保存溫度、濕度和時間對鵪鶉種蛋孵化成績的影響

史雪萍，呂祥娟，周小桐，畢慧娟，沈華躍，王述柏*

（1.青島農業(yè)大學動物科技學院，山東青島 266109；2.煙臺大地牧業(yè)股份有限公司，山東煙臺 265100）

我國鵪鶉養(yǎng)殖歷史悠久，多年來飼養(yǎng)量約占世界總量20%[1-2]。鵪鶉生長快、性成熟早（40～45 日齡）、繁殖力強（年產蛋量300 個以上），飼料報酬和養(yǎng)殖效益高[1]。鶉蛋、肉營養(yǎng)豐富、藥用價值高，在我國素有“動物人參”之美譽[3]。目前雞和水禽在我國的養(yǎng)殖規(guī)模巨大，面臨產能過剩問題，因此鵪鶉養(yǎng)殖在調整畜牧業(yè)產業(yè)結構、豐富人們生活等方面具有重要意義。野生鵪鶉經人工馴化后失去了就巢性，人工孵化成為現(xiàn)代鵪鶉養(yǎng)殖的重要生產環(huán)節(jié)，但迄今有關鵪鶉的孵化技術研究較少。入孵前種蛋的管理是孵化工作流程中的關鍵環(huán)節(jié)之一，種蛋管理期間應提供合適的儲存條件，保持胚胎不受凍、不發(fā)育，保持入孵前種蛋理化性質的穩(wěn)定以滿足胚胎發(fā)育的需要[4]。保存條件是否適宜直接影響種蛋的質量及胚胎活力，進而影響孵化成績。目前我國有關鵪鶉種蛋的適宜保存條件鮮見報道。本試驗旨在研究鵪鶉種蛋的適宜保存溫度、濕度、時間及胚胎發(fā)育的臨界溫度，為生產中對鵪鶉種蛋進行合理保存從而提高孵化成績提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 鵪鶉種蛋為3 月齡朝鮮龍城系鵪鶉所產新鮮種蛋（產后1 d），購自濟寧嘉祥縣某鵪鶉養(yǎng)殖廠。

1.2 試驗設備及儀器 孵化機（山東省德州科裕孵化設備有限公司，CFS）、出雛機（德州市德城區(qū)新源孵化設備廠，XYB-2）、人工氣候培養(yǎng)箱（廣東省醫(yī)療器械廠，LRH-250-GS Ⅱ）、電子天平（奧豪斯儀器上海有限公司，NV222ZH，精確度0.01 g）、數(shù)顯游標卡尺（上海九量五金工具有限公司，150，精確度0.01mm）等。

1.3 試驗設計

1.3.1 保存溫度對孵化成績的影響 選擇蛋重10～13 g的種蛋2 400 枚，按照蛋重均等原則分為6 組，每組設8 個重復，每個重復50 枚蛋，蛋重均值（11.44±0.11）g，組間差異不顯著。保存于人工氣候培養(yǎng)箱內。1～6 組的保存溫度分別為5、10、15、20、25、30℃，各組保存濕度均為65%，保存期均為5 d。

孵化操作程序：種蛋入孵前，置孵化室內預熱12 h，孵化室溫度23～25℃、相對濕度60%～70%；預熱后上蛋，采用福爾馬林熏蒸法（28 mL/m3福爾馬林、14 g/m3高錳酸鉀）消毒20 min。采用整批入孵變溫孵化法孵化種蛋。

孵化參數(shù)設定：孵化溫度1～3 d 為38.5℃，4～14 d為38℃，15～17 d 為37.5℃；孵化濕度1～4 d 為65%，5～10 d 為60%，11～17 d 為70%；孵化開始后，每隔2 h翻蛋1 次，翻蛋角度90°，15 d 落盤后停止翻蛋。

1.3.2 保存濕度對孵化成績的影響 選擇蛋重10～13 g的種蛋2 000 枚，按照蛋重均等原則分為5 個組，每組設8 個重復，每個重復50 枚，蛋重均值（11.45±0.12）g，組間差異不顯著。保存于人工氣候培養(yǎng)箱內。1～5 組的保存濕度分別為40%、50%、60%、70%、80%，保存溫度均為18℃，保存期均為 5 d。孵化操作程序和孵化參數(shù)設定同1.3.1。

1.3.3 保存時間對孵化成績的影響 選擇蛋重10～13 g的種蛋1 200 枚，按照蛋重均等原則分為3 個組，每組設8 個重復，每個重復50 枚，蛋重均值（10.90±0.17）g，組間差異不顯著。保存于人工氣候培養(yǎng)箱內。1～3 組的保存時間分別為3、7、11 d，保存溫度均為15℃，相對濕度均為70%。孵化操作程序和孵化參數(shù)設定同1.3.1。

1.4 檢測指標與方法

1.4.1 出雛期的觀察與處理 種蛋落盤后，每日觀察每組每個重復的出殼時間、雛鵪鶉的精神狀態(tài)、外貌有無畸形或缺陷，記錄健康雛鶉數(shù)、殘雛數(shù)；對每組每個重復的出殼鵪鶉逐只稱體重，計算每個重復的平均體重；未出殼的胚蛋逐只打開檢查，記錄每個重復的死亡胚胎數(shù)、未受精蛋數(shù)和受精蛋數(shù)量。

1.4.2 孵化成績指標計算方法 根據(jù)孵化記錄，匯總每組每個重復的受精蛋數(shù)、無精蛋數(shù)、死胚數(shù)、出殼鶉只數(shù)、健康鶉只數(shù)、殘雛數(shù)，計算種蛋受精率、受精蛋孵化率、入孵蛋孵化率、健雛率、每個重復平均初生重、初生重占蛋重百分比，各指標計算公式：

受精率=受精蛋數(shù)/入孵蛋數(shù)×100%

受精蛋孵化率=出殼雛鶉數(shù)/受精蛋數(shù)×100%

入孵蛋孵化率=出殼雛鶉數(shù)/入孵蛋數(shù)×100%

健雛率=健康雛鶉數(shù)/出殼雛鶉數(shù)×100%

每重復平均初生重=∑每重復出殼鶉體重（g）/每重復雛鶉只數(shù)

初生重占蛋重百分比=初生重/蛋重×100%

1.5 胚胎發(fā)育臨界溫度研究

1.5.1 鵪鶉種蛋胚盤發(fā)育隨溫度變化的初步觀察 選擇蛋重10～13 g 的種蛋440 枚，按照蛋重均等原則分為11 個組，每組40 枚，每重復1 枚，每天觀測8 枚，連續(xù)觀察測量5 d。種蛋先采用福爾馬林熏蒸消毒（方法同1.3.1），然后開始觀察在不同溫度下的胚胎發(fā)育情況。1～11 組溫度處理分別為20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0℃。保存期間各組相對濕度均設為65%。每天每組隨機取8 枚種蛋采用游標卡尺測量胚盤直徑，每個胚盤均測量3 個不同位點，結果取平均值。另取8 枚種蛋，于試驗開始前（0 d）檢測每枚種蛋胚盤直徑，作為對照組。初步確定可引起胚胎開始發(fā)育的溫度。

1.5.2 鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育臨界溫度的精確測定 根據(jù)1.5.1 的觀察結果初步確定能使胚胎開始發(fā)育的大致溫度為21～23℃，在此范圍內設置7 個溫度梯度水平，進一步觀察不同溫度下的胚盤發(fā)育情況。選擇蛋重10～13 g的種蛋280 枚，按照蛋重均等原則分為7 個組，每組40 枚，每重復1 枚，每天觀測8 枚，連續(xù)觀察測量5 d。1～7 組溫度分別為21.8、22.0、22.2、22.4、22.6、22.8、23.0℃。保存期間各組相對濕度均為65%。胚盤直徑測量方法同1.5.1。另取8 枚種蛋，于試驗開始前（0 d）檢測每枚種蛋胚盤直徑，作為對照組。

1.5.3 結果判定 比較分析同一處理溫度隨時間延長（0～5 d）胚盤直徑的變化，若胚盤直徑開始顯著增大即為能引起胚胎發(fā)育的溫度（也稱臨界溫度）。

1.6 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用Excel 軟件進行初步整理，采用SPSS17.0 軟件One-Way ANOVA 對數(shù)據(jù)進行方差分析，采用LSD 法進行組間差異顯著性檢驗，結果用平均值± 標準差表示。P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 保存溫度對鵪鶉種蛋孵化成績的影響 由表1 可知，各組蛋重和受精率無顯著差異。15℃組入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率最高，且15、20、25℃組顯著高于5、10、30℃組，10℃組顯著高于30℃組。15℃組健雛率和初生重最高，但組間均無顯著差異，初生重占蛋重百分比各組間亦無顯著差異。

種蛋保存溫度與受精蛋孵化率的二次回歸分析方程為y=-0.0321x2+1.1039x+81.587（R2=0.931 7）。極 值計算結果：保存溫度17.2℃，受精蛋孵化率可達到最佳值91.08%。種蛋保存溫度與入孵蛋孵化率的回歸分析方程為y=-0.048x2+1.6253x+70.973（R2=0.915 5）。極值計算結果：保存溫度16.9℃，入孵蛋孵化率可達到最佳值84.73%。

2.2 保存濕度對鵪鶉種蛋孵化成績的影響 由表2 可知，各組蛋重和受精率無顯著差異。70%組入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率最高，顯著高于40%、80% 組。各組間的健雛率、初生重、初生重占蛋重百分比均差異不顯著。

種蛋保存濕度與受精蛋孵化率的回歸分析方程為y=-0.003x2+0.3608x+81.122（R2=0.545 9）。極值計算結果：保存濕度為60.13%，受精蛋孵化率可達到最佳值為91.97%。種蛋保存濕度與入孵蛋孵化率的回歸分析方程為y=-0.005x2+0.6505x+64.081（R2=0.817 2）。極值計算結果：保存濕度為65.05%，入孵蛋孵化率可達到最佳值為85.24% 。

2.3 保存時間對鵪鶉種蛋孵化成績的影響 由表3 可知，各組蛋重和受精率無顯著差異。保存3 d 組入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率最高，3、7 d 組極顯著高于11 d 組。各組健雛率、初生重和初生重占蛋重百分比無顯著差異。

種蛋保存時間與受精蛋孵化率的線性回歸分析方程為y=-0.9663x+92.004（R2=0.920 7），與入孵蛋孵化率的線性回歸分析方程為y=-0.9875x+84.922（R2=0.945）?？梢?，種蛋保存時間與受精蛋孵化率、入孵蛋孵化率呈負相關關系。

2.4 鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度檢測結果 由表4 可知，隨保存時間延長（0～5 d），20～22℃處理組的胚盤直徑無顯著變化，23℃處理組的胚盤直徑呈逐漸增大趨勢，第3～5 天顯著高于第0～2 天；24℃處理組的胚盤直徑呈明顯增大趨勢，第1～5 天顯著高于第0 天，第4～5 天極顯著高于第0～2 天；25～30℃處理組的胚盤直徑增大趨勢更加明顯，第1～5 天極顯著高于第0 天。

表1 保存溫度對鵪鶉種蛋孵化成績的影響

表2 保存濕度對鵪鶉種蛋孵化成績的影響

表3 保存時間對鵪鶉種蛋孵化成績的影響

表4 20～30℃保存種蛋的胚盤直徑隨保存時間延長的變化 mm

表5 21.8～23℃保存的種蛋隨保存時間延長胚盤直徑的變化 mm

由表5 可知，隨保存時間延長（0～5 d），21.8～22.8℃處理組的胚盤直徑無顯著變化，23.0℃處理組的胚盤直徑呈明顯增大趨勢，第3、4、5 天極顯著高于第0、1、2 天。

3 討 論

3.1 保存溫度對鵪鶉種蛋孵化成績的影響 禽蛋保存期間溫度的設置原則是使胚胎發(fā)育暫停，同時保持胚胎和種蛋品質處于最佳狀態(tài)[5]。種蛋長期保存時，低溫環(huán)境可抑制微生物生長繁殖、延緩濃蛋白變稀[6]。岳根華等[7]研究表明，朝鮮鵪鶉種蛋在低溫（2～10℃、15～26℃）環(huán)境下保存6 d，孵化率無明顯下降，在高溫（28～37.5℃）環(huán)境下保存時間不宜超過3 d，否則孵化率顯著下降。本研究結果亦表明，鵪鶉種蛋保存溫度在15～25℃的受精蛋孵化率和入孵蛋孵化率顯著優(yōu)于低溫（5、10℃）和高溫（30℃）保存，回歸分析結果顯示鵪鶉種蛋保存溫度在16.9～17.2℃可獲得最高孵化率。

3.2 保存濕度對鵪鶉種蛋孵化成績的影響 種蛋保存期間，蛋內水分會通過蛋殼氣孔蒸發(fā)散失，環(huán)境濕度低則失水速度快，種蛋失水過多對胚胎發(fā)育不利[5]，反之，濕度過高（大于80%）利于細菌及霉菌的生長，影響種蛋質量[8]。有關鵪鶉種蛋保存期間環(huán)境濕度對種蛋孵化成績的影響研究報道較少。對其他禽類的研究顯示，珍珠雞種蛋保存期適宜濕度范圍為70%～75%[9]，雞種蛋保存期適宜濕度范圍為75%～85%[10]。楊寧[11]認為禽蛋保存期間適宜濕度為75%～80%。本試驗結果表明，鵪鶉種蛋保存期間相對濕度70% 組孵化率最高，低濕度（40%）組和高濕度（80%）組孵化率均低，回歸分析結果顯示獲得最優(yōu)孵化率的適宜保存濕度為65%?？梢姡r鵪鶉種蛋保存期間的適宜相對濕度為65%～70%，低于上述文獻報道的雞等其他禽類的適宜值，這可能與鵪鶉種蛋蛋殼和蛋殼膜致密性強不易失水，從而能耐受低濕度環(huán)境有關。

3.3 保存時間對鵪鶉種蛋孵化成績的影響 有關保存時間對鵪鶉種蛋孵化成績的影響研究報道較少。李延杰[12]認為鵪鶉種蛋存放時間夏季不超過5 d，春秋季不超過7 d，冬季不超過10 d。對雞蛋的研究顯示，AA+肉種雞種蛋保存時間最好不超過10 d[13]，否則孵化率會極顯著下降；保存溫度17～18℃的雞種蛋，保存時間以小于5 d 為宜[14]。賈汝敏等[15]研究表明，保存時間長的種蛋，蛋殼外表面的膠護膜被破壞，使蛋內水分蒸發(fā)和微生物侵入造成種蛋孵化率降低。本試驗結果表明，鵪鶉種蛋保存時間與孵化率呈負相關，在15℃、相對濕度70%的保存條件下，保存3～7 d 可獲得較高孵化率。可見，鵪鶉種蛋的適宜保存時間與雞蛋基本一致。

3.4 鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度 種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度是確定其保存溫度的重要依據(jù)，種蛋保存期間溫度不宜高于胚胎發(fā)育臨界溫度[16]。溫度達到或超過胚胎發(fā)育的臨界溫度胚胎即開始緩慢發(fā)育，溫度低于臨界溫度胚胎發(fā)育則被抑制。禽類胚胎位于蛋黃膜下面，易于觀察，胚胎開始發(fā)育的眼觀變化特征為胚盤直徑增大。鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度未見報道。關于雞胚發(fā)育的臨界溫度報道結果不盡一致，付興周[16]認為是23.9℃，何曉芳等[8]認為是26～27℃。本試驗結果表明，鵪鶉種蛋的最低發(fā)育溫度為23℃，23.0℃以下的胚胎未見胚盤顯著增長，因此確定鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度為23.0℃，低于雞胚發(fā)育臨界溫度，這可能與鵪鶉蛋蛋重小、蛋殼薄、熱量易于傳遞入蛋內有關，確切機理有待進一步研究。

4 結 論

在本試驗條件下，鵪鶉種蛋的最佳保存溫度為15℃，適宜范圍為15～20℃；最佳保存濕度為70%，適宜范圍為65%～70%；適宜保存時間為3～7 d；胚胎發(fā)育的臨界溫度為23℃。