牛呼吸道疾病混感的病例診斷

周孝明，張延濤

（1. 煙臺(tái)市園林建設(shè)養(yǎng)護(hù)中心，山東 煙臺(tái) 264009；2. 青島市即墨區(qū)溫泉街道辦事處，山東 青島 266200）

牛呼吸道疾病綜合癥（BRDE）是一種嚴(yán)重的疾病，危及養(yǎng)牛業(yè)的持續(xù)發(fā)展。其臨床癥狀包括抑郁，食欲不振和呼吸困難。該病主要危害小牛、奶牛和育肥的，發(fā)病率很高，給農(nóng)場造成的損失較大。BRDC 通常是由單次感染或多次再感染引起的，例如牛副流感病毒和牛支原體。一些病原體會(huì)損壞牛固有層細(xì)胞，導(dǎo)致支氣管炎、氣管和支氣管炎癥，病原微生物感染可使疾病惡化，并對(duì)牛和人體健康造成極大傷害。

1 材料與方法

1.1 病料、試劑

從山東省一家養(yǎng)牛場采集2 份牛鼻拭子樣本；用于收集RNA 的bolinke 測試試劑盒；用于DNA 提取過程的bolinke試劑盒；并發(fā)布RT 測試套件。

1.2 引物設(shè)計(jì)

根據(jù)GenBank 中公布的牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）、牛副流感病毒3 型（BPIV3）、牛呼吸合胞體病毒?。˙RSV）、牛腺病毒（BADV）和牛支原體的遺傳序列，設(shè)計(jì)了用于變異鑒定機(jī)構(gòu)的引物。引物由基因產(chǎn)業(yè)基因遺傳技術(shù)開發(fā)有限公司部分合成。

1.3 病料處理和核酸提取

使用1mL PBS 潤濕病原體，離心后得到的上清液按照試劑盒的使用說明書進(jìn)行提取、收集和收集，并按照試劑盒的使用說明書進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。

2 結(jié) 果

檢測發(fā)現(xiàn)，在特定的條件下，兩種疾病材料的PCR 擴(kuò)增片段具有與BPIV3（333bp）和牛支原體（280bp）相同的目標(biāo)片段，證實(shí)了奶牛場的病牛是BPIV3 和支原體的混合感染。

3 討 論

血清學(xué)和病原體檢測的結(jié)果是當(dāng)前檢測病原微生物的常用方法。另外，熒光抗體檢測，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)及直接和間接血凝試驗(yàn)是血清學(xué)檢測的常用方法。首先是在感染初期檢測病原微生物的結(jié)果。本研究使用的PCR 是一種能夠準(zhǔn)確檢測病原的方法，它的優(yōu)點(diǎn)是可變性強(qiáng)，靈敏度高，速度快和精度高，但易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因此，應(yīng)在檢測方法和陽性對(duì)照中設(shè)置強(qiáng)陽性。本試驗(yàn)診斷出患病的母牛被BPIV3 和牛支原體的混合物感染。因此，應(yīng)隔離和治療患病的母牛，并應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況保護(hù)健康的母牛。另外，在母牛同時(shí)被BPIV3或牛支氣管寄生蟲感染后，免疫系統(tǒng)將受到極大抑制，導(dǎo)致病原體同時(shí)感染。因此，為了更好地根據(jù)癥狀進(jìn)行治療，需準(zhǔn)確檢測細(xì)菌，選擇適用藥物。在本次實(shí)驗(yàn)中，我們?cè)诓×线€發(fā)現(xiàn)了與系統(tǒng)（如IBRV 和BADV）中疾病相關(guān)的病原體。預(yù)防和控制呼吸系統(tǒng)的慢性疾病對(duì)中國肉牛產(chǎn)業(yè)的整體發(fā)展特別重要。歐美等一些發(fā)達(dá)國家已經(jīng)建立了完善的動(dòng)物和人類疾病深入研究體系，需要不斷的關(guān)注和對(duì)社會(huì)的資本再投資，在預(yù)防控制和徹底根除方面取得了顯著成果。中國對(duì)牛呼吸系統(tǒng)疾病的科學(xué)研究起步較晚，已引起了社會(huì)的關(guān)注。缺乏特定的疫苗和特殊藥物限制了中國BRDC 總體預(yù)防和控制水平的提高。因此，在制定更加合理的防控策略時(shí)，需要借鑒國外先進(jìn)的新型防控機(jī)制。從國外進(jìn)口牛時(shí)，必須做好檢疫工作，嚴(yán)格禁止從隔離區(qū)引進(jìn)牛。及時(shí)隔離和仔細(xì)觀察新引入的牛，進(jìn)行適當(dāng)?shù)仳?qū)蟲并接種疫苗，確認(rèn)無疫后方可健康的牛混養(yǎng)。此外，養(yǎng)豬場應(yīng)加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理，注意防控，并為牛提供一個(gè)清潔適宜的環(huán)境。應(yīng)及時(shí)清理牛舍的室內(nèi)溫度和環(huán)境濕度，并進(jìn)行通風(fēng)換氣，并定期對(duì)牛棚進(jìn)行消毒。此外，除了基本保證新鮮飼料，清潔和充足的飲用水外，還應(yīng)注意牛的各種營養(yǎng)素的平衡，要補(bǔ)充維生素和礦質(zhì)，以改善牛群的健康。被感染的牛應(yīng)該被隔離并盡快處理以防止感染。