MTHFR C667T基因多態(tài)性對(duì)漢族肥胖患者高尿酸血癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的影響*

夏麗芳，何 倩，王 鑫，宋茜茜，張?jiān)露?，李志紅△

(1.河北省保定市第一中心醫(yī)院內(nèi)分泌二科 017000;2.河北省蠡縣醫(yī)院內(nèi)三科 071400;3.河北省保定市第一中心醫(yī)院內(nèi)分泌科 017000;4.河北省保定市第一中心醫(yī)院康復(fù)二科 017000)

高尿酸血癥(hyperuricemina，HUA)是嘌呤代謝障礙引起的代謝性疾病。調(diào)查顯示，我國(guó)不同地區(qū)HUA患病率為5.0%～23.5%，預(yù)計(jì)在未來(lái)10～20年，HUA將成為僅次于糖尿病的第二大內(nèi)分泌代謝性疾病，因此對(duì)HUA進(jìn)行深入研究意義重大[1]。亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR)定位于人類(lèi)第1染色體短臂，是葉酸代謝中一個(gè)重要的酶，MTHFR C667T基因位點(diǎn)突變可降低葉酸代謝關(guān)鍵酶的活性[2]。趙欣等[3]報(bào)道，葉酸可通過(guò)上調(diào)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ的表達(dá)，促進(jìn)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化，影響肥胖的發(fā)生。且一項(xiàng)大型研究[4]發(fā)現(xiàn)，肥胖患者發(fā)生HUA的概率較高。故推測(cè)MTHFR C667T基因多態(tài)性可能與肥胖患者發(fā)生HUA有關(guān)，但目前關(guān)于三者間關(guān)系的報(bào)道較少。本研究選取136例HUA患者，研究MTHFR C667T基因多態(tài)性對(duì)肥胖患者HUA發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年8月保定市第一中心醫(yī)院收治的136例HUA患者(HUA組)及體檢中心150例健康人群(對(duì)照組)作為研究對(duì)象。HUA組均符合HUA的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：連續(xù)2次空腹血尿酸水平檢測(cè)，男性大于420 μmol/L，女性大于360 μmol/L，且均為漢族人群，相互間不存在血緣關(guān)系。排除合并造血系統(tǒng)疾病者，由藥物、腫瘤、銀屑病、腎臟疾病、肝臟疾病及飲食等因素導(dǎo)致的繼發(fā)性HUA患者，妊娠期患者，合并精神疾病者，近期曾服用降尿酸藥物者。本研究獲得保定市第一中心醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，所有患者對(duì)本研究均知情同意，并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1資料收集

收集研究對(duì)象性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、空腹血糖(GLU)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)等資料。

1.2.2MTHFR C667T基因型檢測(cè)

使用PCR-芯片雜交法MTHFRC667T基因檢測(cè)試劑盒，按杭州開(kāi)泰生物技術(shù)有限公司血液基因組DNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)，提取和純化DNA。PCR擴(kuò)增，PCR反應(yīng)條件：94 ℃ 5 min，94 ℃ 25 s，56 ℃ 25 s，72 ℃ 25 s，共35個(gè)循環(huán)，最后72 ℃后延伸5 min，雜交顯色。反應(yīng)結(jié)束后取出芯片，放入生物芯片識(shí)讀儀(上海百傲科技有限公司，BE-3.0)中，用Baio Array Doctor V2.0軟件進(jìn)行圖像掃描與數(shù)據(jù)分析，輸出MTHFR 3種基因型：667CC、667CT、667TT。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)比較兩組年齡、性別、舒張壓、飲酒史、吸煙史等一般資料；(2)比較兩組MTHFR C667T基因型頻率及等位基因頻率分布；(3)分析影響HUA發(fā)生的因素；(4)比較兩組不同BMI患者分布；(5)分析MTHFR C667T基因型與肥胖對(duì)HUA發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的交互作用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料比較

兩組年齡、性別、舒張壓、飲酒史、吸煙史、GLU、TC、TG、BUN、Cr、合并糖尿病、心臟病、高血壓比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HUA組BMI、收縮壓、高脂血癥患者占比較對(duì)照組高(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1兩組一般資料比較

續(xù)表1兩組一般資料比較

2.2 兩組MTHFR C667T基因型頻率及等位基因頻率分布比較

對(duì)照組MTHFR C667T位點(diǎn)基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗(yàn)(P=0.80)。HUA組TT基因型頻率、T等位基因頻率均較對(duì)照組高(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 比較兩組MTHFR C667T基因型頻率 及等位基因頻率分布[n(%)]

2.3 HUA發(fā)生的影響因素分析

以是否發(fā)生HUA為因變量，以BMI、收縮壓、高脂血癥等為自變量進(jìn)行多因素分析發(fā)現(xiàn)，高BMI、高收縮壓、高脂血癥、基因型TT、等位基因T是HUA發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 HUA發(fā)生影響因素的logistic多元回歸分析

2.4 兩組不同BMI患者分布比較

根據(jù)《中國(guó)成人超重和肥胖癥預(yù)防控制指南》[7]中BMI≥28 kg/m2為肥胖，HUA組BMI≥28 kg/m2患者占比高于對(duì)照組(P<0.05),見(jiàn)表4。

表4 比較兩組不同體質(zhì)量指數(shù)患者分布[n(%)]

2.5 MTHFR C667T基因型與肥胖對(duì)HUA發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的交互作用

BMI≥28 kg/m2時(shí)，TT型基因在組間分布比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；交互作用分析顯示，S=4.464，RERI=3.040，AP=0.406，見(jiàn)表5。

表5 MTHFR C667T基因型與肥胖對(duì)HUA發(fā)生 風(fēng)險(xiǎn)的交互作用

3 討 論

隨著我國(guó)人民生活水平的不斷提高，HUA發(fā)病率逐漸遞增，并表現(xiàn)出年輕化趨勢(shì)。流行病學(xué)調(diào)查顯示，90%的原發(fā)性高血壓患者合并HUA，血尿酸水平每增高59.5 μmol/L，高血壓發(fā)病相對(duì)危險(xiǎn)增高25%，且HUA亦可增加腦卒中、冠心病等發(fā)病與死亡的風(fēng)險(xiǎn)[8]。但HUA發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，陳曉波等[9]、林曦陽(yáng)等[10]研究指出，HUA與高血壓、高血脂有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，除高收縮壓、高脂血癥外，高BMI、TT基因型、T等位基因亦是HUA發(fā)生的危險(xiǎn)因素，提示肥胖及MTHFR C667T TT基因型、T等位基因可影響HUA的發(fā)生。

3.1 肥胖與HUA的關(guān)系

超重、肥胖是當(dāng)今社會(huì)常見(jiàn)的一種現(xiàn)象，可引起代謝綜合征。胡夢(mèng)妍等[11]報(bào)道，與健康人群相比，肥胖患者HUA發(fā)生率較高。本研究結(jié)果顯示，HUA組BMI較對(duì)照組高(P<0.05)，提示肥胖可能與HUA的發(fā)生有關(guān)。朱冰坡等[12]研究共納入1 363例老年體檢人群，進(jìn)行單因素與二元logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)在校正年齡后，高脂血癥、肥胖是HUA的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與本研究結(jié)論一致。尿酸在細(xì)胞外的水平取決于尿酸生成的速度和經(jīng)腎臟排出之間的平衡關(guān)系，排泄減少和(或)生成增加，或生成大于排泄，均可出現(xiàn)HUA。從這個(gè)角度講，肥胖導(dǎo)致HUA的機(jī)制可能為：(1)引起胰島素抵抗，增加腎小管近曲小管對(duì)尿酸/Na+的重吸收；(2)可通過(guò)激活腎素-血管緊張素系統(tǒng)，導(dǎo)致腎髓質(zhì)缺血，乳酸增加，競(jìng)爭(zhēng)性抑制尿酸的排泄；(3)降低近端小管泌氨功能，造成尿液酸化，影響尿酸的排泄；(4)可促進(jìn)黃嘌呤氧化酶的生成，增加尿酸合成量[13-14]。

3.2 MTHFR C667T基因多態(tài)性與HUA的關(guān)系

MTHFR是一種重要的一碳單位代謝酶，至今已發(fā)現(xiàn)近65個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，其中C667T是最為常見(jiàn)的突變位點(diǎn)之一[15-16]。KIMI 等[17]研究發(fā)現(xiàn)，血清尿酸水平較高者TT基因型檢出率較高，CC、TT、CT基因型患者血清尿酸水平具有明顯差異，MTHFR C667T基因多態(tài)性可能與HUA有關(guān)。日本的一項(xiàng)研究納入了793例49歲以上人群，發(fā)現(xiàn)血尿酸水平大于或等于7 mg/dL者TT基因型檢出率高于尿酸水平低于7 mg/dL者，并得出HUA與MTHFR 677T等位基因攜帶者之間存在顯著相關(guān)性的結(jié)論[18]。一項(xiàng)Meta分析[19]共納入1 470例患者，進(jìn)行異質(zhì)性測(cè)試后發(fā)現(xiàn)，MTHFR C677T多態(tài)性是HUA的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，支持本研究結(jié)論。MTHFR基因第4外顯子667位點(diǎn)上存在C等位基因和T等位基因多態(tài)現(xiàn)象，分為野生型(CC型)、雜合型突變(CT型)和純合型突變(TT型)3種，C與T對(duì)應(yīng)氨基酸殘基分別為丙氨酸和纈氨酸，纈氨酸取代丙氨酸后使MTHFR穩(wěn)定性下降，直接影響MTHFR的活性和耐熱性，其中CT型、TT型人群的酶活性分別降低為CC型的65%和30%，導(dǎo)致由S-腺苷-同型半胱氨酸產(chǎn)生的腺苷優(yōu)先滲入尿酸前體池，使同型半胱氨酸和尿酸的合成相關(guān)聯(lián)，增加了尿酸的來(lái)源，且TT型個(gè)體常出現(xiàn)全身血管病變、腎血管動(dòng)脈粥樣硬化等并發(fā)癥，降低了腎臟對(duì)尿酸的清除能力，從而誘發(fā)HUA[20-21]。

3.3 MTHFR C667T基因多態(tài)性對(duì)肥胖患者高尿酸血癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的影響

MAHESH 等[22]研究顯示，MTHFR C667T基因多態(tài)性與較低的高密度脂蛋白(HDL)水平有關(guān)，而HDL主要作用是促進(jìn)體內(nèi)膽固醇逆化轉(zhuǎn)運(yùn)，防止外周組織中過(guò)多脂質(zhì)堆積?？梢?jiàn)MTHFR C667T基因多態(tài)性與肥胖有關(guān)，結(jié)合上述分析，推測(cè)MTHFR C667T基因多態(tài)性與肥胖對(duì)HUA的發(fā)生可能存在交互作用。本研究通過(guò)分層分析發(fā)現(xiàn)，BMI≥28 kg/m2時(shí)，TT型基因在組間分布比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，交互作用分析顯示，RERI=3.040，AP=0.406，S=4.464，直接證實(shí)兩種因素在HUA的發(fā)生中存在正向交互作用，且在HUA發(fā)病總效應(yīng)中占比為40.60%。但本研究受客觀情況限制，納入樣本量較小，可能造成數(shù)據(jù)的偏倚，且由于本地區(qū)漢族人群較多，故納入漢族人群作為研究對(duì)象，而研究結(jié)果是否適用于其他民族的人群，仍需后續(xù)研究進(jìn)一步完善、驗(yàn)證。

綜上所述，MTHFR C667T基因TT型純合子突變攜帶增加HUA的風(fēng)險(xiǎn)，MTHFR C667T基因多態(tài)性、肥胖在HUA的發(fā)生中存在正向交互作用。