IL-6基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥遺傳易感性關(guān)系研究

黃海，宋作林，陸習(xí)銀，曾茜

（南方科技大學(xué)醫(yī)院，廣東 深圳）

0 引言

子宮內(nèi)膜異位癥是一種慢性炎癥性婦科疾病[1，2]。子宮內(nèi)膜異位癥的病因尚不完全清楚，可能與多種環(huán)境和遺傳因素有關(guān)。先前的研究表明，血清IL-6水平升高與子宮內(nèi)膜異位癥有關(guān)，本研究旨探討IL-6基因中存在多態(tài)性改變與子宮內(nèi)膜異位癥遺傳易感性的關(guān)系[3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月1日至2019年6月30日在本院就診經(jīng)腹腔鏡或剖腹手術(shù)治療且病理確診子宮內(nèi)膜異位癥患者50例為觀(guān)察組，據(jù)ASRM修訂的子宮內(nèi)膜異位癥分期法(1997)進(jìn)行評(píng)分，均為III、Ⅳ期，年齡為22-45歲，平均年齡為（32.8±2.8）歲；對(duì)照組為同期本院行陰道超聲檢查未發(fā)現(xiàn)異常，卵巢功能正常的50例健康育齡婦女，年齡為21-44歲，平均年齡為（33.4±3.6）歲。

1.2 方法

采集觀(guān)察組和對(duì)照組外周靜脈血4ml，置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆茫崛NA后，采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性方法對(duì)IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)（rs1800795和rs1800796)的兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)測(cè)定并分析。IL-6啟動(dòng)子-rs1800795，上游:5'- ACGTTGGATGAGCCTCAATGACGACCTAAG-3'下游:5'- ACGTTG GATGGATTGTGCAATGTGACGTCC-3'I L-6啟動(dòng)子-r s 1 8 0 0 7 9 6上 游:5'-A C G TTGGATGTCTTCTGTGTTCTGGCTCTC-3'下游:5'-ACGTTGGA TGACGCCT TGAAGTAACTGCAC-3'。PC R反應(yīng)體系為，上游引物1.0μl,下游引物1.0ul，2.5μl的10×PC R緩沖液，4.0μl的濃度為10mmol/L的dNTP，1.0μl的 模板DNA，0.2μl的濃度為5U/μl的Taq DNA酶，然后加水至25μl。具體條件:94℃溫度條件下預(yù)變性時(shí)間為5min，變性時(shí)間為40s，58℃退火時(shí)間為1min，35次循環(huán)之后72℃條件下延伸5min[4]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，直接計(jì)數(shù)法計(jì)算各等位基因的基因表達(dá)頻率，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，以非條件性logistic回歸模型計(jì)算的比值比（odds ratio,OR）及95%可信區(qū)間表示各基因型與EMS發(fā)生的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者IL-6 rs1800795 位點(diǎn)基因型和等位基因頻率分布及相關(guān)性比較

rs1800795C/G基 因 在 觀(guān) 察 組CC，CG，GG基 因 型頻率分別為10. 0%、42.0%和48.0%，對(duì)照組分別為26.0%、36.0%和38.0%，兩組基因型頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.031;OR=0.51，95% CI:0.32-0.81)。觀(guān)察組和對(duì)照組rs1800795G等位基因頻率分別為55.0%和42.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)果顯示IL-6 rs1800795位點(diǎn)基因多態(tài)性可能與EMS發(fā)展相關(guān)。見(jiàn)表1。

表1 兩組IL-6 rs1800795 位點(diǎn)基因型和等位基因頻率分布及相關(guān)性比較[n（%)]

2.2 兩組患者IL-6 rs1800796 位點(diǎn)基因型和等位基因頻率分布及相關(guān)性比較

rs1800796C/G 基因在觀(guān)察組 CC，CG，GG基因型頻率分別為 12. 0%、50.0%和38.0%，對(duì)照組分別為26.0%、42.0% 和 32.0%，觀(guān)察組和對(duì)照組基因型頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P=0.034; OR=0.65，95% CI: 0.42-0.89)。觀(guān)察組和對(duì)照組 rs1800796 G等位基因頻率分別為 59.0% 和43.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。結(jié)果顯示IL-6 rs1800796位點(diǎn)基因多態(tài)性可能與 EMS 發(fā)展相關(guān)[5]。

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥具有復(fù)雜的遺傳病因，遺傳變異和環(huán)境因素的相互作用，遺傳因素約占子宮內(nèi)膜異位癥風(fēng)險(xiǎn)變異的一半[6]。最近研究顯示，越來(lái)越多的證據(jù)表明激素和免疫因素會(huì)產(chǎn)生微環(huán)境可導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位癥[7]。子宮內(nèi)膜異位癥被認(rèn)為是一種炎癥過(guò)程[8]。IL-6基因(白細(xì)胞介素-6)為位于7號(hào)染色體(7p21)，一種由多種細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，如B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。IL-6可調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜異位癥生理和致病過(guò)程，如炎癥反應(yīng)，細(xì)胞成熟和分化[9]。研究表明，血清和腹膜液中這種促炎細(xì)胞因子的存在與子宮內(nèi)膜異位癥有關(guān)[10，11]。IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)鳥(niǎo)嘌呤與胞嘧啶的交換(rs1800795和rs1800796)，可能干擾IL-6的表達(dá)，被認(rèn)為是子宮內(nèi)膜異位癥的可能致病機(jī)制。有研究顯示在IL-6基因多態(tài)性與巴西女性子宮內(nèi)膜異位癥增多無(wú)關(guān)。Wang等[12]研究顯示 在 中 國(guó)，IL-2 rs11575812 (T＞C) 、rs2069772 (A＞G)和IL-6 rs1800795(C/G) GG基因型增加EMT發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，此與本研究結(jié)論相同。

綜上所述，IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病密切相關(guān)，此基因可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病過(guò)程。尋找新的遺傳標(biāo)記可能為子宮內(nèi)膜異位癥的預(yù)測(cè)傾向，盡早采取合理的預(yù)防措施。