2019—2020年酒泉市豬肉樣品豬鏈球菌污染情況調(diào)查及耐藥性分析

夏冰芝

（酒泉職業(yè)技術(shù)學院，甘肅 酒泉 735000）

豬肉消費一直是我國傳統(tǒng)，但生豬在飼養(yǎng)、屠宰、分割、運輸和售賣等環(huán)節(jié)易受到病原菌污染，其中運輸和售賣環(huán)節(jié)受外界致病菌污染情況相對嚴重，且部分致病菌可感染人，對消費者健康產(chǎn)生威脅[1]。豬鏈球菌為典型的機會致病菌，且該病原在豬場、菜市場和飯店等公眾環(huán)境中廣泛存在，豬鏈球菌存在多種血清型，部分血清型（如2型）可感染人。豬鏈球菌可通過黏膜或消化道等途徑感染宿主，導致腦膜炎和敗血癥等，甚至是死亡[2]。近年來，人感染豬鏈球菌病的案例頻繁發(fā)生，其中大部分患者都有豬肉接觸、食用或屠宰生豬時受傷等情況發(fā)生[3-5]，提示污染豬鏈球菌的豬肉對從事生豬養(yǎng)殖、屠宰、售賣及消費豬肉的人員健康威脅巨大。

彭少靜等對重慶地區(qū)豬肉樣品豬鏈球菌污染情況進行調(diào)查，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)該地區(qū)豬肉樣品中鏈球菌平均檢出率達24.5%[2]；景小金等調(diào)查結(jié)果顯示，貴州省鮮豬肉鏈球菌污染率為10.7%（12/112）[6]，提示我國市售豬肉豬鏈球菌污染情況嚴重。本研究于2019—2020年從酒泉市部分地區(qū)采集新鮮豬肉樣品300份，調(diào)查樣品中鏈球菌污染情況，并隨機挑選部分菌株進行藥敏試驗，旨在了解該地區(qū)市售豬肉鏈球菌污染情況及耐藥情況，為采取相應防控措施提供科學借鑒。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

本研究于2019年6—10月和2020年6—9月從酒泉市肅州區(qū)、玉門市和金塔縣部分地區(qū)收集市售新鮮豬肉樣品共300份，其中2019年和2020年分別收集樣品194份和106份；從當?shù)赝涝讏觥⒊?、菜市場和飯店分別采集樣品84份、103份、59份和54份。每份樣品重約30 g，裝入潔凈封口袋內(nèi)，標記后低溫送至酒泉職業(yè)技術(shù)學院保存，檢測。

1.2 樣品中鏈球菌的分離與鑒定

用接種環(huán)蘸取少量樣品表面和深處組織液，在鮮血瓊脂培養(yǎng)基表面進行平板劃線，37 ℃環(huán)境下培養(yǎng)18 h，挑取單一、表面光滑、濕潤且透明菌落進行革蘭氏染色鑒定，根據(jù)菌落形態(tài)學特征對其進行鑒定，確定樣品中鏈球菌檢出情況。

1.3 細菌藥敏試驗

采用紙片擴散法對部分獲得的鏈球菌進行藥敏試驗，將單一鏈球菌菌株進行擴菌培養(yǎng)，其后將菌液稀釋至1×107CFU/mL，均勻涂布在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面，在每個平皿上放4個藥敏紙片，37 ℃培養(yǎng)24 h后，測定不同藥敏紙片的抑菌圈直徑。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 酒泉市市售豬肉鏈球菌污染情況調(diào)查結(jié)果

對酒泉市部分地區(qū)市售豬肉鏈球菌污染情況進行調(diào)查，300份樣品中共84份檢測含有豬鏈球菌污染，平均檢出率為28.00%。按樣品地區(qū)來源進行歸納，玉門市和金塔縣來源樣品檢出率較肅州區(qū)稍高，分別為33.70%、32.14%和20.97%；受新冠疫情影響，本研究于2019年6—10月和2020年6—9月采集樣品數(shù)量分別為194份和106份，豬鏈球菌平均檢出率分別為31.44%和21.70%。其結(jié)果詳見表1。

表1 酒泉市市售豬肉鏈球菌污染情況調(diào)查結(jié)果

2.2 不同來源豬肉樣品鏈球菌污染情況調(diào)查結(jié)果

為評估市售豬肉在不同環(huán)境下鏈球菌污染情況差異，本次研究分別從當?shù)赝涝讏?、超市、菜市場和飯店收集新鮮豬肉樣品84份、103份、59份和54份，檢測結(jié)果表明，飯店來源豬肉樣品鏈球菌檢出率最高，為44.44%；屠宰場來源樣品檢出率最低，為11.90%；而超市和菜市場來源樣品檢出率分別為26.21%和38.98%，詳見表2。

表2 不同來源豬肉樣品鏈球菌污染情況調(diào)查結(jié)果

2.3 分離菌株耐藥性分析結(jié)果

為初步分析酒泉市市售豬肉鏈球菌耐藥情況，本研究從分離獲得的84株鏈球菌分離株中隨機挑選21株，調(diào)查這些菌株對阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢拉定、頭孢唑林、慶大霉素、四環(huán)素、鏈霉素、大觀霉素、復方新諾明、磺胺甲氧嘧啶、環(huán)丙沙星、氯霉素和呋喃唑酮共14種常見抗生素的耐藥情況。結(jié)果如表3所示，隨機挑選的21株鏈球菌分離株對復方新諾明、磺胺甲氧嘧啶、慶大霉素和氯霉素產(chǎn)生耐藥性比例均高于70.00%，其中對復方新諾明的耐藥率達100.00%；對頭孢類藥物（如頭孢噻肟、頭孢拉定等）、氨芐西林、阿莫西林和呋喃唑酮等抗生素耐藥率較低，提示此類藥物可以作為治療當?shù)刎i鏈球菌病的首選藥物。

表3 鏈球菌分離株耐藥性檢測結(jié)果

3 討論

本研究對酒泉市部分地區(qū)市售豬肉鏈球菌污染情況進行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)市售豬肉樣品鏈球菌平均檢出率達28.00%（84/300），其檢出率高于2016年重慶地區(qū)調(diào)查結(jié)果（24.5%，132/538）[2]，同時也提示酒泉市市售豬肉鏈球菌污染情況十分嚴重。進一步分析結(jié)果顯示，2019年和2020年被調(diào)查樣品鏈球菌污染率分別為31.44%和21.70%。筆者猜測受新冠疫情影響，國民對肉制品微生物污染問題逐漸重視，同時也提高了豬肉制品衛(wèi)生管理水平和消毒頻率，這在一定程度上降低了豬肉鏈球菌污染率。此外，不同來源豬肉樣品鏈球菌污染情況存在差異，其中飯店來源樣品檢出率最高（44.44%），超市和菜市場來源樣品檢出率居中，而屠宰場來源樣品檢出率最低（11.90%），提示豬肉樣品在加工和售賣過程中容易受到細菌性病原污染，說明豬肉在此類工作中應該注意消毒或衛(wèi)生管理水平等。

此外，本次研究分離的豬鏈球菌菌株對不同抗生素耐藥性存在較大差異，其中對復方新諾明、磺胺甲氧嘧啶和慶大霉素等常見抗生素具有較強的耐藥性，可能是此類藥物在豬場十分常見，導致耐藥株出現(xiàn)幾率較大；但對阿莫西林、氨芐西林和頭孢類藥物較為敏感，提示未來豬場鏈球菌病的防控可以選擇此類藥物，但需注意穿梭用藥，以防止耐藥菌的出現(xiàn)。