葛根素脈沖膠囊的制備及影響釋藥時滯的因素研究

周秋貴，張維軍，曾 紅，陳 婷

葛根素脈沖膠囊的制備及影響釋藥時滯的因素研究

*周秋貴，張維軍，曾 紅，陳 婷

（井岡山大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院，江西，吉安 343009）

制備葛根素脈沖膠囊，并對影響釋藥時滯的因素進(jìn)行研究。采用灌注法制備不溶性囊殼體，滴制法制備葛根素滴丸，濕法制粒壓片法壓制柱塞片，將其組裝成柱塞型膠囊，考察影響釋藥時滯的各種因素，評價其體外釋藥行為。柱塞片的乳糖與HPMCK15M質(zhì)量比為30%，片重為80 mg，硬度為65 N，Φ為6.0 mm，可滿足葛根素脈沖膠囊釋藥時滯5 h的設(shè)計要求。通過調(diào)節(jié)柱塞片中乳糖-HPMCK15M質(zhì)量比、片重、硬度及片莖等因素可獲得具有適當(dāng)釋藥時滯的脈沖膠囊。

葛根素；脈沖膠囊；釋藥時滯

葛根素亦稱葛根黃素，是從中藥葛根中分離提取的具有擴(kuò)冠作用的異黃酮類衍生物。存在于豆科植物葛（Willd）Ohwi及野葛B(yǎng)enth. 的根中[1]，具有退熱、鎮(zhèn)靜和使冠狀動脈血流量增加的作用，對垂體后葉素引起的急性心肌出血有保護(hù)作用。臨床上用于治療冠心病心絞痛、高血壓[2-4]等疾病，目前有片劑、滴眼液和注射劑等劑型[5]。心絞痛、高血壓發(fā)病時間不定，很多報道為凌晨發(fā)病率較高，普通口服制劑對控制該時段發(fā)病效果不佳，脈沖釋藥可以按照節(jié)律性疾病的發(fā)作規(guī)律適時地釋放藥物，從而使預(yù)防與治療更有效。

本試驗將其制備成葛根素脈沖膠囊，可達(dá)到不同時滯釋藥的目的，該劑型的開發(fā)拓展了葛根素的臨床應(yīng)用，對減少患者由于心絞痛、高血壓等疾病引起的死亡具有重要現(xiàn)實意義[6]。

1 材料與儀器

電子分析天平（FA1004N，上海天平廠）；溶出度測試儀（RC-6，上海博迅實業(yè)有限公司）；智能磁力攪拌器(HS7，上海人和科學(xué)儀器有限公司)；恒溫干燥箱（DHG-9075A，上海一恒科學(xué)儀器有限公司)；單沖壓片機(jī)(TOP，南通市華宇制藥機(jī)械有限公司）；紫外線可見分光光度計（UV-1800，上海翱藝儀器有限公司）。

葛根素原料(自制)；葛根素對照品( 中國生物制品檢定所，110752－200912 ) ;二氯甲烷(勝龍精細(xì)化工有限公司)；2號空心膠囊(上海紅星膠丸有限公司)；乙基纖維素(廣州道駿生物科技公司)；HPMCK15M(河北誼達(dá)纖維素有限公司)；乳糖(山東聊城安信化工有限公司)；其余試劑均為分析純。

2 方法

2.1 葛根素脈沖膠囊的設(shè)計

本試驗設(shè)計的脈沖膠囊結(jié)構(gòu)示意圖見圖1。加工好的葛根素滴丸置入用乙基纖維素（EC）處理好的非滲透囊殼體，用溶蝕塞塞入囊體至囊口齊平，蓋上水溶性囊帽，即得。膠囊進(jìn)入體內(nèi)后，水溶性囊帽溶解，溶蝕塞溶蝕完全后，葛根素滴丸與水接觸，迅速溶解，形成脈沖釋藥。

圖1 葛根素脈沖膠囊的設(shè)計示意圖

2.2 葛根素脈沖膠囊的制備

2.2.1 葛根素滴丸的制備

葛根素在水中微溶，口服吸收不完全，為了提高它的生物利用度，將膠囊內(nèi)容物制成葛根素滴丸，使葛根素以固體分散體的形式分散在滴丸基質(zhì)中，多次預(yù)試并驗證，確定葛根素與聚乙二醇6000（PEG6000）比例為1:5，用滴制法制備滴丸，備用。

2.2.2 不溶性膠囊殼體的制備

將EC溶解于二氯甲烷-無水乙醇（4:1，V/V）的溶劑中配成EC溶液，然后將明膠膠囊（除去囊帽）排列在膠囊板上，用上述溶液灌注膠囊體至滿，用刮板刮去多余溶液，在4℃冰箱中放置過夜，使溶液揮發(fā)24 h，即得[7-8]。

2.2.3 柱塞片的制備

將處方量的乳糖和羥丙基甲基纖維素（HPMCK15M）置入研缽，研磨混勻，用40%乙醇溶液作粘合劑制成軟材，過18目尼龍篩制粒，于60℃干燥，過同目尼龍篩整粒，再加0.75%硬脂酸鎂混勻，用Φ為6.0 mm的平?jīng)_壓片，控制片劑的硬度在設(shè)定范圍內(nèi)，即得。

2.2.4 葛根素脈沖膠囊的制備

將葛根素滴丸裝入不溶性膠囊殼體后，塞上柱塞片，蓋上明膠膠囊帽，即成。

2.3 葛根素滴丸的含量測定

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密量取葛根素乙醇標(biāo)準(zhǔn)液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL ( 0.5 m g/ m L)，分別置10 mL容量瓶中，加30%乙醇至刻度，搖勻。以乙醇作空白，在波長250 nm處測定吸收度。以葛根素濃度C 對吸收度A 進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：A = 0.0786C﹢0.0352 ( r=0. 9995)。

2.3.2 葛根素滴丸的含量測定

將葛根素滴丸研細(xì)，精密稱取30 mg，置25 mL量瓶加30%乙醇溶解，并定容至刻度，搖勻。精密量取1 mL置10 mL 量瓶中，加30%乙醇至刻度，搖勻，照分光光度法（中國藥典2015年版一部附錄ⅤA）在250 nm 的波長處測定吸收度[9]，計算葛根素的含量。

2.3.3 加樣回收率試驗

取已測知含量的供試品溶液（批號20201101，含量：0.0206 mg /mL）1 mL 6 份，分別置10 mL 量瓶，分別加入標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.1 mL，加30%乙醇至刻度，搖勻按2.3.2項方法測定葛根素含量，計算回收率。

3 結(jié)果

3.1 柱塞片的乳糖-HPMCK15M質(zhì)量比對釋藥時滯的影響

乳糖與HPMCK15M按不同質(zhì)量比混勻，按2.2.3方法制備一系列片重為80 mg、硬度為50 N、Φ為6.0 mm 的柱塞片。將柱塞片平放壓入按2.2.2方法制備的膠囊囊口，為了簡化實驗，膠囊內(nèi)放入色素代替葛根素滴丸。以色素滲出為標(biāo)準(zhǔn)，測定釋藥時滯。用溶出儀測定脈沖膠囊釋藥時滯。將膠囊放入沉降籃，按藥典2015年版第一法（籃法）要求進(jìn)行測定，轉(zhuǎn)速 100 r/min，溫度37℃，溶出介質(zhì)0.1 mol/L鹽酸溶液1000 mL，結(jié)果見圖2。

圖2 柱塞片的乳糖-HPMCK15M質(zhì)量比對釋藥時滯的影響

從圖2可看出柱塞片中的乳糖與HPMCK15M質(zhì)量比越大，釋藥時滯越小，這是由于柱塞片中的乳糖越多溶解后產(chǎn)生的毛細(xì)管越多，加速了柱塞片的溶蝕。假設(shè)患者晚上10點服藥，釋藥時滯設(shè)定為5 h，凌晨3點左右藥物釋放。時辰藥理學(xué)研究表明此時患者的血壓和心率急劇升高[9]，此時藥物釋放控制了病情，選擇乳糖-HPMCK15M質(zhì)量比為30%。

3.2 柱塞片硬度對釋藥時滯的影響

乳糖與HPMCK15M按30%、40%和50%質(zhì)量比混勻，按2.2.3方法制備一系列片重為80 mg、不同硬度、Φ為6.0 mm 的片劑，并分別按3.1方法測釋藥時滯，結(jié)果見圖3。

圖3 柱塞片硬度對釋藥時滯的影響

從圖3可看出柱塞片釋藥時滯與硬度關(guān)系不大，與乳糖和HPMCK15M質(zhì)量比有關(guān)。由于硬度較小的柱塞片易碎，在裝入膠囊時易發(fā)生磨損，所以應(yīng)提高柱塞片的硬度，以保證葛根素脈沖膠囊順利制備及后續(xù)試驗中結(jié)果的重現(xiàn)性，所以可以選用硬度 65 N。

3.3 柱塞片片重對釋藥時滯的影響

乳糖與HPMCK15M按30%、40%和50%質(zhì)量比混勻，按2.2.3方法制備一系列不同片重、硬度為65 N、Φ為6.0 mm 的片劑，并分別按3.1方法測釋藥時滯，結(jié)果見圖 4。

圖4 柱塞片片重對釋藥時滯的影響

從圖4可看出柱塞片釋藥時滯隨片重增加而延長。由于片重為80 mg以下的片厚度不夠，在保存時受擠壓等原因易導(dǎo)致碎片及裂片。同時，在向膠囊口內(nèi)按壓柱塞片時，因片側(cè)面過薄，不易保持水平壓入膠囊口。本次試驗發(fā)現(xiàn)：乳糖與HPMCK15M質(zhì)量比為30%、片重為80 mg的柱塞片即可達(dá)到試驗?zāi)康囊蟮臅r滯時間 5 h，故選擇片重為80 mg。

3.4 柱塞片片莖對釋藥時滯的影響

乳糖與HPMCK15M質(zhì)量比不變的情況下，柱塞片的片重、片莖與釋藥時滯密切相關(guān)。片重不變，片莖越大，柱塞片變薄，釋藥時滯變小；片莖越小，柱塞片變厚，釋藥時滯延長。考慮到脈沖膠囊內(nèi)容物葛根素滴丸的體積大小與柱塞片厚薄的優(yōu)缺點，通過試裝，最后確定片莖為6.0 mm，與選用的2號膠囊制備的不溶性膠囊殼體無縫對接。

綜上可知柱塞片的乳糖與HPMCK15M質(zhì)量比為30%，片重為80 mg，硬度為65 N，Φ為6.0 mm，可滿足葛根素脈沖膠囊釋藥時滯5 h的設(shè)計要求。

3.5 葛根素滴丸的含量測定結(jié)果

按2.3.3項方法試驗加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗

結(jié)果表明，6組加樣回收率試驗平均回收率為98.77%，本法具有良好的回收率。

按照2.3.2方法測定葛根素含量，結(jié)果見表2。

表2 葛根素含量測定

結(jié)果表明，每粒葛根素脈沖膠囊的葛根素含量在9～11 mg之間，符合設(shè)計要求。

4 討論

脈沖膠囊有胃漂浮型和胃不漂浮型，由于一般只有小于2 mm的食糜顆粒才可以通過幽門進(jìn)入十二指腸[10]，葛根素脈沖膠囊由于囊殼水不溶性，胃中不能崩解，在胃中滯留較長時間，藥物在胃中釋放，有利于藥物的吸收。另外患者服用此膠囊時間是睡前，躺著胃排空速率會下降[10]，相應(yīng)延長了膠囊在胃中滯留時間，所以在葛根素脈沖膠囊設(shè)計時未考慮漂浮型脈沖膠囊。

葛根素目前有注射劑、滴眼劑和片劑等劑型，片劑規(guī)格為10 mg /片，葛根素脈沖膠囊的規(guī)格也選用10 mg /粒，葛根素滴丸中藥物與基質(zhì)的比例為1:5，葛根素脈沖膠囊的內(nèi)容物為60 mg，選用2號膠囊制備不溶性膠囊殼，既滿足了柱塞片的直徑大小，又剛剛滿足了60 mg內(nèi)容物的體積容量。

實驗過程中考察了脈沖膠囊內(nèi)放入葛根素滴丸時的釋藥時滯，從開始釋藥到完全釋藥，大概需要3～5 min時間，時間較短，相對于脈沖膠囊內(nèi)放入色素時的釋藥時滯差別不大，這是由于葛根素滴丸是由 PEG6000加工而成而極易溶于水，而且一旦柱塞片溶蝕完，囊殼內(nèi)的滴丸極易從囊殼內(nèi)滾出來，從而加速了滴丸的溶解。

在不溶性膠囊殼的制備過程中，我們試驗了多種方法，如高效包液法，由于膠囊殼質(zhì)量輕，容易被吹飛，使得膠囊殼較難均勻包衣。又如包衣鍋包衣法，由于膠囊殼形狀不規(guī)則，包液在膠囊殼里外滯留時間不一致，造成膠囊殼厚薄不一致，達(dá)不到包衣效果。我們最終采用灌注法來制備不溶性膠囊體。

[1] 張瑞婷,周濤,宋瀟瀟,等.葛根的活性成分及其藥理作用研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2018, 24(1):15-17．

[2] 張瑞婷,周濤,宋瀟瀟,等.葛根的活性成分及其藥理作用研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2018,24(1):15-17.

[3] 李智穎,范紅艷. 葛根素藥理作用的研究進(jìn)展[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報,2020,40(5):375-377.

[4] 房偉.葛根藥理作用研究進(jìn)展[J].中國藥物經(jīng)濟(jì)學(xué),2017,12(11):159-160．

[5] 巫朝銀,陳桐楷,王奇. 葛根素制劑的研究進(jìn)展[J].世界中醫(yī)藥,2020,15(14):2188-2192.

[6] 王雄飛,王潔敏,孫奧琪,等. 脈沖給藥系統(tǒng)的釋藥機(jī)制及其劑型在藥劑學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 中國新藥雜志,2016,25(6):664-667.

[7] 李菲,王建筑,畢研平,等. 尼莫地平柱塞型脈沖釋藥膠囊的制備[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2016,36(04):296-300.

[8] 李鑫,王曉揚(yáng),武文強(qiáng),等.復(fù)方丹參脈沖膠囊處方篩選和制備工藝研究[J].中國中藥雜志,2013,38(24):4309-4313.

[9] 劉艷玲,許波,陳峻,等.紫外分光光度法測定雙葛膠囊中葛根總黃酮的含量[J].中國民族民間醫(yī)藥,2012,12(2):53,57.

[10] 方亮.藥劑學(xué)[M].8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2016:86.

PREPARATION OF PUERARIN PULSE CAPSULES AND THE FACTORS AFFECTING DRUG RELEASE DELAY

*ZHOU Qiu-gui, ZHANG Wei-jun, ZENG Hong，CHEN Ting

（School of Traditional Chinese Medicine, Jinggangshan University, Ji'an, Jiangxi 343009, China）

: To prepare puerarin pulse capsules and study the factors that affect the release delay.: The insoluble capsules were prepared by infusion method, puerarin dripping pills were prepared by dripping method, plunger tablets were compressed by wet granulation and tableting method, and assembled into plunger-type capsules. Various factors affecting drug release time lag were investigated and evaluated.: The mass ratio of lactose to HPMCK15M of the plunger tablet was 30%, the tablet weight was 80 mg, the hardness was 65 N, and the Φ was 6.0 mm, which could meet the design requirements of the puerarin pulse capsule with a drug release delay of 5 hours.: By adjusting the prescription composition and tablet weight of plunger tablets, pulsed capsules with appropriate release time lag can be obtained.

puerarin; pulse capsule; drug release delay

168085（2021）06-0097-04

R944.9

A

10.3669/j.issn.1674-8085.2021.06.018

2020-11-26；

2021-01-19

吉安市科技支撐項目(吉市科計字[2020]20號8)

*周秋貴(1968-)，男，江西泰和人，副教授，主要從事藥物制劑研究(E -mail:2540401090@qq.com)；

張維軍(1997-)，男，甘肅定西人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專業(yè)2017級本科生(E -mail:2010603173@qq.com)；

曾 紅(1982-)，女，湖南益陽人，副教授，主要從事藥物合成工藝的研究(E -mail66562768:@qq.com)；

陳 婷(1988-)，女，江西吉安人，實驗員，主要從事藥物分析研究(E -mail: 764042609@qq.com).