效價(jià)對(duì)新生兒溶血病的影響

周立德，吳海蓉，周蕾，歐陽(yáng)月仙

（湘鄉(xiāng)市人民醫(yī)院輸血科，湖南 湘鄉(xiāng) 411400）

新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newbom，HDN）屬于一類同種被動(dòng)免疫溶血性疾病，是因?yàn)槟阁w中具有不符合胎兒紅細(xì)胞的IgG 不規(guī)則抗體而導(dǎo)致的[1]，即新生兒溶血病是母嬰血型不合引發(fā)的一類新生兒疾病，多因?yàn)镽h血型不合或者ABO 血型不合導(dǎo)致[2]。我國(guó)RhD（-）人群占比不足0.5%，因此，由于Rh血型不合導(dǎo)致新生兒溶血病的占比明顯低于ABO 血型[3]。臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，Rh 血型D 抗原是導(dǎo)致中度和重度新生兒溶血病的影響因素之一。產(chǎn)前給予免疫干預(yù)有助于降低新生兒溶血病發(fā)生率，產(chǎn)前做好不規(guī)則抗體篩查并對(duì)抗體效價(jià)進(jìn)行測(cè)定是開展有效干預(yù)的基礎(chǔ)與前提[4]。本研究選取 2018 年 1 月至 2019 年 12 月 420 名孕婦為研究對(duì)象，旨在分析不規(guī)則抗體篩查及效價(jià)對(duì)新生兒溶血病的具體影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018 年1 月至2019 年12 月在本院就診的420名孕婦為研究對(duì)象，根據(jù)產(chǎn)前是否接受不規(guī)則抗體篩查分為觀察組和對(duì)照組，各210 名。觀察組年齡22～37歲，平均（30.28±5.36）歲 ；妊娠時(shí)間 5～37 周，平均（21.16±10.19）周。對(duì)照組年齡22～35 歲，平均（28.96±5.13）歲；妊娠時(shí)間7～37周，平均（22.41±10.35）周。兩組年齡、妊娠時(shí)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書，本研究獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 試劑與儀器：血庫(kù)專用離心機(jī)、37 ℃及56 ℃水浴箱、聚凝胺試劑（Polybrene）、ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞、篩選細(xì)胞、抗球蛋白試劑、譜細(xì)胞、2-Me、抗-D、抗-B、抗-A。

觀察組孕婦接受產(chǎn)前IgG抗A/B效價(jià)測(cè)定，Rh血型抗體篩選，并對(duì)效價(jià)≥64 的孕婦實(shí)施相應(yīng)臨床干預(yù)。對(duì)照組產(chǎn)前不接受不規(guī)則抗體篩查。全部孕婦均實(shí)施RhD 血型鑒定、ABO 正反定型、抗體鑒定、抗體篩選。新生兒樣本實(shí)施ABO 血型以及RhD 血型鑒定，并完成開展新生兒溶血病3 項(xiàng)檢測(cè)，具體為直接抗人球蛋白試驗(yàn)（直抗試驗(yàn)）、游離抗體試驗(yàn)（游離試驗(yàn)）、抗體釋放試驗(yàn)（釋放試驗(yàn)）。具體操作參考文獻(xiàn)[5]。①直抗試驗(yàn)：將患兒待檢測(cè)的紅細(xì)胞用0.9%氯化鈉溶液配成1%的懸液，取50 μL 加入溶血病檢測(cè)卡Ⅰ內(nèi)，用TA-3A 型血型血清多用離心機(jī)離心5 min，先于900 r/min離心2 min，再1 500 r/min 離心3 min，取出進(jìn)行結(jié)果判讀。②游離試驗(yàn)：取溶血病檢測(cè)卡Ⅱ，在1、2、3孔各加入新生兒血漿 50 μL，再分別加入50 μL 1%的A、B、O 標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液。③釋放試驗(yàn)：采用熱放散法。在溶血病檢測(cè)卡Ⅱ的第4、5、6孔中各加入新生兒的放散液50 μL，再分別加入50 μL 1%的ABO 標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液。37 ℃孵育15 min，用TA-3A 型血型血清學(xué)多用離心機(jī)離心5 min，先在900 r/min 離心2 min，再于1 500 r/min 離心3 min。上述3 項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷方法，陰性：紅細(xì)胞沉降至微柱底部；陽(yáng)性：紅細(xì)胞留在微柱上端或分布在凝膠中。

觀察組效價(jià)≥64 的孕婦根據(jù)具體情況接受的干預(yù)包括丙球治療、光療、激素治療、換血治療。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較兩組新生兒溶血發(fā)生率。②比較兩組新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間。③比較兩組新生兒血中總膽紅素水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以“±s”表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒溶血發(fā)生率比較 觀察組新生兒溶血發(fā)生率為1.90%（4/210），明顯低于對(duì)照組的12.38%（26/210），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=17.374，P＜0.05）。

2.2 兩組新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間比較 觀察組新生兒黃疸出現(xiàn)平均時(shí)間（58.64±12.13）h，對(duì)照組為（37.46±10.39）h，觀察組新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間明顯長(zhǎng)于對(duì)照組（t=19.217，P＜0.05）。觀察組新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間在出生后＜24 h、24～48 h、49～72 h 的比例低于對(duì)照組，＞72 h 比例高于對(duì)照組，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 兩組新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間比較[n（%）]

2.3 兩組新生兒血中總膽紅素水平比較 觀察組新生兒血中平均總膽紅素水平為（162.39±21.13）μmol/L，對(duì)照組新生兒血中平均總膽紅素水平為（240.19±25.41）μmol/L，觀察組新生兒血中總膽紅素水平明顯低于對(duì)照組（t=34.115，P＜0.05）；觀察組新生兒血中總膽紅素水平＜153.9 μmol/L、153.9～205.2 μmol/L的比例均高于對(duì)照組，＞205.2 μmol/L比例低于對(duì)照組，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 兩組新生兒血中總膽紅素水平比較[n（%）]

3 討論

不規(guī)則抗體即抗－A/B以外的血型抗體，具體指與血型Landsteiner 法則不相符的血型抗體[6]。只要是以IgG 性質(zhì)表現(xiàn)出的不規(guī)則抗體，原則上均可能導(dǎo)致新生兒溶血病，主要由于IgG抗體可經(jīng)胎盤進(jìn)入到胎兒的血循環(huán)中，破壞胎兒紅細(xì)胞，導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)黃疸、肝脾腫大、水腫、貧血等，嚴(yán)重時(shí)還可導(dǎo)致核黃疸，若不及時(shí)、有效處理，會(huì)引起胎兒不可逆性的腦損傷，或直接導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)死亡[7-8]。

以往臨床對(duì)于新生兒溶血病的預(yù)測(cè)，多選擇血型、血清學(xué)方法，通過對(duì)孕婦血型抗體效價(jià)進(jìn)行測(cè)定，有助于判斷母嬰是否存在血型不符合情況。有研究顯示，通過新型分子生物學(xué)方法對(duì)胎兒DNA進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于母嬰血型不合的診斷準(zhǔn)確率更高[9]。孕婦在產(chǎn)前接受不規(guī)則抗體篩查，能保證及早發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體，進(jìn)而指導(dǎo)臨床及時(shí)采取相應(yīng)干預(yù)措施，降低新生兒溶血病發(fā)生率[10]。對(duì)確診為黃疸的新生兒，及時(shí)開展血型及血清學(xué)檢查，能早期診斷和治療，盡快消除黃疸，改善新生兒預(yù)后[11]。本研究結(jié)果顯示，觀察組新生兒溶血發(fā)生率為1.90%，顯著低于對(duì)照組的12.38%（P＜0.05）；觀察組新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間平均為（58.64±12.13）h，明顯長(zhǎng)于對(duì)照組的（37.46±10.39）h；觀察組新生兒血中總膽紅素水平為（162.39±21.13）μmol/L，明顯低于對(duì)照組的（240.19±25.41）μmol/L（P＜0.05），提示產(chǎn)前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，并對(duì)血型抗體效價(jià)異常孕婦實(shí)施干預(yù)，能明顯減少新生兒溶血病的發(fā)生，延長(zhǎng)新生兒黃疸出現(xiàn)時(shí)間，減輕黃疸嚴(yán)重程度。

綜上所述，產(chǎn)前測(cè)定孕婦抗體效價(jià)能輔助判斷胎兒出生后新生兒溶血病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)抗體效價(jià)異常孕婦實(shí)施臨床干預(yù)有助于減少新生兒溶血，減輕黃疸程度。