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    三角帆蚌生物擾動對白洋淀濕地水環(huán)境影響探究

    2021-03-09 01:23:42孫家君李乾崗王洪杰張光明曹宏斌
    環(huán)境科技 2021年1期
    關(guān)鍵詞:三角帆白洋淀菌門

    孫家君,李乾崗,魏 婷,王洪杰,張光明,曹宏斌

    (1.中國科學(xué)院過程工程研究所,北京 100190 ;2.中國科學(xué)院大學(xué),北京 100049;3.中國人民大學(xué)環(huán)境學(xué)院,北京 100872;4.河北大學(xué)生態(tài)與環(huán)境治理研究所,河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河北 保定 071002;5.中國雄安集團(tuán)生態(tài)建設(shè)投資有限公司,河北 雄安 071000)

    0 引言

    白洋淀是雄安新區(qū)重要的生態(tài)水域,對華北地區(qū)生態(tài)環(huán)境保護(hù)及經(jīng)濟(jì)社會發(fā)展具有重要意義,但長期以來污染問題嚴(yán)重,制約了雄安新區(qū)發(fā)展。修復(fù)白洋淀濕地,恢復(fù)白洋淀生態(tài)健康勢在必行。底棲生物修復(fù)是濕地修復(fù)的重要組成部分,有助于完善濕地生態(tài)系統(tǒng)服務(wù)功能[1]。生物擾動是指底棲生物通過自身活動產(chǎn)生攪動作用, 促進(jìn)沉積物與水體之間物質(zhì)交換[2],生物擾動會影響微生物和植物的生長,對濕地生物地球化學(xué)循環(huán)十分重要[3]。但生物擾動還會增加內(nèi)源污染釋放,對水質(zhì)影響不容忽視,并且生物量密度是影響這一過程的關(guān)鍵因素[4]。 因此,充分探究底棲生物擾動作用對濕地水質(zhì)、微生物以及植物的作用,對濕地生物修復(fù)及濕地物質(zhì)循環(huán)研究具有重要意義。

    三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)是白洋淀具有代表性的底棲生物,能夠有效抑制藍(lán)藻等有害藻類生長,廣泛運(yùn)用于濕地修復(fù)當(dāng)中[5]。 但現(xiàn)階段的研究都過分關(guān)注于三角帆蚌的控藻效果,忽視其生物擾動作用對濕地水質(zhì)、植物和微生物產(chǎn)生的影響[6]。 本研究以三角帆蚌為試驗對象,以白洋淀水和泥為試驗材料,通過室內(nèi)模擬試驗,研究三角帆蚌的生物擾動作用對水體水質(zhì)COD,N,P 及沉水植物色素積累的影響,并結(jié)合16S rRNA 高通量測序技術(shù),研究水中微生物群落結(jié)構(gòu)的變化,以期為白洋淀濕地修復(fù)和濕地生態(tài)系統(tǒng)重建提供依據(jù)。

    1 材料方法

    1.1 試驗材料與裝置

    試驗用三角帆蚌來自白洋淀某淡水蚌養(yǎng)殖場,選取活力較好的蚌體進(jìn)行試驗,蚌質(zhì)量為252.2 ±16.3 g。 試驗前將其清洗并凈水馴養(yǎng)1 W。

    試驗優(yōu)選金魚藻、輪葉黑藻和穗花狐尾藻3 種沉水植物。 試驗用水、泥及沉水植物均取自白洋淀,試驗前凈水預(yù)培養(yǎng)1 W。 根據(jù)試驗需要通過添加葡萄糖,KNO3和KH2PO4調(diào)節(jié)COD,N,P。

    單個裝置容積100 L,上內(nèi)徑49 cm,下內(nèi)徑41 cm,高63 cm;裝置內(nèi)底泥采用白洋淀底泥,厚10 cm;水深40 cm,采用蠕動泵調(diào)節(jié)進(jìn)出水,保持水力停留時間為5 d;水溫保持在25 ℃左右;水體pH 值為7 ~8;采用恒功率曝氣,依據(jù)往年同期監(jiān)測數(shù)據(jù)保持水體DO 質(zhì)量濃度在4 ~6 mg/L。

    1.2 試驗方法

    三角帆蚌的生物量分為低(4 g/L)、中(12 g/L)、高(20 g/L)3 個密度,每2 d 固定時間出水口取樣檢測水質(zhì)。設(shè)置無蚌對照組和平行組,共計運(yùn)行42 d。進(jìn)水變化情況見表1。 試驗期分為高污染進(jìn)水和低污染進(jìn)水2 個階段,高污染進(jìn)水階段人為添加了COD,N,P;低污染進(jìn)水階段采用淀區(qū)來水。 水質(zhì)調(diào)節(jié)均源于前期監(jiān)測工作。

    表1 進(jìn)水變化情況 mg·L-1

    試驗水質(zhì)每隔2 d 進(jìn)行1 次檢測,包括COD,TN,NH3-N,NO3--N,NO2--N 和TP,檢測試驗期20 d和42 d 時的各處理組植物色素(葉綠素a,b 以及類胡蘿卜素)含量,試驗結(jié)束時對水體微生物群落進(jìn)行分析。

    1.3 檢測和分析方法

    1.3.1 水質(zhì)指標(biāo)及植物色素檢測方法

    TN 采用HJ 636―2012 堿性過硫酸鉀紫外分光光度法;NH3-N 采用HJ 535―2009 納氏試劑分光光度法;TP 采用GB 11893―89 鉬酸銨分光光度法;NO3--N 采用HJ/T346―2007 硝酸鹽氮的測定紫外分光光度法;NO2--N 采用GB/T 7493―1987 分光光度法。 植物色素采用95%乙醇提取法。 底泥中全氮采用HJ 717―2014《土壤質(zhì)量全氮的測定凱氏法》;底泥中全磷采用HJ 632―2011 《堿熔-鉬銻抗分光光度法》。

    1.3.2 微生物群落結(jié)構(gòu)分析

    利用注射器采集距液面10,20,30 cm 處的水樣共150 mL,過0.22 μm 濾膜后,將樣品- 20 ℃保存。對預(yù)處理樣品進(jìn)行微生物群落高通量測序分析。 基于二代高通量測序,測定16SrRNAV4 區(qū)PCR 產(chǎn)物,對各樣品中微生群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析 (引物為338F:5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3',806R:5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3')。 DNA 的提取、PCR、建庫和測序交由北京美吉桑格生物醫(yī)藥科技有限公司完成,測序使用平臺為IlluminaMiseqplatform(Illumina,USA)。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用SPSS26.0 進(jìn)行相關(guān)性分析,使用Origin9.0進(jìn)行作圖。 采用P 值來判斷數(shù)據(jù)的顯著性,當(dāng)P <0.05 認(rèn)為所得數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學(xué)的顯著差異性。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 水體COD 變化

    試驗期間COD 濃度變化情況見圖1。 白洋淀整體COD 濃度偏低,各處理組平均削減率在40% ~50%。出水COD 質(zhì)量濃度為3.54 ~36.12 mg/L。由于三角帆蚌生物擾動,中、高密度組COD 質(zhì)量濃度均值比對照組有一定的提升(<4.5 mg/L),各組別間沒有顯著差異(P >0.05)。 劉昌偉等[7]采用人工濕地進(jìn)行生活污水深度處理,COD 出水質(zhì)量濃度在21.98~25.08 mg/L,削減23.2%。 本研究中模擬濕地對水體COD 濃度削減效果較好,且三角帆蚌對COD 濃度削減并無顯著影響。

    圖1 各處理組COD 質(zhì)量濃度變化情況

    2.2 水體不同形態(tài)氮濃度的變化

    試驗水體TN,NH3-N,NO3--N 以及NO2--N 質(zhì)量濃度變化情況見圖2。由圖2(a)可以看出,試驗階段各處理組TN 平均質(zhì)量濃度分別為5.60,5.52,5.88 和6.02 mg/L。 可見中、高密度組的三角帆蚌的生物擾動將水體TN 質(zhì)量濃度提高了5.4% ~ 7.5%。對照組與低密度組變化沒有差異(P > 0.05)。白洋淀水體長期的富營養(yǎng)化問題導(dǎo)致濕地沉積物中蘊(yùn)含了大量的N,P 污染物,造成了較大的內(nèi)源污染風(fēng)險[8]。上覆水理化性質(zhì)、沉積物性質(zhì)以及擾動強(qiáng)度和時間是影響沉積物內(nèi)源釋放的主要因素,在白洋淀等緩流水體中,生物擾動作用就成為促進(jìn)沉積物內(nèi)源釋放的主要動力[9]。三角帆蚌的生物擾動促進(jìn)沉積物中氮的釋放,是水體TN 質(zhì)量濃度升高的主要原因,并且本研究發(fā)現(xiàn)三角帆蚌的生物量密度是影響沉積物中氮釋放速率的重要因素。CHENG H M 等[10]研究發(fā)現(xiàn),Chironomid 幼蟲和Limnodrilushoffmeisteri活動增加了沉積物的孔隙度,提高了間歇水和上覆水中Cr 的濃度,將Cr 的釋放通量提高約90 μg/(m-2·d)。

    圖2 水中各形態(tài)氮質(zhì)量濃度變化情況

    由圖2(b)可以看出,試驗階段各處理組出水NH3-N 平均質(zhì)量濃度分別為0.25,0.33,0.43 和0.45 mg/L,可見三角帆蚌提高了水體中NH3-N 濃度,但各組別之間差異不大(P >0.05)。 隨時間延長,貝類擾動產(chǎn)生的NH3-N 釋放量會逐漸降低為0,這是組間差異較小的原因之一[11]。 在本研究中,水體處于富氧狀態(tài),促使水體氨氧化過程,抑制反硝化,使NH3-N 濃度下降,TN 濃度上升。 試驗裝置運(yùn)行全階段,NH3-N出水濃度穩(wěn)定達(dá)到地表水IV 類(GB 3838―2002),表明模擬濕地對NH3-N 具有較好的處理效果。

    由圖2(c)可以看出,試驗期NO3--N 含量與TN變化具有一致性,表明水體NO3--N 濃度變化是TN濃度變化的主要原因。 由圖2(d)可以看出,三角帆蚌密度越高,NO2--N 濃度越高(P <0.05),試驗期內(nèi)低、中、高3 個組的NO2--N 平均質(zhì)量濃度較對照組分別高出0.09,0.25 和0.34 mg/L。三角帆蚌會為反硝化微生物活動提供更多空間。 底棲生物通過自身呼吸耗氧創(chuàng)造出更多缺氧環(huán)境,很多動物體內(nèi)腸道等環(huán)境也能成為缺氧微生物反應(yīng)場所,從而提高濕地中反硝化細(xì)菌的活性和數(shù)量,并提高濕地的脫氮效率[12]。 KANG Y 等[13]發(fā)現(xiàn),蚯蚓活動將沉積物與水體之間的氧通量降低了約1.25 mg/L,促使沉積物NO3--N 還原率提高了28.4%,因此,三角帆蚌有助于NO2--N 積累。 但在本研究中,三角帆蚌造成的沉積物中氮釋放作用更加明顯,為避免生物擾動造成的水質(zhì)惡化,低密度的三角帆蚌可能更適合白洋淀底棲修復(fù)。

    2.3 水體TP 變化

    各處理組TP 質(zhì)量濃度變化情況見圖3。

    圖3 各處理組TP 質(zhì)量濃度變化情況

    由圖3 可以看出,試驗期對照組與低密度組基本一致(P >0.05),中、高密度組TP 顯著高于這2組(P <0.05)。 中、高密度組平均質(zhì)量濃度分別為0.337 和0.349 mg/L,高出對照組120.8%和127.8%,顯然三角帆蚌對磷質(zhì)量濃度影響更明顯。JI MD等[14]研究發(fā)現(xiàn),濕地水體中的磷有36.2% ~ 49.7%依靠沉積物的吸附作用得以去除,遠(yuǎn)大于植物和微生物的作用。 因此生物擾動作用對磷釋放效果影響更為顯著。 NIZZOLI D 等[15]發(fā)現(xiàn)生物擾動促進(jìn)磷的釋放通量約為氮的3 倍,與本研究結(jié)果類似。三角帆蚌的擾動降低了沉積物的穩(wěn)定性,抑制了沉積物對磷的吸附過程,同時極大促進(jìn)了沉積物中磷的釋放,因此三角帆蚌對水體磷濃度影響更大。 高污染進(jìn)水段能促使三角帆蚌代謝增強(qiáng)[15],導(dǎo)致生物擾動增強(qiáng),提高了中、高密度組上覆水中TP 質(zhì)量濃度,可見低密度對水質(zhì)變化并不敏感,更有利于維護(hù)水質(zhì)。

    2.4 水體微生物群落分析

    各處理組水體中微生物群落豐度在門水平上的占比(比例≥1%)見圖4。 本研究共檢測出7 個微生物類群,分別為變形菌門(Proteobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、放 線 菌 門(Actinobacteria)、疣 微菌 門 (Verrucomicrobia)、藍(lán) 細(xì) 菌(Cyanobacteria)、Patescibacteria、螺旋體門(Spirochaetes)。各組中的優(yōu)勢菌種均為變形菌門、擬桿菌門和放線菌門微生物。中密度組變形菌門相對豐度最高(74.01%),較對照增加了33.89%,擬桿菌門和放線菌門分別下降了15.46%和13.27%。 表明一定密度范圍,三角帆蚌生物會增加水體中變形菌門豐度。

    圖4 各處理組水體中微生物群落分析.

    變形菌門是自然水體中最常見的微生物類群,分布十分廣泛,是大部分濕地中的優(yōu)勢菌門[16]。 變形菌門包含了濕地中絕大多數(shù)的脫氮除磷及有機(jī)物降解微生物,例如亞硝化球菌屬(Nitrosococcus)、硝化螺菌屬(Nitrospira)等微生物是重要的硝化細(xì)菌,假單胞菌屬微生物又是一類溶磷能力較強(qiáng)的細(xì)菌,能促進(jìn)濕地中的有機(jī)磷向可溶性磷轉(zhuǎn)化[17]。 擬桿菌門是濕地中一類重要的有機(jī)物降解微生物,對水體中的氨化合物及蛋白質(zhì)的降解效果更好。 放線菌多為好氧細(xì)菌,能促進(jìn)沉積物中的有機(jī)物分解[18]。 在本研究中,三角帆蚌活動提高了濕地中變形菌門的豐度,增加了濕地硝化細(xì)菌和磷細(xì)菌的數(shù)量。 加之水體始終處于富氧狀態(tài),三角帆蚌又促使水體中N,P 濃度升高,有助于植物對磷的吸收和利用,促進(jìn)植物生長。三角帆蚌增加了功能微生物豐度,并為微生物反應(yīng)提供了更優(yōu)環(huán)境,有助于強(qiáng)化濕地微生物的作用。

    2.5 沉水植物色素含量變化

    綠色植物的植物色素是其有機(jī)物生產(chǎn)能力的代表,其色素濃度的高低直接代表了植物生長水平的高低,色素含量越高,其生產(chǎn)能力則越強(qiáng)[19]。 本研究探究了金魚藻、穗花狐尾藻以及輪葉黑藻在三角帆蚌的影響下植物色素含量變化。 其中,金魚藻無根,穗花狐尾藻有莖狀根,僅有輪葉黑藻具有完整的根部結(jié)構(gòu),它們對水體中N,P 的吸收能力依次增強(qiáng),因此可以依據(jù)色素積累判斷出水體N,P 含量變化與植物生長之間的相關(guān)性。

    3 種沉水植物色素含量變化情況見圖5。 由圖5可以看出,三角帆蚌極大促進(jìn)了輪葉黑藻各類色素的積累,各實(shí)驗組數(shù)據(jù)之間差異顯著(P <0.05),表明中密度組的促進(jìn)作用更加明顯,第42 d 時,其葉綠素a,葉綠素b 和類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別高出對照組176.1%,190.9%和190.8%(P <0.05)。結(jié)合圖4 可知,各處理組輪葉黑藻色素含量與變形菌門豐度變化具有一致性,中密度組變形菌門豐度最高,其各種植物色素含量也最高,可見三角帆蚌引起的微生物與植物變化之間密切相關(guān)。 因此濕地功能微生物和營養(yǎng)含量增加,是有根植物色素積累的主要原因。同時本研究發(fā)現(xiàn),三角帆蚌抑制了穗花狐尾藻與金魚藻的生長,可見低密度的三角帆蚌更有利于濕地植被系統(tǒng)的構(gòu)建。

    圖5 3 種沉水植物色素含量變化情況

    3 結(jié)論

    (1)中、高密度的三角帆蚌會促進(jìn)沉積物中污染物釋放,將水體中的COD,TN,NH3-N 和TP 濃度分別提高13.7% ~20.6%,5.4% ~7.5%,73.7% ~81.5%和120.8% ~127.8%,而低密度組對水質(zhì)變化并無明顯影響(P >0.05)。

    (2)低、中三角帆蚌促使水體中變形菌門豐度增加10.81%和33.89%,提高了水體的硝化細(xì)菌和磷細(xì)菌豐度,促進(jìn)NO3--N 和可溶性磷酸鹽的積累。 三角帆蚌提供的缺氧環(huán)境促進(jìn)了反硝化,提高了水體中NO2--N 濃度,且三角帆蚌密度越高NO2--N 濃度越高。

    (3)低、中密度三角帆蚌生物擾動促進(jìn)了輪葉黑藻的光合色素積累。 微生物群落變化與有根植物色素積累密切相關(guān)。 三角帆蚌抑制金魚藻和穗花狐尾藻的生長。

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