不同種類油脂對(duì)雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值、生長(zhǎng)性能、內(nèi)臟指數(shù)、養(yǎng)分表觀代謝率及血清生化指標(biāo)的影響

王飛揚(yáng) 田川堯 蔡鋒隆 李留安 楊 華 張建斌*

(1.天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，天津市農(nóng)業(yè)動(dòng)物繁育與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300384；2.天津市廣源畜禽養(yǎng)殖有限公司，天津 301824)

多不飽和脂肪酸(PUFAs)分為2個(gè)系列：ω-6 PUFAs和ω-3 PUFAs。PUFAs具有兩親性，擁有親水性頭部和疏水性尾部。因?yàn)檫@種結(jié)構(gòu)和其他特性，使PUFAs具有以下生物作用：維持細(xì)胞膜流動(dòng)性[1]，抑制炎癥反應(yīng)如克羅恩病[2]，降低炎癥反應(yīng)初期出現(xiàn)情緒癥狀的風(fēng)險(xiǎn)[3]，降低患2型糖尿病(T2D)的風(fēng)險(xiǎn)[4]，調(diào)節(jié)免疫功能[5]，降低血液甘油三酯(TG)、膽固醇含量以及降血壓、降血小板聚集[6]。ω-6 PUFAs和ω-3 PUFAs屬于必需脂肪酸，人體不能合成，需要從食物中獲得。從20世紀(jì)90年代開始，PUFAs逐漸成為功能性食品研究的重點(diǎn)。而且PUFAs在醫(yī)藥保健、食品、化工等眾多領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用和關(guān)注[7]。

隨著人們生活水平的提高，患心血管疾病的病人數(shù)量每年都不斷攀升，2012年我國(guó)心血管病患者在2.9億人左右，是2002年1.8倍，以中老年患者居多[8]。有研究證實(shí)，動(dòng)物通過(guò)消化代謝過(guò)程將食物中PUFAs轉(zhuǎn)化為自身的PUFAs[9]，而且膳食ω-6 PUFAs和ω-3 PUFAs水平與代謝綜合征(MetS)之間關(guān)心密切[10]。長(zhǎng)期攝入ω-6/ω-3值高的食物易導(dǎo)致肥胖、機(jī)體代謝紊亂，而且患心腦血管疾病概率也會(huì)增大。而居民膳食中的ω-6 PUFAs與ω-3 PUFAs比例失調(diào)已成常態(tài)。我國(guó)城市和農(nóng)村居民膳食ω-6/ω-3值分別為7.6和8.0，遠(yuǎn)高于中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦膳食適宜攝入值(6.67)[11-12]。因此，調(diào)節(jié)膳食中ω-6/ω-3值對(duì)于現(xiàn)代居民的飲食起居意義重大。雞肉、雞蛋作為廉價(jià)的蛋白質(zhì)來(lái)源，越來(lái)越受廣大居民的青睞，已然成為我國(guó)居民飲食不可或缺的部分[13]。而雛雞時(shí)期是雞生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的重要階段，所以研究不同來(lái)源PUFAs對(duì)雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值的調(diào)節(jié)效果及對(duì)生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)的影響意義重大。目前，大多數(shù)研究主要集中于某一種油脂對(duì)機(jī)體的影響，對(duì)于不同油脂對(duì)機(jī)體的影響報(bào)道較少[14]。因此，本研究選取魚油、紫蘇籽油、亞麻籽油這3種富含ω-3的油脂進(jìn)行試驗(yàn)，旨在對(duì)比不同來(lái)源PUFAs對(duì)機(jī)體ω-6/ω-3值的調(diào)節(jié)效果及對(duì)生長(zhǎng)性能、內(nèi)臟指數(shù)、養(yǎng)分表觀代謝率及血清生化指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取1日齡雌性羅斯(Ross)褐殼蛋雞200只，隨機(jī)分成4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。各組之間體重差異不顯著(P<0.05)。為了保證攝入能量一致，基礎(chǔ)飼糧(含2.96%豆油)中添加油脂的質(zhì)量占比均為1.5%。為了控制攝入ω-6/ω-3值一致，用豆油分別與魚油、紫蘇籽油、亞麻籽油按一定比例混合，將試驗(yàn)飼糧的ω-6/ω-3值均調(diào)到6.00。對(duì)照組(C組)在基礎(chǔ)飼糧中添加1.500%豆油，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加1.155%魚油+0.345%豆油(Ⅰ組)、0.495%亞麻籽油+1.005%豆油(Ⅱ組)和0.525%紫蘇籽油+0.975%豆油(Ⅲ組)。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 飼養(yǎng)管理及樣品采集

雛雞自由采食，充足飲水，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。試驗(yàn)期42 d。在試驗(yàn)開始前隨機(jī)選取3只初始雛雞，測(cè)其機(jī)體ω-6/ω-3值，試驗(yàn)期每天記錄飼料添加量，每周結(jié)料，每2周測(cè)定雛雞體重、管圍、脛長(zhǎng)。在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前1周收集糞便和飼糧用于測(cè)定養(yǎng)分代謝率，飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)選取5只雞進(jìn)行屠宰，翅下采血，分離血清，用于測(cè)定血清生化指標(biāo)；稱取內(nèi)臟，用于計(jì)算內(nèi)臟指數(shù)；將屠宰后的整只雛雞機(jī)體烘干磨粉，用于測(cè)定機(jī)體ω-6/ω-3值。

1.3 脂肪酸甲脂化與氣相色譜測(cè)定

參照GB 5009.168—2016對(duì)豆油、魚油、亞麻籽油、紫蘇籽油、飼糧風(fēng)干樣品和雛雞機(jī)體凍干粉進(jìn)行脂肪提取、皂化和甲脂化，制備的樣液裝入樣品瓶，采用Agilent 7890B氣相色譜儀(美國(guó))分析脂肪酸含量和組成[15]。

色譜柱為SP-2560(100 m×250 μm×0.2 μm)，升溫程序?yàn)?40 ℃保持5 min，4 ℃/min升溫至220 ℃，0.5 ℃/min升溫至230 ℃，4 ℃/min升溫至240 ℃并保持15 min。進(jìn)樣量為1 μL，分流比為50∶1，進(jìn)樣口溫度為250 ℃，檢測(cè)器溫度為280 ℃。載氣為高純氦氣，流量為1 mL/min，分流比為50∶1。

1.4 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)正式開始后，每周結(jié)料，每2周測(cè)定雛雞體重、管圍、脛長(zhǎng)，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)。在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前1周收集糞便和飼糧用內(nèi)源指示劑法測(cè)消化率，飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)選取5只雞進(jìn)行屠宰，稱取內(nèi)臟用于計(jì)算內(nèi)臟指數(shù)。相關(guān)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

平均日采食量(g/d)=統(tǒng)計(jì)期內(nèi)耗料量/(飼養(yǎng)日期×蛋雞個(gè)數(shù))；平均日增重(g/d)=統(tǒng)計(jì)期內(nèi)蛋雞增重/(飼養(yǎng)日期×蛋雞個(gè)數(shù))；料重比=統(tǒng)計(jì)期內(nèi)耗料量/統(tǒng)計(jì)期內(nèi)蛋雞增重；內(nèi)臟指數(shù)(%)=100×內(nèi)臟重量/活體重量。

內(nèi)源指示劑法計(jì)算飼糧養(yǎng)分(干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷、粗纖維、粗脂肪)表觀代謝率公式為：

養(yǎng)分表觀代謝率(%)=100-100×(飼糧中指示劑含量/排泄物中指示劑含量)×(排泄物中該養(yǎng)分含量/飼糧中該養(yǎng)分含量)。

1.5 血清生化指標(biāo)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)選取5只雞，翅下采血，用10 mL離心管收集血液。傾斜放置室溫30 min后，4 ℃、3 000 r/min離心10 min，分離的血清分裝后立即置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性及尿素(UREA)、總蛋白(TP)、免疫球蛋白G(IgG)、TG、總膽固醇(TCHO)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量均使用相應(yīng)的試劑盒用GLAMOUR 3000全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)Molecular Devices)測(cè)定。試劑盒均購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2018進(jìn)行整理，并采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，并對(duì)組間差異顯著的指標(biāo)采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 不同種類油脂對(duì)雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值的影響

如表2所示，C組雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值顯著高于初始及Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組雛雞(P<0.05)，而Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值顯著低于初始雛雞(P<0.05)。

表2 不同種類油脂對(duì)雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值的影響

2.2 不同種類油脂對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的影響

如表3所示，各組之間平均日增重、平均日采食量、脛長(zhǎng)、管圍均無(wú)顯著差異(P>0.05)。Ⅰ組料重比與C組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于Ⅱ組、Ⅲ組(P<0.05)；Ⅱ組料重比與Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)，但顯著低于C組、Ⅰ組(P<0.05)。Ⅱ組體斜長(zhǎng)顯著高于Ⅰ組、Ⅲ組(P<0.05)，與C組差異不顯著(P>0.05)。

表3 不同種類油脂對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的影響

2.3 不同種類油脂對(duì)雛雞內(nèi)臟指數(shù)的影響

如表4所示，各組之間心臟、肝臟、脾臟、腎臟、胃、法氏囊指數(shù)以及腸道總長(zhǎng)無(wú)顯著差異(P>0.05)。Ⅱ組、Ⅲ組肺臟指數(shù)顯著低于C組(P<0.05)。

表4 不同種類油脂對(duì)雛雞內(nèi)臟指數(shù)的影響

2.4 不同種類油脂對(duì)雛雞養(yǎng)分表觀代謝率的影響

如表5所示，各組之間有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷、粗纖維、粗脂肪表觀代謝率均無(wú)顯著差異(P>0.05)。C組干物質(zhì)表觀代謝率最低，顯著低于其他各組(P<0.05)；Ⅲ組干物質(zhì)表觀代謝率最高，顯著高于C組和Ⅱ組(P<0.05)。

表5 不同種類油脂對(duì)雛雞養(yǎng)分表觀代謝率的影響

2.5 不同種類油脂對(duì)雛雞血清生化指標(biāo)的影響

如表6所示，各組之間血清ALT、AST、ALP活性及UREA、TP、IgG和TG含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。Ⅲ組血清TCHO含量最高，顯著高于其他各組(P<0.05)。Ⅰ組血清LDL-C含量最低，顯著低于其他各組(P<0.05)。

表6 不同種類油脂對(duì)雛雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 不同種類油脂對(duì)雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值的影響

研究表明，飼糧中不飽和脂肪酸只有極少部分能轉(zhuǎn)化到反芻動(dòng)物的肉、奶中，主要是飼糧中脂肪酸被瘤胃微生物氫化、水解，再重新合成各種脂肪酸[16-17]。而單胃動(dòng)物代謝不飽和脂肪酸的方式與反芻動(dòng)物存在很大差異，雞代謝脂肪酸主要是靠腸道吸收及腸道菌群代謝的相互作用[18]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加豆油會(huì)顯著增加雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值，而在飼糧中添加魚油、亞麻籽油、紫蘇籽油都能顯著降低雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值，并且飼糧中添加等量ω-6/ω-3值相同的魚油+豆油、亞麻籽油+豆油、紫蘇籽油+豆油對(duì)降低雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值的效果無(wú)顯著差異。王雪[14]研究表明，飼糧中添加等量亞麻油、混合油(亞麻油+棕櫚油)對(duì)飼糧ω-6/ω-3值影響不顯著，上述2種飼糧飼喂羯羔對(duì)其脂肪組織各脂肪酸含量及ω-6/ω-3值影響不顯著。這與本研究結(jié)果一致。Parvar等[19]研究結(jié)果顯示，飼糧中分別添加等量魚油+菜籽油(1∶1)、魚油+豆油(1∶1)飼喂羔羊，魚油+菜籽油組羔羊機(jī)體的ω-6/ω-3值顯著低于魚油+豆油組。Najafi等[20]研究表明，與豆油或棕櫚油相比，補(bǔ)充魚油導(dǎo)致馬哈巴蒂山羊羔羊機(jī)體的ω-6/ω-3值更低，出現(xiàn)上述2種結(jié)果原因可能是魚油ω-6/ω-3值低于豆油和棕櫚油。在飼糧中添加等量不同種類油脂對(duì)動(dòng)物機(jī)體ω-6/ω-3值的調(diào)節(jié)能力可能受油脂中ω-6/ω-3值的影響。

3.2 不同種類油脂對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能、內(nèi)臟指數(shù)和養(yǎng)分表觀代謝率的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加等量的魚油+豆油、亞麻籽油+豆油、紫蘇籽油+豆油對(duì)雛雞的平均日增重和平均日采食量無(wú)顯著影響，對(duì)雛雞的有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷、粗纖維、粗脂肪表觀代謝率均無(wú)顯著影響，對(duì)雛雞的心臟、肝臟、脾臟、腎臟、胃、法氏囊指數(shù)以及腸道總長(zhǎng)均無(wú)顯著影響。Najafi等[20]研究表明，補(bǔ)充不同的脂肪源對(duì)羔羊的生長(zhǎng)性能、采食量無(wú)顯著影響。Roy等[21]研究結(jié)果顯示，在飼糧中添加等量大豆油和葵花油對(duì)孟加拉黑山羊平均日增重和平均日采食量無(wú)顯著影響，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。王雪[14]、Toral等[22]、Ferreira等[23]關(guān)于不同油脂對(duì)機(jī)體平均日增重和平均日采食量的報(bào)道與本試驗(yàn)結(jié)果不一致，出現(xiàn)這種情況的原因可能與油脂的添加量有關(guān)，油脂添加過(guò)量會(huì)影響適口性，對(duì)機(jī)體消化代謝也可能產(chǎn)生影響。Ferreira等[23]研究表明，單獨(dú)添加魚油，或添加等量的魚油+豆油混合油對(duì)馬哈巴蒂山羊羔羊的消化率無(wú)顯著影響。Roy等[21]研究表明，飼糧中添加等量大豆油和葵花油對(duì)孟加拉黑山羊各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率無(wú)顯著影響，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

3.3 不同種類油脂對(duì)雛雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)能反映雛雞肝腎功能、機(jī)體炎癥反應(yīng)及代謝狀態(tài)，本試驗(yàn)測(cè)定雛雞血清生化指標(biāo)包括：ALT、AST、ALP活性及UREA、TP、IgG、TG、TCHO、LDL-C含量。其中，血清TG、TCHO、LDL-C含量反應(yīng)機(jī)體脂代謝。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加一定比例的油脂對(duì)雛雞機(jī)體肝腎功能、免疫功能無(wú)顯著影響，這與劉武等[24]試驗(yàn)結(jié)果相符。Lee等[25]研究表明，油脂種類對(duì)血清TG含量無(wú)顯著影響，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中，紫蘇籽油+豆油組的血清TCHO含量顯著高于亞麻籽油+豆油組，亞麻籽油+豆油組的血清TCHO含量顯著高于魚油+豆油組，魚油+豆油組的血清LDL-C含量顯著低于其他組，此結(jié)果與鐘偉等[26]試驗(yàn)結(jié)果相符，出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能與機(jī)體對(duì)這3種油脂的代謝機(jī)理不同有關(guān)。汪鯤[27]研究表明，亞麻籽和魚油對(duì)蛋雞脂肪酸代謝途徑的調(diào)控作用不同。

4 結(jié) 論

① 飼糧添加1.155%魚油+0.345%豆油、0.495%亞麻籽油+1.005%豆油或0.525%紫蘇籽油+0.975%豆油均可顯著改善雛雞機(jī)體ω-6/ω-3值，且不同種類油脂的調(diào)控效果差異不顯著。

② 飼糧添加1.155%魚油+0.345%豆油、0.495%亞麻籽油+1.005%豆油或0.525%紫蘇籽油+0.975%豆油對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能、器官指數(shù)、養(yǎng)分表觀代謝率及血清生化指標(biāo)無(wú)明顯影響。