脫礦釉質(zhì)樹脂滲透后的再礦化研究

李文娟 李 慧 彭 偉

（1. 滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，滄州 061001；2. 華北理工大學(xué)，唐山 063000）

【關(guān)鍵字】 脫礦釉質(zhì) 再礦化 生物活性玻璃溶液 滲透樹脂 分光光度比色儀

近年來(lái)因正畸治療和飲食不良習(xí)慣造成的釉質(zhì)齲越來(lái)越常見。發(fā)生在前牙的釉質(zhì)齲除對(duì)治療效果的要求較高外，前牙美觀更受到大家的關(guān)注。滲透樹脂在牙齒美學(xué)、治療有效率、顏色穩(wěn)定性、抗著色和短期效果等方面具有一定的優(yōu)勢(shì)[1]，但滲透樹脂不可避免會(huì)出現(xiàn)充填脫礦釉質(zhì)微孔不完全、聚合收縮、老化和繼發(fā)齲等現(xiàn)象[2]。本實(shí)驗(yàn)在前期課題研究已證實(shí)6%生物活性玻璃溶液治療釉質(zhì)齲有良好再礦化效應(yīng)的基礎(chǔ)上，研究其對(duì)脫礦釉質(zhì)再礦化后美觀方面的影響，為臨床釉質(zhì)齲治療的美觀性、長(zhǎng)期穩(wěn)定性提供新方法。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑

顯微硬度儀（HV-1000IS，上海鋸晶精密儀器制造有限）；分光光度比色儀（Olympus公司，CE100-DC/EU，日本）；質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6%的生物活性玻璃溶液的配制：生物活性玻璃粉0.6 g溶于9.4 g去離子水中配制而成。脫礦液的配制：乙酸50 mmol/L，硝酸鈣2.2 mmol/L，磷酸二氫鉀2.2 mmol/L，氫氧化鈉調(diào)配pH至4.5；人工唾液配制（ISO/TR10271標(biāo)準(zhǔn)）：氯化鈉0.4 g，氯化鉀0.4 g，無(wú)水氯化鈣0.795 g，磷酸二氫鈉0.7 g，硫化鈉0.005 g，尿素1 g，去離子水定容至1 L，氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7.0。

1.2 釉質(zhì)塊脫礦模型

將20塊（4 mm×4 mm×2 mm）釉質(zhì)塊分為硬度檢測(cè)及顏色檢測(cè)樣本2組，浸泡于脫礦液中，釉質(zhì)面朝上，間隔24 h更換脫礦液，37℃恒溫水浴搖動(dòng)（100 r/min），72 h后去離子水洗凈，吹干，釉質(zhì)呈白堊色（齲損面）完成建模。

1.3 滲透樹脂處理

用足量15%鹽酸凝膠（Icon-Etch）處理齲損面，靜置2 min，酸蝕范圍至齲損外2 mm處，離子水沖洗30 s，吹干；涂布乙醇干燥劑（Icon-Dry），干燥30 s，吹干；用專用小毛刷在酸蝕面涂足量樹脂滲透劑（Icon-infiltration），靜置3 min，光固化40 s；換用新的注射頭，再次涂滲透樹脂1 min，光固化40 s，硅膠拋光牙齒表面。

1.4 再礦化處理

將處理完的釉質(zhì)塊分為A組和B組。A組樣本浸于6%生物活性玻璃溶液中，牙刷反復(fù)涂刷牙面5 min，去離子水蕩洗2 min，浸入人工唾液。每天3次，持續(xù)20 d。所有操作在恒溫37 ℃環(huán)境下完成。B組樣本浸于去離子水中，采用同樣方法進(jìn)行再礦化處理。

1.5 二次脫礦處理

將2組樣本同時(shí)放入脫礦液中進(jìn)行人工脫礦72 h后放入人工唾液中，去離子水沖洗后進(jìn)行顏色和硬度檢測(cè)。

1.6 硬度檢測(cè)

使用顯微硬度計(jì)進(jìn)行硬度檢測(cè)：將試樣釉質(zhì)面朝上，保留4 mm×4 mm的開窗區(qū)，采用自凝樹脂包埋，固定在載物臺(tái)上，使用維氏壓頭，在負(fù)荷100 g，持續(xù)10 s條件下使其形成壓痕。沿釉質(zhì)面的上中下隨機(jī)測(cè)量3個(gè)點(diǎn)（至少分開100 μm），注意觀察釉質(zhì)表面的投影，確保凸出的光滑表面盡可能平行于掃描面。樣品置于掃描臺(tái)上，400×放大顯微鏡下觀察最清晰的表面，可用縮進(jìn)在相同放大倍數(shù)下測(cè)量壓痕的對(duì)角線，記錄相應(yīng)處理即刻的維氏硬度值（正常釉質(zhì)SMH0，脫礦后SMH1，滲透樹脂處理后SMH2，再礦化后SMH3，二次脫礦后SMH4），并計(jì)算其平均值作為樣品表面顯微硬度值（SMH，kgf/mm2）。

1.7 顏色檢測(cè)

由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的同一位醫(yī)師按照分光光度比色儀的說(shuō)明書要求，選擇晴天（14: 00-16: 00）對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)。將樣本置于暗盒正中，選取正常釉質(zhì)樣本表面的上1/3、中1/3和下1/3區(qū)域分別測(cè)量L0、a0、b0值（取平均值），作為基準(zhǔn)值，然后進(jìn)行脫礦處理后取色，測(cè)量L1、a1、b1值；滲透樹脂處理后取色，測(cè)量L2、a2、b2值；再礦化后取色，測(cè)量L3、a3、b3值；二次脫礦后取色，測(cè)量L4、a4、b4值。使用配置的軟件進(jìn)行圖像分析，利用公式?E= [ （Lx-L0*） 2+ （ax-a0*） 2+ （bxb0*） 2]1/2計(jì)算脫礦后、滲透樹脂處理后、再礦化后、二次脫礦后與正常釉質(zhì)表面的色差值（?E1、?E2、?E3、?E4）。色差范圍評(píng)定為：當(dāng)?E值在 0～1范圍內(nèi)，為肉眼不易察覺水平；當(dāng)?E值在1.1～3.7范圍，為肉眼不易分辨；當(dāng)?E值 ＞ 3.7，則說(shuō)明色彩偏差過(guò)大，為臨床不可接受[11]。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，組間比較運(yùn)用單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)，A組與B組比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 顯微硬度分析

2組樣本釉質(zhì)表面顯微硬度的分析結(jié)果見表1。其中2組的SMH0、SMH1和SMH2差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；A組SMH3和SMH4均大于B組（P＜0.05）。A組SMH0、SMH1、SMH2、SMH3及SMH4兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），顯微硬度比較結(jié)果為SMH0＞SMH3＞SMH2＞SMH4＞SMH1；B組SMH2與SMH3的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其他組間兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），顯微硬度值比較為SMH0＞SMH3≈SMH2＞SMH4＞SMH1。

表1 2組釉質(zhì)表面顯微硬度結(jié)果分析（n=5，，kgf/mm2）

表1 2組釉質(zhì)表面顯微硬度結(jié)果分析（n=5，，kgf/mm2）

注：正常釉質(zhì)SMH0，脫礦后SMH1，滲透樹脂處理后SMH2，再礦化后SMH3，二次脫礦后SMH4。組間比較分析顯示：*A組組間兩兩比較P＜0.05。#B組組間兩兩比較，相同字母組間兩兩比較P＞0.05。

組別 SMH0 SMH1 SMH2 SMH3 SMH4 F P A 組 * 295.97±24.59 84.70±17.56 163.32±30.49 209.41±21.53 121.55±14.75 120.227* 0.000*B 組 # 311.65±33.18 82.38±20.20 174.43±25.67a 176.22±21.38a 95.52±13.29 133.849# 0.000#t 1.139 -0.259 -0.837 0.538 -3.931 P 0.271 0.799 0.415 0.005 0.001

2.2 顏色變化

由表2分析釉質(zhì)的顏色可知，兩組的ΔE1、ΔE2顏色差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組的ΔE1＞3.7，臨床不可接受，兩組的ΔE2＜3.7，肉眼不易分辨。A組的ΔE3、ΔE4均小于B組（P＜0.05），兩組的ΔE3均小于3.7，肉眼不易分辨；A組的ΔE4＜3.7，肉眼不易分辨；B 組的 ΔE4＞3.7，臨床不可接受。A組的ΔE1大于ΔE2、ΔE3、ΔE4（P＜0.05），ΔE2、ΔE3、ΔE4組間兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。B組的ΔE1大于ΔE2、ΔE3、ΔE4（P＜0.05），ΔE2、ΔE3、ΔE4組 間 兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 2組釉質(zhì)色差值ΔE分析結(jié)果（n=5，）

表2 2組釉質(zhì)色差值ΔE分析結(jié)果（n=5，）

注：脫礦后、滲透樹脂處理后、再礦化后、二次脫礦后與正常釉質(zhì)表面的色差值分別為ΔE1、ΔE2、ΔE3、ΔE4。組間比較分析顯示：aA組組間，與ΔE1比較P＜0.05。bB組組間，與ΔE1比較P＜0.05。

組別 ΔE1 ΔE2 ΔE3 ΔE4 F P A 組 21.11±6.64a 2.74±0.83 1.83±0.71 3.14±0.86 67.412 0.000 B 組 20.78±7.93b 2.67±1.19 2.77±0.80 4.31±1.32 41.689 0.000 t 0.097 0.152 -2.640 -2.174 P 0.924 0.881 0.018 0.045

3 討論

顯微硬度是評(píng)價(jià)臨床口腔材料的重要指征，特別適用于評(píng)估牙釉質(zhì)中礦物質(zhì)的水平，是衡量牙體組織脫礦及再礦化程度的關(guān)鍵指標(biāo)[3]。齲病的發(fā)生表現(xiàn)為牙體硬組織色、形、質(zhì)的改變。滲透樹脂可封閉釉質(zhì)通道，并通過(guò)滲入的樹脂與牙體本身顏色的結(jié)合來(lái)提升釉質(zhì)表面的美觀效果，治療方便簡(jiǎn)單，磨除牙體組織少，可減少患者的恐懼感[4]。Min等[5]發(fā)現(xiàn)釉質(zhì)表面顏色美觀性與礦物含量多少呈正顯著相關(guān)。張浩等[6]在滲透樹脂與無(wú)定形磷酸鈣聯(lián)合應(yīng)用改變滲透樹脂的滲透深度的研究以及Ekstrand等[7]的臨床試驗(yàn)中，醫(yī)師使用ICDAS評(píng)分和X線片評(píng)分評(píng)估氟保護(hù)漆聯(lián)合滲透樹脂對(duì)乳牙鄰面齲治療1年后的療效，發(fā)現(xiàn)藥物聯(lián)合應(yīng)用效果更好。代建梅[8]等體外實(shí)驗(yàn)證明滲透樹脂與生物活性玻璃聯(lián)合應(yīng)用在顯微硬度及孔隙封閉效果方面強(qiáng)于單一藥物應(yīng)用，但是兩者聯(lián)合應(yīng)用的美觀性的研究未見報(bào)道。本研究對(duì)經(jīng)過(guò)滲透樹脂治療的牙齒進(jìn)行生物活性玻璃再礦化，結(jié)果可見：生物活性玻璃對(duì)滲透樹脂治療的牙齒的硬度和美觀方面都起到了積極作用。

Crystaleye分光光度比色儀是一種新型的數(shù)字化標(biāo)準(zhǔn)測(cè)色儀器，客觀地測(cè)量物體顏色信息，特別適用于肉眼難以辨別的顏色變化[9]，最大限度地減少實(shí)驗(yàn)人員人為因素的影響，有研究已證實(shí)其具有高度的可重復(fù)性、穩(wěn)定性、敏感性和可靠性[10]。有研究證實(shí)，滲透樹脂修復(fù)后的牙釉質(zhì)在人工唾液保存下（ΔE值在0.8～2.31之間），顏色相對(duì)穩(wěn)定[12]，因此本實(shí)驗(yàn)采用人工唾液存儲(chǔ)樣本。經(jīng)滲透樹脂治療釉質(zhì)齲后的顏色改變?nèi)庋鄄豢煞直?；再礦化后，生物活性玻璃組的顏色有所改善，肉眼不易分辨，去離子水組的顏色無(wú)變化，2組顏色均在臨床可接受范圍內(nèi)，說(shuō)明滲透樹脂聯(lián)合生物活性玻璃治療釉質(zhì)白堊斑的顏色改善效果較單獨(dú)滲透樹脂好；二次脫礦后，2組顏色均增加，生物活性玻璃組的顏色改變?cè)谂R床可接受范圍內(nèi)，去離子水組的顏色改變臨床不可接受，說(shuō)明生物活性玻璃可促進(jìn)滲透樹脂治療釉質(zhì)白堊斑的抗脫礦作用，去離子水組的色差值的增加可能是由于滲透樹脂基質(zhì)成分的分解和或樹脂的降解。

脫礦釉質(zhì)經(jīng)樹脂滲透后，樹脂滲透封閉區(qū)域還能夠再礦化的原因可能是滲透樹脂存在充填脫礦釉質(zhì)微孔不完全、聚合收縮、鄰面處理不到等問(wèn)題造成微滲漏的發(fā)生，脫礦釉質(zhì)經(jīng)過(guò)樹脂滲透后，樹脂滲透封閉區(qū)域還能發(fā)生脫礦的原因也與上述材料問(wèn)題和微生物作用關(guān)系密切，生物玻璃溶液中刷牙5 min，然后流水沖洗，產(chǎn)生更好的再礦化的機(jī)制可能是生物活性玻璃含Ca、P、Si 和Na等元素，其中45S5型是無(wú)機(jī)無(wú)定形、鈣、磷硅酸鈉材料，這些無(wú)機(jī)鹽可沉積在牙齒表面并形成羥基磷灰石，起到再礦化作用。本實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)二次脫礦的意義在于模仿釉質(zhì)齲易感者的口腔環(huán)境，但由于受實(shí)驗(yàn)條件影響以及滲透樹脂治療釉質(zhì)齲的效果存在的差異，生物活性玻璃作用于滲透樹脂治療后患牙美觀問(wèn)題的長(zhǎng)期穩(wěn)定性還有待實(shí)驗(yàn)研究和臨床科學(xué)驗(yàn)證。

4 結(jié)論

生物活性玻璃溶液中的無(wú)機(jī)鹽組分增加了滲透樹脂治療早期釉質(zhì)齲的顯微硬度，對(duì)釉質(zhì)表面顏色改善有一定作用。