立體吊袋栽培黑木耳菌株篩選

王慶武 孔 怡 唐麗娜 李秀梅 安秀榮

（泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東泰安271000）

習(xí)近平總書記稱贊柞水木耳是“小木耳，大產(chǎn)業(yè)”，充分肯定了食用菌產(chǎn)業(yè)在精準(zhǔn)扶貧方面發(fā)揮的作用。立體吊袋栽培黑木耳模式，省工時(shí)，空間利用率高，木耳品質(zhì)好，單位面積效益是大田地栽的4～5 倍，因此，越來越受到耳農(nóng)的歡迎[1]。立體吊袋栽培黑木耳技術(shù)比較成熟[2]，但適宜的栽培品種較少，后備品種不足[3]。為篩選出適宜立體栽培黑木耳菌株，筆者對(duì)收集自全國(guó)黑木耳主栽區(qū)菌株及采集的野生菌株，進(jìn)行菌株鑒定、抗拮、立體栽培比較試驗(yàn)?，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 供試黑木耳菌株

收集商品黑木耳菌株、采集野生菌株作為試驗(yàn)用菌株，并建立黑木耳種質(zhì)資源庫。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 黑木耳菌株鑒定及拮抗試驗(yàn)

根據(jù)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 1845―2010《食用菌菌種區(qū)別性鑒定拮抗試驗(yàn)》，觀察分離獲得的野生菌株菌絲的菌落形態(tài)和顯微特征，測(cè)定野生菌株的ITS 序列，并將測(cè)序結(jié)果輸入GenBank 數(shù)據(jù)庫（基因數(shù)據(jù)庫）進(jìn)行BLAST（生物大分子序列比對(duì)搜索工具）比對(duì)，確定是否為黑木耳菌株；將收集的黑木耳菌株兩兩組合接入PDA平板上（3次重復(fù)），25～28 ℃培養(yǎng)，觀察拮抗反應(yīng)，剔除同物異名菌株。

1.2.2 品比試驗(yàn)

1.2.2.1 栽培方式

熟料栽培。栽培料配方為木屑86.5%，麩皮10%，玉米粉2%，石膏1%，石灰0.5%，料含水量56%～64%，pH自然。聚乙烯栽培袋規(guī)格為16.2 cm×34 cm，每袋裝料折干0.6 kg，大棚立體吊袋栽培。每個(gè)菌株栽培150 袋，3 次重復(fù)，每次重復(fù)50 袋。試驗(yàn)棚內(nèi)隨機(jī)排列出耳。

1.2.2.2 試驗(yàn)調(diào)查內(nèi)容

調(diào)查試驗(yàn)菌株接種后菌絲吃透料時(shí)間、菌絲長(zhǎng)勢(shì)；吊袋出耳、污染等情況；統(tǒng)計(jì)產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率和出耳污染率。綜合評(píng)價(jià)：菌絲吃料快、長(zhǎng)勢(shì)好、出耳早、生物學(xué)效率高、污染率低、單片、韌性好的菌株作為目標(biāo)菌株。

1.2.3 繼代母種農(nóng)藝性狀遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)

將篩選的目標(biāo)菌株母種連續(xù)轉(zhuǎn)接3代于平板培養(yǎng)基上，同一條件下培養(yǎng)，觀察其菌落形態(tài)特征、菌絲生長(zhǎng)速度等穩(wěn)定性，同時(shí)進(jìn)行栽培出耳試驗(yàn)，調(diào)查其綜合農(nóng)藝性狀，綜合評(píng)價(jià)菌株繼代母種農(nóng)藝性狀穩(wěn)定性。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試黑木耳菌株收集結(jié)果

收集和采集黑木耳菌株61 份，菌株編號(hào)、名稱及來源見表1。

經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法鑒定均為黑木耳系列菌株，通過拮抗試驗(yàn)表明編號(hào)4（黑木耳19）與20（A71）為同一菌株、6（豐收2 號(hào)）與23（A74）為同一菌株、42（105）與55（2017-105）為同一菌株，其他均為不同菌株。

2.2 供試黑木耳菌株栽培比較試驗(yàn)結(jié)果

供試黑木耳菌株栽培比較試驗(yàn)結(jié)果見表2。

由表2 可知，有6 個(gè)菌株接種后未發(fā)菌，7 個(gè)菌株因螨蟲未出耳，1個(gè)菌株出現(xiàn)黑皮病未出耳，47個(gè)菌株正常出耳；菌絲長(zhǎng)速快的菌株是26、27、32、36、38、54號(hào)，只需12 d吃透料；菌絲長(zhǎng)勢(shì)好的菌株有37個(gè)；20 d 內(nèi)出耳芽的菌株有9 個(gè)；單片、邊圓菌株有26 個(gè)；絕對(duì)生物學(xué)效率8%以上的菌株有11 個(gè)；污染率為零的菌株有34 個(gè)。綜合栽培性狀較好的為24、35、44、54、60號(hào)菌株。

表1 供試黑木耳菌株及來源

表2 供試黑木耳菌株吊袋栽培結(jié)果

（續(xù)表2）

2.3 供試黑木耳菌株子實(shí)體形態(tài)特征比較

47 個(gè)出耳黑木耳菌株子實(shí)體形態(tài)的綜合評(píng)價(jià)見表3。

由表3 可知，47 個(gè)出耳菌株子實(shí)體形態(tài)特征存在差異，鮮耳顏色有淺棕色、棕色、深棕色、黑棕色，干耳顏色有灰白色、褐色、灰褐色、黑褐色，耳褶多少不一，有的沒有，口感有韌、脆和糯，耳片厚度、泡發(fā)率各異。耳片厚度在1.7 mm 及以上的菌株有37個(gè)；黑木耳干濕比在1∶11 及以上的有37 個(gè)菌株；耳片有韌性的有24 個(gè)菌株。綜合子實(shí)體形態(tài)特征較好的菌株號(hào)為10、11、32、35、37、41、42、43、44、47、48、49、50、51、52、54、55、58。

表3 供試黑木耳菌株子實(shí)體形態(tài)特征比較

2.4 繼代母種農(nóng)藝性狀遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)

根據(jù)品比試驗(yàn)結(jié)果，選擇35、44、54號(hào)菌株為目標(biāo)菌株，將其母種連續(xù)轉(zhuǎn)接3 次并分別進(jìn)行出耳試驗(yàn)，結(jié)果見表4。

由表4可知，35號(hào)黑木耳菌株代間菌落形態(tài)、菌絲滿袋時(shí)間、綜合農(nóng)藝性狀差異不明顯，表明其遺傳穩(wěn)定性好；44 號(hào)菌株出耳芽天數(shù)逐代延長(zhǎng)，生物學(xué)效率及商品率逐代降低，其F3 代菌落較整齊、菌絲滿袋時(shí)間延長(zhǎng)，且發(fā)病率高，表明其遺傳穩(wěn)定性差；54 號(hào)菌株代間菌落形態(tài)、菌絲滿袋時(shí)間、出耳芽天數(shù)、發(fā)病率差異不明顯，商品率逐代降低，但平均生物學(xué)效率F3明顯降低，表明其遺傳穩(wěn)定性差。

表4 黑木耳菌株繼代母種遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)

3 小結(jié)

試驗(yàn)對(duì)收集的61份黑木耳菌株進(jìn)行鑒定，均為黑木耳系列，拮抗試驗(yàn)表明有3 對(duì)菌株各為異名同株，其他均為不同菌株。

栽培試驗(yàn)結(jié)果表明，6個(gè)菌株接種后菌絲不萌發(fā)，7個(gè)菌株菌袋因發(fā)生螨蟲為害不出耳，1個(gè)菌株發(fā)生黑皮病不出耳，表明上述菌株抗逆性差；對(duì)有效出耳的47個(gè)菌株綜合評(píng)價(jià)結(jié)果表明，35號(hào)（TH02）菌株表現(xiàn)出較好的出耳一致性，性狀穩(wěn)定性及豐產(chǎn)性，商品性狀優(yōu)良[4]，是設(shè)施化立體栽培黑木耳的優(yōu)選菌株。